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摘要火龙果（Hylocereus）是一种极具市场潜力的热带水果，其果皮和果肉积累甜菜素，也是目前唯一富含甜菜素的水果之一。甜菜素是四大类天然色素之一，它不仅在植物中起呈色作用，还起着重要的渗透调节作用，同时有助于植物适应逆境。甜菜素既可以作为食品、药品的着色剂，又因其良好的抗氧化能力具有一定的药用功效。然而，目前尚且没有火龙果内参基因的筛选和有关甜菜素生物合成途径相关基因的研究报道。本研究以红皮白肉和红皮红肉火龙果不同组织以及不同发育阶段果肉作为材料，在筛选出适宜于火龙果不同组织以及果实不同发育阶段果肉的内参基因的基础上，克隆了4个可能参与火龙果甜菜素生物合成相关酶基因的cDNA序列，分析了它们的时空表达情况，并构建了这4个基因的植物表达载体，对拟南芥和烟草进行了遗传转化。主要研究结果如下：<br>　　1、从火龙果转录组数据库和拟南芥信息咨询中心中挑选出30个候选基因。根据溶解曲线判断引物的特异性以及Ct值共筛选出5个内参基因分别是ACT1（1）、EF1-α、GAPDH、ACT1（2）和TUA进行后续的实验。<br>　　系统筛选火龙果不同组织器官及果肉不同发育阶段下合适的内参基因，用geNorm、NormFinder和 BestKeeper分析软件对GAPDH、ACT1(2)、ACT1(1)、TUA、和EF1-α等5个常用候选内参基因进行了比较分析，虽然3种不同算法下，样品各内参基因表达的稳定性有一定的差异，但是GAPDH始终是最为稳定的内参基因。最终筛选出火龙果不同组织和果实不同发育时期最为稳定的内参基因GAPDH。<br>　　2、通过RT-PCR法克隆得到4个可能参与火龙果果肉甜菜素生物合成相关酶基因的cDNA序列，分别命名为:35191、36993、36238和32889。在氨基酸水平上，35191和36993与甜菜细胞色素P450基因（CYP450）的同源性分别为71%和66%，与紫茉莉CYP450的同源性分别为78%和62%；36238和32889与甜菜葡糖基转移酶基因（GT）的同源性分别为66%和63%，与紫茉莉GT的同源性分别为61%和62%。说明克隆的35191和36993可能是火龙果中参与甜菜素生物合成的CYP450基因，36238和32889可能是火龙果中参与甜菜素生物合成的GT基因。<br>　　3、荧光定量PCR结果表明，35191、36993、36238和32889基因在红皮红肉和红皮白肉火龙果果肉不同发育阶段以及红皮红肉火龙果不同组织器官中的表达趋势与转录组数据一致，表明这4个基因的表达可能与甜菜素的生物合成密切相关。<br>　　4、通过农杆菌介导法分别将35191、36993、36238和32889基因导入了拟南芥和烟草，分别获得了转35191、36993、36238和32889基因拟南芥PCR阳性植株38、42、53和49棵，获得转35191、36993、36238和32889基因烟草PCR阳性植株13、10、13和12棵。