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RNA干扰下调宫颈癌Hela细胞survivin基因对Hela细胞增殖能力影响的研究

Effects of the down-regulated expression of Survivin gene by RNA interference on proliferation a-bility of cervical carcinoma cell Hela

摘要目的:通过RNA干扰技术下调宫颈癌Hela细胞survivin基因表达,观察Hela细胞增殖能力的变化情况。方法:当细胞生长至70.0%左右覆盖率时进行脂质体转染,细胞分为空白组( Hela细胞未转染组)、阴性对照组(转染空质粒)、实验组[ survivin—siRNA(+)质粒转染Hela细胞]三组。采用脂质体介导的方法将特异针对Hela细胞sur-vivin基因的干扰RNA转染入细胞后不同时间观察细胞生长形态的变化,记录转染后第1天到第5天每天的生长情况并绘制生长曲线,通过四甲基偶氮唑蓝( MTT)实验记录24 h,48 h,72 h活细胞数量,总结分析细胞生长情况。结果:RNA干扰后出现细胞生长速度减慢,实验组与空白组比较,从第3天到第5天空白组细胞数明显高于实验组(第3天P<0.05,第4天、第5天P<0.01)。实验表明,干扰24 h后实验组活细胞数量与空白组、阴性对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05),48 h及72 h实验组活细胞数明显低于空白组与阴性对照组(P<0.01)。结论:survivin基因沉默能够有效特异地抑制宫颈癌Hela细胞的体外恶性增殖能力,有利于细胞的凋亡,survivin基因可以作为宫颈癌基因治疗的靶点。

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