换一批共表达甲型流感病毒M1和HA双基因的重组腺病毒的构建及鉴定
Construction of Recombinant Adenovirus Co-expressing M1 and HA Genes of Influenza Virus Type A
摘要以我国分离的首株人H5N1亚型禽流感病毒(A/Anhui/1/2005)作为研究对象,通过引入内部核糖体进入位点序列(IRES),构建共表达H5N1亚型禽流感病毒膜蛋白基因M1和HA的重组腺病毒.PCR扩增禽流感病毒H5N1亚型M1和HA基因的全长可读框片段,先后亚克隆入pStar载体,然后扩增M1-IRES-HA片段并将其插入穿梭载体pShuttle-CMV,再与pAd-Easy载体在BJ5183菌中通过同源重组产生重组腺病毒载体,转化293细胞,包装出重组腺病毒Ad-M1/HA.将Ad-M1/HA感染293细胞,可观察到明显细胞病变效应,用免疫荧光及Westernblot方法均检测到M1和HA基因的表达.共表达M1和HA双基因的重组腺病毒的成功构建为开发新型重组腺病毒流感疫苗奠定了基础.
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医学主题词
内部核糖体进入位点(Internal Ribosome Entry Sites)蛋白(Egg White)正黏病毒科(Orthomyxoviridae)蛋白质亚型(Protein Isoforms)禽流感(Influenza in Birds)
栏目名称
DOI
10.3321/j.issn:1000-8721.2009.02.005
发布时间
2009-06-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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