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【中文期刊】 崔超杰 张慧 等 《中国兽医杂志》 2025年61卷7期 56-62页
【摘要】 尼帕病毒(NiV)作为高致死率的人兽共患病病原,受到世界各国广泛关注.为了获得快速灵敏的检测方法和安全稳定的阳性标准品,本试验将NiV N和L基因同时插入假病毒转移质粒PLJM-GFP中,与包装质粒共转染人胚胎肾(HEK 293T)细胞,收...
【关键词】 尼帕病毒(NiV);假病毒构建;实时荧光定量逆转录PCR(qRT-PCR);
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【中文期刊】 陈勇兵 陈如坤 等 《江苏医药》 2004年30卷9期 644-646页ISTICCA
【摘要】 目的将疱疹性口炎病毒壳G糖蛋白(VSV-G)用于构建新型假型逆转录病毒载体(VSV-G/MuLV).方法利用三质粒系统一过性转染293T/17细胞,通过磷酸钙共沉淀法产生VSV-G/MuLV;一过性转染后的病毒上清转导包装细胞系293/GP...
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【中文期刊】 李静璇 刘峰 等 《中国免疫学杂志》 2024年40卷4期 811-817页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建一种高滴度SARS-CoV-2假病毒(PsV)体系,用于中和抗体体外评价与病毒进入抑制剂的筛选.方法:共转染慢病毒载体质粒psPAX2、pCDH-Luc与SARS-CoV-2 Spike(S)蛋白表达质粒,收获的假病毒上清感染AC...
【关键词】 SARS-CoV-2;假病毒;S蛋白;
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【中文期刊】 吴守丽 刘峰 等 《中国人兽共患病学报》 2019年35卷4期 285-291页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建基于In-fusion技术的高通量新型HIV表型耐药检测系统,用于临床表型耐药检测.方法 扩增LacZ基因,插入并替换原骨架质粒pLWJ-SV40-Luc中耐药检测片段构建新的骨架质粒pLWJ-SV40-Luc-LacZ,利用In...
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【中文期刊】 黄春湲 王洪 等 《实用医学杂志》 2018年34卷12期 1942-1946页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 针对广西HIV-1 B亚型毒株构建一种优化的假病毒耐药检测模型,为表型耐药检测提供成本较低、简便易行的研究工具.方法 从质粒pSV-EGFP中扩增出EGFP基因,采用双酶切法将EGFP基因克隆至骨架质粒pNL4-3.Luc.E-R-,...
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【中文期刊】 朱娜 刘雪丽 等 《中国免疫学杂志》 2017年33卷10期 1441-1446页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建携带增强型绿色荧光蛋白基因(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的HIV-1假病毒;通过HIV-1假病毒感染未成熟树突状细胞(immatural dendritic cell,iDC)实...
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【中文期刊】 王玉梅 盛光耀 《郑州大学学报(医学版)》 2010年45卷3期 443-447页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建人PTEN基因RNA干扰(RNAi)及其逃避RNAi策略结构(RESC)救援的慢病毒载体.方法:利用Invitrogen公司在线软件,针对已筛选确定的PTEN基因RNAi有效靶序列,设计并合成靶序列的oligoDNA,退火形成双链...
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【中文期刊】 项凤梅 卢建溪 等 《中国病理生理杂志》 2009年25卷2期 398-400页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含恩替卡韦耐药基因的HBV全基因组逆转录病毒载体,同时进行逆转录病毒载体的包装,为进一步产生含恩替卡位耐药基因的假病毒,进一步感染肝源性细胞,进行耐药机制的研究做准备.方法:采用基因扩增、重组和克隆的方法,从构建好的含恩替卡位耐药...
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【中文期刊】 裴斐 何蕊 等 《西安交通大学学报(医学版)》 2009年30卷6期 766-768页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,并用于转染兔平滑肌细胞,为兔平滑肌细胞基因转染寻找一种高效的载体.方法 构建含有报道基因lacZ的假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,测定滴度,并转染兔平滑肌细胞,观察其转导效率.并与M...
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【中文期刊】 夏平安 党占国 等 《病毒学报》 2008年24卷5期 345-351页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用RT-PCR法扩增猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)ORF5和ORF6基因,分别构建pcDNA-ORF5、pcD-NA-ORF5/6和pcDNA-ORF5-ORF6真核表达载体,磷酸钙共沉淀法瞬时转染293T细胞,48h后收集细胞,流...
【关键词】 假病毒;鼠白血病病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;
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【中文期刊】 党占国 夏平安 等 《生物工程学报》 2008年24卷5期 780-785页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了猪繁殖与呼吸综合征病毒完整的GP5基因并进行了克隆与鉴定.序列测定结果与已经登陆GenBank 的EF488048高致病性江西株比对分析表明碱基同源性达98.7%.构建含GP5基因的真核表达载...
【关键词】 鼠白血病病毒;猪繁殖与呼吸综合征病毒;GP5基因;
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【中文期刊】 张松林 金梅林 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2008年24卷4期 366-372页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通过将高致病性禽流感病毒HA蛋白整合到HIV颗粒,包装成表达HA蛋白的假病毒粒子(命名为HIV/H5-HA),并对所包装的假病毒的生物学功能进行了研究.通过RT-PCR获得了HSNl亚型禽流感病毒完整的血凝素基因(HA)并克隆到真核表达载体...
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【中文期刊】 熊符 张成 等 《中国医学科学院学报》 2008年30卷4期 498-505,封3页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含有人单纯疱疹病毒1型(HSV-1)VP22与人microdystrophin基因融合的重组腺病毒,体外感染成肌细胞C2C12,探讨VP22对microdystrophin基因在成肌细胞中的蛋白转导特性.方法 设计引物,从质粒pS...
【关键词】 VP22;microdystrophin;腺病毒;
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【中文期刊】 朱晓蕾 卢春 等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2008年28卷5期 565-569页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:分离、克隆水泡性口炎病毒(vesicular stomatitis virus,VSV)的包膜糖蛋白(VSV-GP)编码基因,包装人类免疫缺陷病毒1型human immunodeficiency virus-1,HIV-1)假病毒,并...
【关键词】 水泡性口炎病毒包膜糖蛋白;人类免疫缺陷病毒1型假病毒;卡波济肉瘤相关疱疹病毒;
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【中文期刊】 吴雪伶 聂建辉 等 《病毒学报》 2008年24卷3期 196-201页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了检测HPV 58型不同L1基因的DNA疫苗的免疫原性,以pcDNA3.1为载体分别构建含HFV 58型不同L1基因的DNA疫苗,命名为L1h、L1h△c、L1S、L1SM和L1wt.用免疫印迹法检测各DNA疫苗的体外表达情况;各重组质粒...
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【中文期刊】 于美娟 张成 等 《中国医学科学院学报》 2006年28卷4期 558-561,插2页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含有人抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体并检测经逆转录病毒介导基因转移的假肥大型肌营养不良模型小鼠(mdx)骨髓间充质干细胞(MSCs)中目的基因的表达.方法 构建含有抗肌萎缩蛋白小基因的逆转录病毒载体,利用脂质体介导的基因转移技...
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【中文期刊】 金波 陈集双 等 《微生物学报》 2005年45卷4期 610-613页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 从1个369nt的黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)卫星RNA的cDNA出发,采用DNA改组技术构建人工突变体,经过体外转录,将其与不携带卫星RNA的黄瓜花叶病毒株进行假重组,鉴定突变体的生物活性,结果显示:...
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【中文期刊】 刘华雷 RONG Li-jun 等 《生物工程学报》 2005年21卷1期 47-51页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了H5N1亚型鹅源禽流感病毒(AIV)完整的血凝素(HA)基因并进行了克隆与鉴定.序列测定结果已经登陆GenBank,登陆号为AY639405.序列分析表明所扩增的HA基因开放性阅读框架(ORF...
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【中文期刊】 谢夏阳 滕勇 等 《中国实验动物学报》 2005年13卷1期 27-32页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的为解决SV40T转基因小鼠高发瘤难保种的问题,构建了两种含有SV40T不同区段的外源基因: Rb结合域点突变的SV40T基因(SV40T-DRb)和无p53结合域的SV40T基因(SV40T-Dp53).方法利用分子生物学的基因克隆手段...
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【中文期刊】 杨勤 雍熙 等 《川北医学院学报》 2018年33卷3期 338-342页ISTICCA
【摘要】 目的:构建铜绿假单胞菌外膜蛋白F与Ⅰ型单纯疱疹病毒(herpes simplex virus 1,HSV-1) VP22融合表达的DNA疫苗,并研究其在真核细胞中的表达情况.方法: 构建重组质粒 pVAX1-OprF、 pVAX1-VP22...
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