换一批摘要目的 研究HCMV pp65 DNA疫苗(pcDNA3.1-pp65)的纯化工艺,并建立质控标准.方法 对工程菌(DH5α/peDNA3.1-pp65)的高效发酵菌体采用碱裂解法进行质粒初提;三步柱层析(依次为分子筛层析、亲和层析、阴离子层析)对质粒进行纯化,检测质粒含量、超螺旋比例、内毒素等,最后对终产品质粒溶液进行全面质量检定.结果 质粒初提液通过分子筛层析后,去除了大量RNA、宿主DNA、内毒素等,再经亲和柱纯化后获得了高比例的超螺旋质粒DNA,达95%,经阴离子柱层析有效去除内毒素,质粒得率为0.8～0.95 mg/g菌,质粒总回收率达72.7%.三批终产品全面质量检定均符合规定.结论 建立了稳定的HCMV pp65 DNA疫苗(pcDNA3.1-pp65)纯化工艺及质量控制标准,为进一步研究奠定了重要基础.
更多相关知识
分类号
R3（基础医学）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1000-0399.2010.03.003
发布时间
2010-05-26（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
- 浏览160
- 被引0
- 下载45
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
