胭脂鱼胰蛋白酶cDNA克隆以及不同蛋白含量日粮和饥饿对mRNA表达和酶活力的影响
MOLECULAR CLONING OF TRYPSIN AND THE EFFECT OF DIETARY PROTEIN LEVELS AND STARVATION ON TRYPSIN mRNA EXPRESSION AND ENZYME ACTIVITY IN JUVENILE CHINESE SUCKER (MYXOCYPRINUS ASIA TICUS BLEEKER)
摘要为检测不同蛋白含量的日粮和饥饿对胭脂鱼(Myxocyprinus asiaticus)幼鱼胰蛋白酶活性和mRNA表达的影响,首先用RACE和PCR的方法从胭脂鱼幼鱼的肝胰脏组织中克隆得到胰蛋白酶cDNA全长,然后用半定量RT-PCR和酶活性检测方法分别检测了经不同蛋白含量日粮(酪蛋白含量分别为35%、45%和55%)投喂和饥饿处理后的胭脂鱼幼鱼的胰蛋白酶mRNA表达水平和胰蛋白酶活力的变化.结果显示,胭脂鱼胰蛋白酶cDNA全长为912 bp.投喂蛋白质含量适中(45%酪蛋白)日粮组的试验鱼胰蛋白酶活性和mRNA水平高于投喂高蛋白水平日粮组(55%酪蛋白)和低蛋白水平日粮组(35%酪蛋白);饥饿明显降低mRNA水平和胰蛋白酶活性;胰蛋白酶活性的变化滞后于mRNA水平的变化.胰蛋白酶活力的变化与mRNA水平的变化之间未呈现直接相关性.因此,胭脂鱼胰蛋白酶合成可能是一个由多种因素共同调控的复杂过程.
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