HIV-1 GP120主要抗原性片段的制备及其在HIV诊断中的应用
Preparation of Major Antigen Fragment of HIV-1 GP120 and Its Application in Diagnosis of HIV
摘要目的研制HIV中国流行株RL42 GP120主要抗原性片段,以便进一步开发HIV抗体检测试剂.方法克隆RL42毒株GP120蛋白C-端250个氨基酸的编码序列,克隆入大肠杆菌表达载体pBV220进行表达.通过包涵体处理和离子交换层析纯化目的蛋白.将纯化后的蛋白用狭缝电转技术转印硝酸纤维素膜,利用HIV参考品血清检测其灵敏度和特异性.结果目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的10%左右.纯化后其纯度高于95%,HIV参考品血清检测显示出良好的灵敏度和特异性,检测8份阳性临床标本无一漏检,而7份阴性临床标本元交叉反应.结论已研制出具有良好灵敏度和特异性的HIV-1 GP120主要抗原性片段.为开发HIV抗体检测试剂创造了条件.
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