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摘要80%的细菌感染病例与生物膜的形成相关，生物膜是细菌逃避机体免疫和抵抗抗菌药物的天然屏障。铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa，P.aeruginosa）是一种典型的能形成生物膜的革兰氏阴性菌，其能附着在医疗设备表面或在感染机体后形成生物膜，难以去除和治愈。P.aeruginosa的群体感应系统与生物膜的形成过程密切相关，群体感应系统介导信号分子与其受体蛋白结合，控制生物膜的形成与毒力因子的产生，所以通过破坏群体感应系统的策略增加P.aeruginosa对抗菌药物的敏感性是较为可行的。群体感应系统发挥作用依赖于信号分子的合成、释放和摄取，所以可通过阻断合成酶蛋白合成信号分子的过程、降解信号分子、干扰受体蛋白的活性或阻止信号分子-受体蛋白复合物的形成等策略来破坏群体感应系统，其中酰化酶（acylase，AC）可有效降解革兰氏阴性菌的信号分子，抑制生物膜的形成。此外，聚多巴胺（polydopamine，PDA）具有良好的粘附性、优异的生物相容性和良好的光热性能，其结构中含有邻苯醌、氨基、酚羟基、亚胺等多种活性基团，可以有效负载多种药物。<br>　　为了促进抗生素对于生物膜的穿透，本文制备了大小适宜的聚多巴胺纳米颗粒（polydopamine nanoparticles，PDA NPs），并用其负载环丙沙星（Ciprofloxacin，Cip）。<br>　　本课题研究的主要内容和结论如下：<br>　　1.制备纳米颗粒：首先制备了PDA NPs，并通过动态激光散射纳米粒度仪（dynamic light scattering，DLS）、透射电子显微镜（transmission electron microscopy，TEM）和紫外-可见分光光度计（Ultraviolet and visible spectrophotometry，UV-vis）等方式表明其成功制备；此外，通过π-π堆积相互作用力负载Cip，并通过DLS、TEM、UV-vis、和荧光分光光度计等手段表明了负载环丙沙星的聚多巴胺纳米颗粒（PDA@Cip NPs）的成功制备；通过经典的席夫碱反应将AC固定在PDA NPs的表面，通过DLS和TEM表明负载了环丙沙星和酰化酶的纳米颗粒（PDA@Cip@AC NPs）制备成功。<br>　　2.评价了纳米颗粒的生物相容性和抗菌活性：通过活/死细胞染色实验和Alamar blue（AB）实验表明PDA@Cip@AC NPs具备良好的细胞相容性；将PDA@Cip@AC NPs与红细胞共孵60min，表明PDA@Cip@AC NPs具备优异的血液相容性。随后，考察PDA@Cip@AC NPs的抗菌活性，将其与P.aeruginosa共孵24h后，通过涂板计数实验、活/死细菌染色实验和扫描电子显微镜（scanning electron microscope，SEM）表征考察了PDA@Cip@AC NPs的抗菌活性，结果表明其具有优异的抗菌活性。<br>　　3．考察了纳米颗粒的体外抗生物膜活性：通过结晶紫（crystal violet，CV）染色实验、活/死细菌染色实验和SEM表征等考察了PDA@Cip@AC NPs的抗生物膜效果，结果表明其具有优异的抗生物膜效果。