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重组人粒细胞集落刺激因子的原核表达及特性研究

摘要粒细胞集落刺激因子(granulocyte colony stimulating factor,G-CSF)是粒细胞的促增殖因子,其主要作用于骨髓内定定向分化为成熟粒细胞的前体细胞,促进其增殖、分化为粒细胞.人们发现无论使用何种表达系统,rhG-CSF的表达水平始终较低.这就在很大程度上限制了rhG-CSF的应用.针对这一问题,研究人员自行设计构建了新的原核表达载体pT7,同时对hG-CSF cDNA序列进行了优化,并在此基础上构建出了rhG-CSF的高效载体pHG113.将pHG113转化入大肠杆菌BL21(DE3),获得了rhG-CSF的高效表达工程菌BHG113.利用BHG113表达rhG-CSF,表达量高达全菌可溶性蛋白的37i以上.同时研究人员还筛选出了一套简便易行的rhG-CSF制备工艺,以此工艺制备出的rhG-CSF具有较高的纯度和生物学活性.通过药效试验和毒性试验研究证明,研究人员制备出的rhG-CSF可用于中性粒细胞减少症的治疗,而且安全性、稳定性等均已经达到国家药检部门规定的人体药用标准.

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