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摘要目的：研究Toll样受体4（TLR4）在脂多糖（LPS）诱导人肝内胆管上皮细胞(HI BECs)上皮-间质转化（EMT）中的作用及核转录因子Snail是否与参与该过程的调控。方法：体外培养人肝内胆管上皮细胞，CON+LPS组加终浓度为2ug/ml的LPS诱导72h，CON组不作处理作为对照。倒置相差显微镜观察细胞形态变化；Real-time PC R检测上皮标记物E-cadherin，间质标记物N-cadherin、Vimentin，TLR4、核转录因子Snail mRNA表达量；Western blot检测以上各指标蛋白表达量；Transwell细胞迁移实验评估各组细胞移动能力。KD+LPS组构建TLR4 siRNA慢病毒载体，采用RN A干扰技术沉默HIBECs中TLR4，NC+LPS组空白病毒转染作为对照，转染72h后分别予终浓度为2ug/ml的LPS诱导，72h后通过上述方法观察慢病毒转染对LPS诱导的细胞形态改变，TLR4、Snail、上皮间质标记物基因表达改变的影响。<br>　　结果：<br>　　1.LPS诱导 HIBECs72h，CON+LPS组细胞由上皮向间叶样细胞形态改变；与CON组相比，CON+LPS组上皮标记物 E-cadherin mRNA表达下调（P<0.05），间质标记物N-cadherin、Vimentin mRNA表达上调（P<0.05，P<0.05）；上述指标蛋白水平表达趋势与mRNA一致；两组细胞转移率无差异（P＞0.05）；提示：LPS可诱导HIBECS发生EMT。<br>　　2.CON+LPS组TLR4 mRNA表达量高于CON组（P<0.05）；蛋白水平表达前者较高；提示：LPS可导致HIBECs中TLR4表达增加。<br>　　3.CON+LPS组Snail mRNA表达量高于CON组（P<0.05）；蛋白水平表达前者较高；提示：LPS可导致HIBECs中Snail表达增加。<br>　　4.KD+LPS组TLR4 SiRNA慢病毒转染HIBECs，TLR4 mRNA表达量较NC+L PS组降低（P<0.05）；蛋白水平表达量前者较低。提示：TLR4 SiRNA慢病毒转染能减弱LPS诱导HIBECs中TLR4基因表达上调。<br>　　5.沉默HIBECs中TLR4，KD+LPS组Snail mRNA表达量较NC+LPS组降低（P<0.05）。蛋白水平表达前者较低。提示：沉默TLR4能减弱LPS诱导HIBECs中Sn ail基因表达上调。<br>　　6.沉默HIBECs中TLR4，KD+LPS组细胞由上皮向间叶样细胞形态改变不明显。与NC+LPS组比较，KD+LPS组上皮标记物E-cadherin mRNA表达较高（P<0.05），间质标记物N-cadherin、Vimentin mRNA表达较低（P<0.05，P<0.05）。两组上述指标蛋白水平表达趋势与mRNA表达一致。提示：沉默TLR4能阻断LPS诱导HIBEC s发生EMT。<br>　　结论：<br>　　1. LPS通过激活TLR4诱导HIBEC发生EMT；<br>　　2. LPS诱导HIBECs发生EMT可能受转录因子Snail调控。