利用Tet-on系统构建调控APPswe基因表达的SH-SY5Y细胞模型
Construction of SH-SY5Y cells with APPswe expression using inducible Tet-On system
摘要目的 利用Tet-On诱导可调控系统构建表达淀粉样前体蛋白突变基因(APPswe)细胞模型.方法 构建重组质粒pTRE-APPswe-Flag,利用慢病毒将其包装转染SH-SY5Y细胞.Puromycin筛选72 h后,通过强力霉素诱导,Western blot检测验证,免疫荧光检测APPswe表达情况.结果 强力霉素诱导后,筛选的细胞Western blot检测Flag标签蛋白表达明显,免疫荧光显示APPswe蛋白表达增加;撤掉强力霉素后,APPswe蛋白表达减少.结论 成功构建了可调控Tet-On-APPswe表达SH-SY5Y细胞系统模型.
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