换一批
换一批小鼠γ-干扰素真核表达质粒的构建和鉴定
Construction and Identification of Mouse Gamma Interferon Gene Eukarotic Expressing Plasmid
摘要：
目的克隆小鼠γ-干扰素(γ-IFN)基因,构建并鉴定小鼠γ-干扰素真核表达质粒.方法从BALB/c小鼠脾脏提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出小鼠γ-干扰素基因, 分别用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切扩增片段和pcDNA3.1(-),定向克隆到真核表达质粒pcDNA3.1(-),构建成真核表达质粒pcDNA3.1(-)γ-IFN.转化产物通过PCR扩增筛选,双酶切鉴定;阳性克隆进行序列分析.结果 RT-PCR产物电泳可见一约500bp大小目的片段.PCR和双酶切电泳结果均证实已插入约500bp的γ-IFN基因片段;阳性克隆测序结果表明克隆的小鼠γ-干扰素基因完全正确.结论成功构建了小鼠γ-干扰素真核表达质粒,为进一步气道内实施哮喘小鼠基因治疗打下了坚实基础.
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作者：
作者单位：
中山大学附属第二医院呼吸内科,广州,510120
[1]
期刊：
《现代临床医学生物工程学杂志》2003年9卷6期 482-483,485页
ISTIC
分类号：
R-33
栏目名称：
论著
DOI：
10.3760/cma.j.issn.1674-1927.2003.06.010
发布时间：
2004-02-20
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- 被引：3
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