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【中文期刊】 樛跃 许崇波 《生物技术通报》 2012年10期 186-192页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素( CPA)第272位苏氨酸(ACA)定点突变成脯氨酸(CCG),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21( DE3)(pMCPA-T272P).经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pM...
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【中文期刊】 李玲 李尔然 等 《中国医科大学学报》 2007年36卷6期 692-693,727页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的:观察金黄色葡萄球菌α毒素(α-toxin)对Balb/c小鼠肺微血管内皮细胞(LMEC)水通道蛋白1(AQP1)表达的影响.方法:将实验组小鼠15只腹腔注入α-toxin后根据6 h、10 h、24 h取材时间,随机将它们分为α-to...
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【中文期刊】 林明辉 荫俊 等 《生物工程学报》 2004年20卷1期 63-65页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 诱导表达重组工程菌pBV/cpa408后,将表达菌体超声破碎,上清经80%饱和硫酸铵一次沉淀,经透析,上凝胶过滤层析柱进行分离纯化,薄层凝胶扫描结果显示,纯化的蛋白纯度达95%以上;用纯化蛋白免疫昆明小鼠,以1.0MLD100腹腔进行攻击,...
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【中文期刊】 赵宝华 许崇波 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年19卷6期 690-697页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株1A8中,分别扩增出抗体VH和VL基因,用linker (Gly4Ser)3基因,将VH和VL基因连接成单链抗体(ScFv)基因,并将其克...
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【中文期刊】 赵宝华 许崇波 《生物工程学报》 2001年17卷5期 543-547页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出抗体VH和VL基因,连接成ScFv基因,并将其克隆至pGEM-T载体中构建了重组质粒pXScFv-2E3.经序列分析证实,VH和VL基因及li...
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【中文期刊】 彭国瑞 彭小兵 等 《中国兽药杂志》 2019年53卷2期 26-32页
【摘要】 为获得腐败梭菌α毒素和D型产气荚膜梭菌ε毒素的共表达产物,并鉴定其致死活性和反应原性,评价其免疫保护效力,利用PCR扩增腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因Gcsa和Gcpe并克隆至pETDuet-1质粒,转化E.coli BL21(DE...
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【中文期刊】 杜吉革 王磊 等 《中国兽医杂志》 2019年55卷1期 7-10页
【摘要】 本研究旨在获得产气荚膜梭菌α毒素(CPA)C末端(第247-370位氨基酸,CPAc)二拷贝串联融合蛋白,并评价其免疫原性.对已知的A型产气荚膜梭菌CPAc编码基因进行优化设计,将其以同向串连的方式串联成二拷贝基因(GCPAc2),经人工合...
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【中文期刊】 李箐 辛文文 等 《军事医学》 2013年37卷9期 671-675页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 制备特异性的产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens alpha-toxin,CPA)卵黄抗体(yolk immunoglobulin,IgY).方法 利用定点突变技术,将CPA第56位天冬氨酸和第68位组氨...
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【中文期刊】 林明辉 荫俊 等 《生物技术通讯》 2004年15卷1期 26-28页ISTICCA
【摘要】 在构建出高表达、高活性的A型产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原工程菌株pBV/cpa408的基础上,对表达产物进行了分离纯化研究.诱导表达菌液离心后,超声破碎沉淀细菌,上清用80%饱和硫酸铵沉淀,沉淀蛋白经透析,上凝胶过滤层析柱分离纯化,得到纯度...
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【中文期刊】 宫语晨 许崇利 等 《中国兽药杂志》 2014年48卷6期 1-7页
【摘要】 为探索A型魏氏梭菌α毒素第56位天冬氨酸(Asp-56)对其生物学活性的影响,将α毒素Asp-56密码子(GAT)定点突变成甘氨酸(Gly-56)密码子(GGT),构建了含α毒素D56G突变基因表达质粒的重组菌株BL21 (DE3) (pM...
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