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摘要目的：近年来，随着社会经济的发展和人民生活水平的提高，非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)的发病率逐渐上升，它可以发展为肝纤维化、肝硬化等终末期肝病，因此已成为全球普遍关注的医学和社会问题。NAFLD是一类肝组织学改变与酒精性肝病相类似，但无过量饮酒史的临床病理综合征。对其发病机制的研究很多，但没有突破性进展。脂肪代谢障碍使肝脏脂肪内环境失衡是肝脂肪变性的基础，而氧化应激被认为是肝脏脂肪变发展为脂肪性肝炎的催化剂。硫氧还蛋白是一种氧化应激诱导的蛋白，在多种疾病中其表达的上调对机体起保护作用。目前临床对NAFLD防治效果尚不理想。本文根据中医理论组成降脂益肝冲剂，探讨大鼠肝组织硫氧还蛋白(Trx)mRNA的表达在NAFLD发病机制中的作用，并研究降脂益肝冲剂防治NAFLD发病和进展的疗效及作用机制。 方法： 1．动物模型的建立及标本的采集：72只雄性Wistar大鼠正常喂养一周后，按体重层次随机分为正常对照组(N组)：给予正常饲料；模型对照组(M组)，药物干预组(D组)：给予高脂饲料(85％普通饲料，13％的猪油和2％的胆固醇)，每组24只，分别设9、13、18周三个时相点，每个时相点8只大鼠，相对应的组别为N<,1>、N<,2>、N<,3>，M<,1>、M<,2>、M<,3>，D<,1>、D<,2>、D<,3>组。D<,1>、D<,2>、D<,3>组分别于实验第0周、第8周和第13周开始灌胃给药，给予降脂益肝冲剂1ml/100g，以0.8g/ml的浓度溶解灌胃，每日两次，分别持续9W，5W，5W。同时模型组和正常组分别给予等量的生活饮用水灌胃，每日两次。实验结束后分阶段处死各组大鼠，自腹主动脉采血，迅速取出肝脏，按常规制备血清、肝匀浆以及肝组织切片，并留取少量肝组织于-70℃低温保存。 2．检测指标：测体重、体长、肝脾湿重，并计算肝指数(肝湿重/体重×100％)、Lee's指数(体重<'0.33>/体长×1000)及肝脾比值(肝湿重/脾湿重)等体质指标；全自动生化分析仪测定血清丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、血脂及肝组织脂质含量，葡萄糖氧化酶法测定空腹血糖(FBG)，铜染色法测定血清和肝组织游离脂肪酸(FFA)水平，放免法测定血清空腹胰岛素(FINS)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平，计算胰岛素敏感指数(ISI=1n(1/(FINSxFBG)))；比色法测定血清和肝组织还原性谷胱甘肽(GSH)含量，黄嘌呤氧化酶法测定血清和肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活性；硫代巴比妥酸法测定血清和肝组织丙二醛(MDA)含量；光镜下评估肝组织脂肪变性和炎症活动情况；逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定。Trx mRNA的表达。 结果： 9周后模型组大鼠出现了明显的脂质代谢紊乱，伴随高胰岛素血症和胰岛素抵抗；血清转氨酶水平较正常组明显升高，TNF-α水平升高；血清和肝组织中GSH含量、SOD活力明显降低，MDA含量升高；肝组织Trx mRNA的表达明显降低，出现了轻到中度脂肪变，且无炎细胞浸润；用药组大鼠血清和肝组织脂质含量较模型组均有明显改善，同时反映胰岛素抵抗的ISI也较模型组显著升高； TNF-α、转氨酶水平、MDA含量明显降低，GSH含量、SOD活力明显升高，肝组织Trx mRNA表达显著升高(P<0.05)，肝组织脂变程度较模型组明显减轻(P<0.01)。 13周后，模型组大鼠胰岛素抵抗程度较前无明显进展；和正常组相比，血脂和肝脏脂质含量、血清TNF-α含量、转氨酶水平明显升高；血清和肝组织MDA含量明显升高，GSH含量、SOD活力、HDL-C含量明显降低；肝组织Trx mRNA表达显著降低，但和前期相比显著升高(P<0.01)；肝组织出现中到重度脂肪变，肝小叶内炎细胞浸润和散在的点状坏死，炎症活动度计分明显高于正常组(P<0.01)。用药组大鼠胰岛素抵抗及脂质代谢紊乱有明显改善，血清转氨酶、TNF-α水平明显降低；血清和肝组织MDA含量明显降低，GSH含量、SOD活力、HDL-C含量显著升高；肝组织Trx mRNA表达显著升高；肝组织脂变程度也较模型组明显减轻(P<0.01)，炎症活动度也明显减轻(P<0.01)。 18周后，模型组大鼠胰岛素抵抗程度较前仍无明显进展；和正常组相比，血脂和肝脏脂质含量、血清TNF-α含量、转氨酶水平明显升高；血清和肝组织MDA含量明显升高，GSH含量、SOD活力、HDL-C含量明显降低；肝组织Trx mRNA表达显著降低，但和前期相比有所升高(P<0.01)；肝组织弥漫性脂肪变性及气球样变性，炎症活动度计分明显高于正常组(P<0.01)；治疗组大鼠血脂和肝脏脂质含量、血清TNF-α含量、转氨酶水平明显降低；血清和肝组织MDA含量明显降低，GSH含量、SOD活力、HDL-C含量、ISI值明显升高；肝组织Trx mRNA表达明显升高；肝组织脂变及气球样变程度明显减轻(P<0.01)，炎症活动度也明显减轻(P<0.01)。 结论： 1．脂质代谢紊乱，氧化应激和脂质过氧化损伤以及一些细胞因子如TNF-α紊乱与NAFLD的发生密切相关。 2．胰岛素抵抗在肝组织发生脂肪变性过程中起关键作用，但在单纯性脂肪肝进展到NASH过程中不发挥主要作用。 3．NAFLD大鼠肝组织Trx mRNA表达下调，并且可能在形成单纯性脂肪肝后降至最低值，同时可能是其进展为NASH的一个始动因素；首次证明NAFLD动物模型中Trx mRNA表达下调。 4．降脂益肝冲剂对实验性大鼠NAFLD有防治效果，其可能的作用机制如下： (1)降脂益肝冲剂能显著降低NAFLD大鼠血清和肝组织中TC、TG、LDL-C、FFA含量，显著升高HDL-C含量，改善高血脂、高肝脂状态，从而很好地调整脂质代谢，减少肝脏脂质沉积减轻肝细胞脂肪变性。 (2)降脂益肝冲剂能升高胰岛素敏感指数改善胰岛素抵抗。 (3)降脂益肝冲剂能提高抗氧化酶GSH含量和SOD的活性，降低脂质过氧化物MDA含量，降低氧应激和脂质过氧化损伤，纠正体内氧化抗氧化失衡状态，从而阻断 NAFLD的进一步发展。 (4)降脂益肝冲剂能显著降低血清ALT、AST水平，促进肝功能的恢复。 (5)降脂益肝冲剂能改善肝组织脂肪变性，且有明确的抗炎效应。 (6)降脂益肝冲剂能够上调肝组织Trx mRNA的表达。 (7)降脂益肝冲剂能够从多角度、多靶点对NAFLD的发生发展进行干预，且早期治疗长疗程应用对NAFLD的防治作用更好，该药值得推广应用。