检索历史 清除

摘要脂质体由于诸多优点在药物递送领域得到了广泛的应用。然而，脂质体长期放置不稳定，会发生聚集、药物泄露等。通过冷冻干燥技术可以将脂质体制成固体制剂，是解决脂质体稳定性问题的最有效方法之一，但是冻干过程会破坏脂质体的结构，使脂质体难以复原。本文拟采用内部增稠的策略使脂质体内核趋向于“固化”，“固化”的内核在冷冻干燥过程中将起到内部支撑作用，避免冰晶和脱水过程对脂质体的破坏，提高脂质体冻干的稳定性。本文首先制备了微米级的内部增稠脂质体，以方便验证内部增稠现象，方便进行表征;在此基础上，探索内部增稠脂质体的应用潜力，制备了纳米级内部增稠的含胆盐脂质体，做为促进难溶性药物经口服吸收的载体，以提高其生物利用度。<br>　　本文采用薄膜分散法制备了内部明胶增稠脂质体(gelatin-thickenedliposomes，GTLs)。采用光学显微镜和透射电子显微镜观察了GTLs的形态。采用荧光显微镜观察GTLs，用Triton X-100将脂质膜破坏，观察脂质体的形态变化和荧光的分布情况，证实了脂质膜破坏后凝胶内核依然存在，据此确认脂质体内部胶凝化现象。采用搅拌子法测定了明胶体系胶凝温度，采用羧基荧光素荧光指示剂法测定了GTLs的内部胶凝温度，结果表明脂质体内部胶凝温度略低于同浓度明胶溶液的胶凝温度。采用DPH标记法考察了脂质体膜流动性，结果表明脂质体内部胶凝后膜流动性降低。<br>　　以紫杉醇(Paclitaxel，PTX)作为模型药物制备了内部明胶增稠冻干脂质体，对脂质体处方、冻干工艺和冻干处方进行了系统的考察。扫描电镜观察冻干后的脂质体，普通脂质体冻干后可见大量药物晶体析出，GTLs可维持球形结构，抑制结晶析出。比较了冻干脂质体再分散后的包封率，结果表明，普通脂质体冻干再分散后包封率降到18％，脂质体内外同时含有冻干支架剂保护作用不明显，而GTLs冻干后包封率可维持84％以上。<br>　　以环孢素A(Cyclosprine A，CyA)作为模型药物制备了纳米级内部明胶增稠含胆盐冻干脂质体，对脂质体处方进行了系统的考察。以冻干品外观和再分散性为指标筛选了冻干支架剂。透射电镜观察冻干脂质体再分散后形态，普通含胆盐脂质体聚集明显，内部明胶增稠含胆盐脂质体变化不大。比较了不同脂质体冻干前后的粒径，普通含胆盐脂质体冻干后由于发生粘连使重组后的粒径和分布均显著增大，内部明胶增稠含胆盐脂质体冻干前后粒径和分布无显著差异。<br>　　环孢素A内部明胶增稠含胆盐脂质体(CyA-D-GTLs)的大鼠口服药动学研究表明:与自微乳化制剂新山地明和普通脂质体(CyA-CLs)相比，CyA-D-GTLs在大鼠体内的达峰时间明显延长，具有一定的缓释效果。CyA-D-GTLs的口服吸收明显高于新山地明和CyA-CLs，其生物利用度是新山地明的1.18倍、CyA-CLs的1.20倍。CyA-D-GTLs的各药动学参数与环孢素A普通含胆盐脂质体(CyA-DLs)均无显著差异。<br>　　环孢素A内部明胶增稠含胆盐冻干前体脂质体(CyA-pro-D-GTLs)的Beagle犬口服药动学结果表明:CyA-pro-D-GTLs的Cmax和AUC0-t显著高于环孢素A含胆盐冻干前体脂质体(CyA-pro-DLs)，说明冻干后普通含胆盐脂质体受到破坏，吸收降低。CyA-pro-D-GTLs的生物利用度分别是CyA-pro-DLs的1.34倍、CyA-D-GTLs的1.27倍、新山地明的1.65倍。说明将凝胶溶液作为脂质体的内核制备成GTLs后，可以提高含胆盐脂质体的稳定性,且不减少含胆盐脂质体的口服吸收，使含胆盐脂质体的固体化成为可能。<br>　　建立大鼠颈静脉-肠系膜淋巴双插管模型，考察药物经淋巴吸收情况，结果表明CyA-D-GTLs的经淋巴转运显著高于CyA-CLs，说明含胆盐脂质体口服吸收高于普通脂质体可能是促进了脂质体整个经M细胞摄取通过淋巴转运吸收，而CyA-D-GTLs的经淋巴转运显著低于新山地明，说明CyA-D-GTLs促进难溶性难透过性药物吸收还有其他机制共同作用。<br>　　本文成功地以明胶作为脂质体的内核，制备了GTLs，并将内部明胶增稠用于提高脂质体的冻干稳定性，结果显示不论是微米级的普通脂质体还是纳米级的含胆盐脂质体，内部明胶增稠都可以维持脂质体的结构，提高脂质体在冷冻干燥过程中的稳定性。应用本文所建立的GTLs成功地将含胆盐脂质体固体化，提高了难溶性难透过性药物的口服吸收生物利用度。本文为将脂质体制成冻干固体制剂提供了一种新思路，具有潜在应用价值。