测定外周血核黄素及其衍生物含量的 HPLC方法研究
DETERMINATION OF RIBOFLAVIN, FMN, AND FAD IN HUMAN PLASMA AND ERYTHROCYTES BY HIGH PERFORMANCE LIQUID CHROMATOGRAPHY
摘要目的:建立测定外周血核黄素及其衍生物FMN、FAD含量的高效液相色谱方法.方法:血浆和红细胞样品用乙腈、三氯甲烷处理,离心后取上清液进样分析.采用Waters AtlantisTMC18色谱柱(150 mm×4.6 mm I.d.,5μm)分离,以甲醇-5mmol/L乙酸铵(体积比为35:65)为流动相,流速1.0ml/min,荧光检测器检测(激发波长450 nm,发射波长520 nm).结果:本法测定核黄素、FMN、FAD的线性范围均为1~400 nmol/L,最低检测限依次分别为0.2、0.25、0.25 nmol/L(S/N=3);日内和日间测定的峰面积的相对标准偏差(RSD)核黄素分别为1.3%,2.2%,FMN分别为2.9%,3.7%,FAD分别为2.0%,3.6%.三者在血浆样品和红细胞样品中的加标回收率均达到要求.结论:本法灵敏、快速、准确,可用于测定血浆和红细胞中核黄素、FMN、FAD含量.
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