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IFN-γ基因修饰的肿瘤细胞来源exosomes的抗肿瘤效应

Anti-tumor Effects of Exosomes Derived from Tumor Cells Modified by IFN-γ Gene

摘要[目的]探讨IFN-γ基因修饰的肿瘤细胞来源的exosomes体内抗肿瘤效应.[方法]通过密度梯度离心和蔗糖密度梯度法分离纯化E.G7-OVA肿瘤细胞分泌的exosomes.用表达小鼠IFN-γ基因的腺病毒载体AdIFN-γ/和对照载体AdLacZ感染E.G7-OVA肿瘤细胞.将AdIFN-γ基因修饰的E.G7-OVA细胞来源的exosomes命名为Exo/IFN-γ,AdLacZ感染E.C7-OVA细胞及E.G7-OVA细胞来源的exosomes分别命名为Exo/LacZ和Exo.用这些exosomes免疫小鼠,观察其抗肿瘤效应,并探讨其作用机制.[结果]电镜下exosomes为双层膜结构,呈特征性的"盘状"结构,直径在40～100nm之间.通过Western印迹,在制备的Exo/IFN-γ中检测到IFN-γ,而在Exo/LacZ未检测到IFN-γ.与对照组PBS相比,用Exo、Exo/LacZ免疫小鼠分别能导致20%和30%小鼠90d无瘤(P=0.0008),而用Exo/IFN-γ免疫小鼠则能导致60%小鼠90d无瘤(P=0.0001);CTL表明,Exo/IFN-γ免疫诱导的CTL活性明显高于Exo和Exo/LacZ(P=0.0083).[结论]INF-γ基因转染的E.G7-OVA肿瘤细胞来源的exosomes含有IFN-γ,且Exo/IFN-γ具有比常规exosomes更显著的抗肿瘤效应.