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RNA干扰沉默低氧诱导因子-1α对低氧下大鼠肺动脉平滑肌细胞增殖的影响

Effects of RNAi on hypoxia inducible factor-1α activity and proliferation of hypoxic pulmonary artery smooth muscle cells in rat

摘要:

本研究应用基因克隆技术,将合成的发卡样特异性低氧诱导因子-1α(hypoxiainduciblefactor-1 alpha,HIF-1α)干扰寡核苷酸(siRNA)序列插入真核表达载体中,构建出特异性HIF-1αt基因RNA干扰(RNAi)真核表达载体.采用组织块种植法,原代培养大鼠肺动脉平滑肌细胞(pulmonary artery smooth muscle cells,PASMCs),将构建出的特异性HIF-1α RNAi真核表达载体转染到PASMCs;分别在常氧和低氧下进行细胞培养,采用RT-PCR检测PASMCs HIF-1α mRNA表达水平,用MTT和流式细胞仪检测细胞增殖水平,探讨低氧条件下HIF-1α RNAi真核表达载体对PASMCs增殖的影响.结果表明,低氧培养48 h后,正常PASMCs和转染了HIF-1α siRNA阴性表达载体的细胞增殖显著,HIF-1αmRNA表达水平也显著升高;而转染了HIF-1α siRNA阳性表达质粒的细胞增殖不显著,HIF-1αmRNA表达水平较低.结果提示:HIF-1αRNAi真核表达载体能显著干扰培养的PASMCs HIF-1α mRNA表达,同时抑制低氧环境下PASMCs的增殖.

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作者: 张伟 [1] 曹越 [1] 张昱 [1] 马祁生 [1] 马兰 [1] 格日力 [1]
期刊: 《生理学报》2006年58卷1期 71-76页 MEDLINEISTICPKUCSCDBP
分类号: Q463R331.3
栏目名称: 研究论文
DOI: 10.3321/j.issn:0371-0874.2006.01.012
发布时间: 2006-04-13
基金项目:
中国科学院资助项目
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