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            【中文期刊】 董占柱  《微生物学免疫学进展》 2014年42卷2期 59-64页ISTICCA

            【摘要】 利用野生型病毒株研究病毒的生物学特性及其与宿主细胞相互作用的机制是病毒学领域常用的研究方法,但前提条件是此类病毒能够在体外培养,且传染性和致病性低,对人身安全和环境不构成威胁.对于一些传染性强、致死率高,体外培养难以获得,且需在高级别生物安...

            【关键词】 病毒安全性应用

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            【中文期刊】 龚淑敏  李光明  等 《天津医药》 2014年8期 749-751页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的:采用慢病毒质粒结构重组JSRV-NM假病毒,克服JSRV-NM病毒只能通过绵羊支气管穿刺接种扩增,不能通过体外细胞培养扩增的问题。方法采用慢病毒高效包装系统pMD.G、pCMV-HIV△8.2和pHIV-eGFP,以JSRV-NM病毒...

            【关键词】 JSRV-NM病毒病毒病毒载体

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            【中文期刊】 李建彬  陈斌  等 《生物技术通讯》 2012年23卷4期 481-484页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建人免疫缺陷病毒(HIV)假病毒模型,用多种HIV逆转录酶和蛋白酶抑制剂作用于该模型,以检测其是否能有效用于HIV抑制药物的筛选.方法:通过载体改造获得最终慢病毒载体puc18-NL4-3-LUC-stop,其中含有萤光素酶基因,将...

            【关键词】 人免疫缺陷病毒病毒载体病毒

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            【中文期刊】 程林  宋红勇  等 《东南大学学报(医学版)》 2012年31卷1期 40-43页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建人CCR5基因的真核表达质粒并对其进行功能鉴定.方法:PCR扩增人CCR5基因,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1内,构建含人CCR5基因的真核表达质粒pcDNA3.1-CCR5.使用RT-PCR、流式细胞术和HIV假病毒感染...

            【关键词】 CCR5基因质粒真核表达

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            【中文期刊】 王晓娜  安小平  等 《生物技术通讯》 2011年22卷6期 831-833,891页ISTICCA

            【摘要】 目的:以HIV为骨架构建单次复制性的含基孔肯雅病毒囊膜蛋白的假病毒模型,观察其对哺乳动物细胞的侵染性.方法:PCR合成基孔肯雅病毒囊膜蛋白基因,克隆到真核表达载体上,与HIV慢病毒包装系统质粒共转染293FT细胞,48 h后收培养上清,在8...

            【关键词】 基孔肯雅病毒囊膜蛋白病毒模型感染性

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            【中文期刊】 刘大斌  张昕  等 《生物技术通讯》 2010年21卷5期 641-645页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建含基孔肯亚病毒核酸序列的重组慢病毒载体,以之转染细胞以分泌含基孔肯亚病毒核酸序列的假病毒,利用该病毒建立基孔肯亚病毒的模拟检测方法.方法:人工合成基孔肯亚病毒部分保守性核酸序列,连入慢病毒载体,构建含基孔肯亚病毒核酸序列的重组慢病...

            【关键词】 基孔肯亚病毒病毒检测

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            【中文期刊】 张昕  安小平  等 《生物技术通讯》 2010年21卷5期 666-669页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建基于萤光素酶的单次复制人免疫缺陷病毒(HIV)细胞模型,用于抗HIV药物的筛选.方法:构建含萤光素酶报告基因的假型慢病毒质粒,将疱疹性口炎病毒外膜糖蛋白(VSV-G)的表达质粒、HIV-1 Rev蛋白表达质粒、HIV Gag-Po...

            【关键词】 人免疫缺陷病毒型慢病毒单次复制

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            【中文期刊】 秦焱  崔红莲  等 《免疫学杂志》 2006年22卷6期 623-625页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 评价构建的人16型乳头瘤病毒"假病毒"的免疫保护作用.方法 利用杆状病毒表达系统在sf9昆虫细胞中表达组装了人16型乳头瘤病毒病毒样颗粒,将病毒样颗粒解聚后与真核表达质粒混合,重聚集成"假病毒".用这种"假病毒"对小鼠进行免疫保护作用...

            【关键词】 人16型乳头瘤病毒病毒IgG

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            【中文期刊】 黄睿  凌世淦  《军事医学科学院院刊》 2006年30卷4期 379-381页ISTICCSCDCA

            【摘要】 进行丙型肝炎病毒(HCV)研究的困难之一是缺乏方便实用的细胞培养体系,难以分离到大量的HCV.HCV假病毒是目前研究HCV感染早期阶段即病毒吸附、受体结合及与细胞膜融合等较理想的HCV替代模型.本文综述了HCV假病毒的构建方法及重要应用价值...

            【关键词】 丙型肝炎病毒病毒

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            【中文期刊】 刘华雷  王志亮  等 《中国预防医学杂志》 2006年7卷5期 369-373页ISTICCSCDCA

            【摘要】 目的 通过RT-PCR反应获得了H5N1亚型禽流感病毒完整的血凝素基因(HA)并克隆到真核表达载体pcDNA3上,通过转染293T细胞进行了瞬时表达验证.方法 采用PCR定点突变技术,将其HA基因裂解位点的氨基酸组成由RKKR↓GLF突变为...

            【关键词】 鼠白血病病毒禽流感病毒H5N1亚型

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            【中文期刊】 张贺秋  陈坤  等 《陕西医学检验》 2001年16卷1期 1-3页ISTICCA

            【摘要】 采用基因工程技术,构建了人IL-1β融合表达的原核表达载体pBVIL1,在大肠杆菌中表达了丙型肝炎病毒不同区优势抗原,研制出了丙型肝炎病毒抗体酶联免疫确认试剂。四种抗原混合包被对国家40份阳性参比血清检出率为39/40。40份阴性参比血清的...

            【关键词】 丙型肝炎病毒分片段抗原酶联免疫确认试剂

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            【中文期刊】 钟研  李金林  等 《转化医学电子杂志》 2016年3卷4期 1-5页

            【摘要】 目的:研究汉滩病毒包膜糖蛋白与宿主细胞作用的分子机制,构建含有汉滩病毒( HTNV)标准株76~118株包膜糖蛋白的假病毒,并对其进行检测。方法:将表达汉滩病毒包膜糖蛋白的质粒和以VSVΔG为骨架的假病毒颗粒,与293T细胞共转染,构建汉滩...

            【关键词】 汉滩病毒包膜糖蛋白病毒

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            【中文期刊】 张卓  刘明  等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷7期 545-548页

            【摘要】 为筛选H5N1禽流感病毒(AIV)血凝素蛋白(HA)特异性中和抗体,本研究构建了表达HA蛋白的重组质粒,利用该重组质粒及缺失表达人免疫缺陷病病毒1型(HIV-1)囊膜蛋白基因的骨架质粒,构建了表面整合有H5亚型AIV HA蛋白的HIV假病毒...

            【关键词】 H5N1禽流感病毒病毒中和抗体

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            【中文期刊】 张晓文  姜帆  等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷3期 194-198页

            【摘要】 为构建含H3N8马流感(EIV) HA基因的噬菌体病毒样颗粒(VLPs),本研究将编码组氨酸标签序列插入MS2噬菌体编码外壳蛋白的β发夹环结构序列中,构建含有重组组氨酸标签的MS2噬菌体外壳蛋白和表达成熟酶蛋白基因的重组质粒pNH-MS2h...

            【关键词】 H3N8亚型马流感病毒病毒颗粒Armored RNA技术

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            【中文期刊】 邓俊花  林祥梅  等 《中国畜牧兽医》 2014年41卷9期 68-73页

            【摘要】 基于蓝舌病(bluetongue,BT)的危害及RNA阳性质控品研制的重要性,试验将pTrcHis-MS2质粒借助点突变技术在噬菌体外壳蛋白15和16氨基酸之间插入组氨酸(His)蛋白标签,构建了pTrcMS载体.将pMD19-T-BTV质...

            【关键词】 蓝舌病病毒物质组氨酸蛋白标签

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            【中文期刊】 渠俊杰  陈霞  等 《黑龙江动物繁殖》 2012年1期 8-11页

            【摘要】 为了建立体细胞重编程过程中检测Sox2基因表达变化的方法,本研究利用克隆获得的小鼠Sox2基因与逆转录病毒载体pMX—IRES—GFP连接,构建带有报告基因GFP的逆转录病毒载体,将其转染293GP细胞后获得假病毒上清。将获得假病毒上清侵染...

            【关键词】 小鼠Sox2基因逆转录病毒载体

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            【中文期刊】 周斌  刘珂  等 《畜牧兽医学报》 2011年42卷11期 1570-1576页

            【摘要】 将构建的真核表达载体pcDNA-E0、pcDNA-E2和pcDNA-E012分别与MuLV假型病毒构建体系的2种骨架载体pHIT60和pHIT111经磷酸钙瞬时共转染293T细胞,48 h后收集假病毒上清,超速离心后用抗CSFV 多抗通过W...

            【关键词】 猪瘟病毒囊膜糖蛋白鼠白血病病毒

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            【中文期刊】 林文耀  樊惠英  等 《华南农业大学学报》 2011年32卷2期 80-84,92页

            【摘要】 以含有H9N2禽流感病毒HA基因的重组质粒pMD18-H9HA为模板,扩增HA基因,将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将含有H9HA及gp64的基因片段克隆到质粒pcDNA3.1(+),获得重组质粒pcDNA-H9...

            【关键词】 禽流感病毒H9N2亚型双表达

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            【中文期刊】 卢善明  邓汪东  等 《汕头大学医学院学报》 2010年23卷1期 25-28页

            【摘要】 目的:构建携带自杀基因HSV-tk和免疫相关基因H60的逆转录病毒载体pIRES-H60、pIRES-TK和pTK-IRES-H60.方法:以质粒pUC19-H60为模板,用PCR方法扩增H60基因,并亚克隆至pMD18-T载体,构建中介载...

            【关键词】 自杀基因NKG2D配体载体构建

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            【中文期刊】 罗琼  樊惠英  等 《华南农业大学学报》 2010年31卷2期 104-107页

            【摘要】 根据鸡传染性支气管炎病毒M41株的基因序列(GenBank:AY851295.1),设计特异性引物,利用 RT-PCR方法扩增其 S1基因,并将扩增产物克隆到杆状病毒转移质粒pFast-VSV-G-CMV中,获得重组质粒pFast-VSV-...

            【关键词】 鸡传染性支气管炎S1基因重组型杆状病毒

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