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            【中文期刊】 梁文娟 崔聪聪  等 《中华流行病学杂志》 2018年39卷12期 1607-1610页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探讨基于成簇规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)4上游侧翼序列对大肠埃希菌和志贺菌鉴定和评价效果.方法 通过BLAST重复序列识别并获得全基因组测序大肠埃希菌和志贺菌的CRISPRs和CRISPR相关基因(CRISPR-assoc...

            【关键词】 大肠埃希菌志贺菌成簇规律间隔的短回文重复序列

            浏览:101 被引:2 下载:16

            【中文期刊】 曹媛 杨云  等 《植物学报》 2018年53卷1期 104-109页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 T-DNA突变体是研究基因功能的重要资源.高效热不对称交错PCR (hiTAIL-PCR)是克隆突变体中T-DNA插入位点侧翼序列的常用方法.然而我们发现,利用hiTAIL-PCR克隆到的一些侧翼序列并不对应于宿主的染色体DNA序列,而是质...

            【关键词】 hiTAIL-PCRT-DNA突变体侧翼序列

            LinkOut
            浏览:55 被引:3 下载:0

            【中文期刊】 蒲远波 郭翠  等 《生物技术通报》 2016年32卷11期 72-79页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 扩增基因的侧翼序列在分子生物学研究中具有重要作用。到目前为止,克隆基因侧翼序列的方法主要可以分为3类:反向 PCR、外源接头介导 PCR、半随机引物 PCR。对这些技术的原理以及近期的应用情况进行了较为系统的综述,旨在为研究者选择更可靠、更...

            【关键词】 侧翼序列反向 PCR外源接头介导 PCR

            LinkOut
            浏览:89 被引:13 下载:0

            【中文期刊】 张晓 张锐  等 《生物工程学报》 2012年28卷1期 104-115页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 双拷贝基因及其侧翼序列的克隆是分子生物学中的一个难点.将优化的反向PCR (Inverse PCR,iPCR)与TAIL-PCR相结合,有效地克隆双拷贝基因及其侧翼序列.先用Southern blotting方法确定一种能获得合适长度片段的...

            【关键词】 反向PCRTAIL-PCR细胞质雄性不育

            OA
            浏览:206 被引:17 下载:0

            【中文期刊】 李书涛 郭佳玉  等 《现代生物医学进展》 2010年10卷16期 3001-3003页 ISTICCA

            【摘要】 目的:研究牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(geranylgeranyl diphosphate synthase,GGPPs)基因启动子的活性;方法:从曼地亚红豆杉细胞中克隆ggpps基因5'-侧翼序列,并将该侧翼序列代替pBI121质粒上的...

            【关键词】 紫杉醇牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶5'-侧翼序列

            LinkOut
            浏览:289 被引:2 下载:0

            【中文期刊】 冯翠莲 万玥  等 《生物技术通报》 2021年37卷5期 248-258页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 转基因作物外源T-DNA插入的侧翼序列是转基因事件检测的关键组分,也是转基因作物生物安全评价和监管所必需提供的重要信息.为了明确抗虫转基因甘蔗BCG-17的分子特征和建立其事件特异性检测方法,推进其生物安全性评价工作及未来的监管工作,以其T...

            【关键词】 抗虫转基因甘蔗T-DNA侧翼序列转化事件特异性检测

            LinkOut
            浏览:62 被引:3 下载:0

            【中文期刊】 王鹏飞 王颖芳  等 《生物医学工程学杂志》 2015年32卷2期 343-349页 MEDLINEISTICPKUCA

            【摘要】 利用生物信息学方法探索志贺菌成簇的规律间隔的短回文重复序列(CRISPR)系统结构的特征.本文通过BLAST、序列比对、RNA二级结构预测等方法对志贺菌CRISPR进行研究.结果显示:志贺菌的4个群中均发现有CRISPR结构,其侧翼上、下游...

            【关键词】 志贺菌成簇的规律间隔的短回文重复序列侧翼序列

            LinkOut
            浏览:90 被引:8 下载:0

            【中文期刊】 张露霞 邓伟平  《中国皮肤性病学杂志》 2014年28卷7期 721-723页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 检测一个中国X-性连锁鱼鳞病(XLI)家系类固醇硫酸酯酶(STS)基因及其侧翼序列突变情况.方法 收集家系患者临床资料,抽取该家系中患者、表型正常者及与该家系无关的50例健康人外周血,提取外周血DNA,PCR扩增外周血基因组DNA的S...

            【关键词】 类固醇硫酸酯酶侧翼序列X-性连锁鱼鳞病

            LinkOut
            浏览:25 被引:1 下载:0

            【中文期刊】 刘建 毛大庆  等 《应用生态学报》 2012年23卷1期 240-246页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 抗生素在医疗、畜牧和水产养殖业的大量使用造成了环境中耐药细菌和抗性基因的日益增加,也加速了抗性基因在环境细菌间的传播扩散.本研究以环境样本直接提取的总DNA为模板,运用热不对称交错PCR (thermal asymmetric interl...

            【关键词】 抗性基因实时荧光定量PCRTail-PCR

            OA
            浏览:123 被引:3 下载:0

            【中文期刊】 杨键 曾丽娟  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷3期 56-60页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用反向-巢式PCR(IN-PCR)从富集土壤宏基因组DNA中克隆到一种α-淀粉酶基因的全序列,其基因登录号为GU045523,测序分析显示与来自Bacillus sp.KR-8104耐酸淀粉酶不完整基因同源性为99%.将获得的α-淀粉酶成...

            【关键词】 宏基因组反向-巢式PCR侧翼序列

            LinkOut
            浏览:246 被引:4 下载:0

            【中文期刊】 李付鹏 伍宝朵  等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷12期 87-94页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 基于PCR的染色体步移技术主要用于分离已知序列侧翼的未知序列,为分离基因、步移调控区域及填补基因组测序的空隙提供极大便利.基于PCR的染色体步移技术依照原理可分成依赖连接介导PCR法和不需要酶切连接PCR法.综述了近年来以PCR为基础的染色...

            【关键词】 染色体步移聚合酶链式反应侧翼序列

            LinkOut
            浏览:336 被引:38 下载:0

            【中文期刊】 于洋 张海员  等 《国际遗传学杂志》 2014年37卷3期 119-123页 ISTICCA

            【摘要】 染色体步移技术是一种重要的分子生物学研究技术,该技术现阶段主要分为结合基因组文库的染色体步移技术和基于PCR扩增的染色体步移技术.鉴于染色体步移技术可以克隆已知序列相邻的侧翼序列,所以主要应用于克隆已知序列的侧翼启动子和调控原件、鉴定T-D...

            【关键词】 染色体步移技术反向PCR转座子

            浏览:287 被引:3 下载:48

            【中文期刊】 潘玉雪 杨勇  等 《中华皮肤科杂志》 2019年52卷7期 450-454页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 检测1个色素失禁症家系NEMO基因的突变情况.方法 收集先证者临床资料,提取先证者及其父母和200例健康对照外周血DNA.采用多重PCR扩增的方法检测先证者及其父亲外周血DNA中是否存在NEMO基因4~10号外显子杂合性缺失;PCR扩...

            【关键词】 色素失调症DNA突变分析镶嵌现象

            浏览:396 被引:2 下载:303

            【中文期刊】 王亚琴 张宇瑶  等 《中国中药杂志》 2019年44卷1期 77-81页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 该研究以从感染了青枯病的广藿香植株中分离的青枯菌菌株PRS-84为供试菌株,利用电击转化法,对青枯菌进行Tn5转座子插入突变,在含卡那霉素的培养基上筛选抗性克隆.对抗性克隆进行卡那霉素抗性基因的PCR鉴定,并利用反向PCR技术获得转化子Tn...

            【关键词】 广藿香青枯菌Tn5转座子

            LinkOut
            浏览:97 被引:4 下载:0

            【中文期刊】 焦蓓蕾 韦红英  等 《临床儿科杂志》 2019年37卷2期 115-117页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 探讨凝血因子Ⅸ(FⅨ)基因突变致血友病乙的分子机制.方法 回顾分析1例确诊血友病乙并经家系基因检测患儿的临床资料.结果 先证者男,2岁4个月,反复皮肤瘀斑、鼻衄.查活化部分凝血活酶时间118.3 s,凝血酶原时间15 s,血小板287...

            【关键词】 血友病乙凝血因子基因突变

            LinkOut
            浏览:295 被引:0 下载:241

            【中文期刊】 郭涛 李婉莎  等 《植物分类与资源学报》 2011年33卷6期 645-652页 SCIMEDLINEISTICCSCDBP

            【摘要】 以哥伦比亚(Columbia)野生型拟南芥(Arabidopsis thaliana)为实验材料,用含有激活标记双元质粒pCB260的农杆菌浸花进行转化,构建拟南芥T-DNA插入突变体库.通过突变体的筛选和表型分析,获得了两株光形态突变体,...

            【关键词】 拟南芥突变体TAIL-PCR

            OA
            浏览:219 被引:0 下载:0

            【中文期刊】 卢致琨 刘丽  等 《中华实用儿科临床杂志》 2018年33卷8期 615-617页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 对2例Citrin缺陷所致新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)患儿进行SLC25A13基因突变分析.方法 分析2例患儿的临床特点,经家长同意后留取患儿外周血2 mL,提取基因组DNA,进行SLC25A13基因18个外显子及侧翼序列的PC...

            【关键词】 Citrin蛋白缺陷新生儿肝内胆汁淤积症SLC25A13基因

            浏览:188 被引:7 下载:432

            【中文期刊】 陈少威 吴程  等 《生物技术通报》 2018年34卷11期 136-143页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 为了研究苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)N-酰基高丝氨酸内酯酶(N-acylhomoserine Lactonase,AiiA 蛋白)表达调控机制,确定aiiA的启动子区域.本研究克隆了aiiA的5'端侧...

            【关键词】 苏云金芽胞杆菌群体感应启动子

            LinkOut
            浏览:39 被引:1 下载:0

            【中文期刊】 张晓峰 苏惠春  等 《中华皮肤科杂志》 2016年49卷7期 508-510页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:研究一个反常性痤疮家系患者γ分泌酶基因突变情况。方法收集1个反常性痤疮患者家系资料,该家系共4代30人,患者12例,其中在世患者9例。提取先证者及其有关亲属8例(患者5例、非患者3例)外周血DNA,采用PCR扩增NCSTN、PSEN1...

            【关键词】 突变基因,PSENEN反常性痤疮

            浏览:207 被引:3 下载:138

            【中文期刊】 多丽娜 汪慧君  等 《中华皮肤科杂志》 2016年3期 180-182页 ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:报告2例长岛型掌跖角化病,确定其致病基因突变。方法收集患者及其父母外周血和临床资料,提取基因组 DNA,PCR 扩增 SERPINB7基因8个外显子及其侧翼序列,对扩增产物进行 DNA 测序以查找基因突变位点,并以200例无关健康人 ...

            【关键词】 皮肤角化病,掌跖皮肤表现DNA 突变分析

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