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【中文期刊】 盛曹颖 《中学生物学》 2022年38卷8期 3-5页
【摘要】 在基因工程中,克隆载体为实验操作的核心部分,根据生物学效应分为克隆载体、表达载体和穿梭载体,其中克隆载体在基因工程中占有重要的地位,根据其构建所用的DNA来源可分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体载体4种类型.对这四种克隆载体的生...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 余旭平 朱军莉 等 《遗传学报》 2003年30卷8期 730-736页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 自行设计一对引物,从质粒pUC18上扩增一段无启动子和信号肽的β-内酰胺酶基因(△P△SP Amp),以作为最终构建的载体克隆到带跨膜信号基因片段的报告基因.所设计的上游引物中依次带有分别处于3个不同阅读框架、且形成匹配粘性末端的3个酶切位...
- 概要：
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【中文期刊】 马超 朱宇鹏 等 《中国抗生素杂志》 2010年35卷11期 835-839页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建链霉菌小型基因文库是获得链霉菌基因的一个重要手段,常规使用的克隆载体常有着一定程度的假阳性,因此构建的高效率的克隆载体有着实际的意义.方法 本研究通过重叠延伸PCR手段将一个96bp的多克隆位点序列插入至rpsL基因的启动子和开放...
- 概要：
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【中文期刊】 薛磊 陆慧琦 等 《中国胸心血管外科临床杂志》 2009年16卷3期 206-209页ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 测定食管鳞状细胞癌组织中人叉头样转录因子3(forkhead box P3,FOXP3)的基因表达水平,为食管癌的免疫治疗提供依据.方法 基于TaqMan荧光探针技术,构建克隆载体pMD 18-T-FOXP3,作为定量模板,建立检测F...
【关键词】 食管鳞状细胞癌；叉头样转录因子3；实时荧光定量逆转录聚合酶链反应；
- 概要：
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【中文期刊】 张燕 高小倩 等 《生物技术通报》 2008年1期 117-121页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 hepcidin是一种由肝脏合成的富含半胱氨酸的小分子肽,它的主要生物学功能是维持机体铁稳态,并且具有抗菌活性.本实验从大鼠肝脏组织克隆出hepcidin基因,用同尾酶法构建多拷贝串联基因克隆载体pGEM-nHepc(n=1,2,4,8)(...
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【中文期刊】 王建秋 闫风琴 等 《吉林大学学报（医学版）》 2007年33卷4期 638-641,封2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:从人胚胎肝、肾和胰腺组织RNA中钓取α1微球蛋白/bikunin前体(AMBP)cDNA序列,构建其重组克隆载体.方法:采用Trizol法提取人胚胎肝、肾和胰腺组织RNA,以此为模板,应用RT-PCR技术扩增目的基因,构建重组载体pM...
【关键词】 AMBP cDNA；pMD18-T-ambp；克隆载体；
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【中文期刊】 黄正蔚 刘正 《华西口腔医学杂志》 2006年24卷1期 70-72页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究.方法利用高保真的pfu DNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH...
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- 结论：
【中文期刊】 邢锐 杨晓强 等 《西安交通大学学报（医学版）》 2006年27卷4期 330-332,355页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 体外拼装带c-myc分子标签的人三叶因子家族2(human trefoil factor family 2,hTFF2)的融合基因c-myc-htff2,并构建其克隆载体pBS-TFF2,以便为进一步构建TFF2各种表达载体打下基础....
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 邢锐 杨晓强 等 《南方医科大学学报》 2006年26卷9期 1280-1283页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建带c-myc分子标签的人三叶因子家族2(hTFF2)融合基因c-myc-hTFF2的乳酸链球菌表达载体,以便进一步构建能表达活性c-myc-hTFF2融合蛋白的乳酸链球菌工程菌.方法 根据hTFF2的氨基酸表达序列和乳酸链球菌的氨...
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【中文期刊】 温红玲 王志玉 等 《山东大学学报（医学版）》 2004年42卷5期 504-507页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建风疹病毒包膜糖蛋白E1的全基因片段的克隆载体和酵母表达载体.方法:应用PCR方法扩增糖蛋白E1的全长基因,并在基因两端创建相应的酶切位点.E1基因与pBluscriptⅡSK+载体均经双酶切后连接,转化大肠杆菌JM109,经氨苄筛...
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【中文期刊】 樊颖伦 赵开军 《中国生物工程杂志》 2004年24卷3期 12-16页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 DNA克隆技术是分子生物学研究中一项重要的技术手段.自第一个质粒载体pSC101作为克隆载体以来,随着分子生物学技术的发展,克隆载体的整体结构、容载能力和转化效率都有了很大的改善.尤其是人类基因组计划的实施,产生了YAC和BAC克隆体系.随...
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【中文期刊】 李志峰 聂军 《中国公共卫生》 2003年19卷4期 418-419页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建含副溶血弧菌(vibrio parahaemolyticus,VP)tlh基因克隆载体和表达载体,检测并鉴定表达载体在转化菌的表达,为制备单抗、诊断试剂及进一步深入研究不耐热性溶血毒素(TLH)的功能奠定基础.方法根据Genbank...
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【中文期刊】 冯德江 徐军望 等 《生物技术通报》 2003年4期 29-32页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)与限制性内切酶相结合的方法,设计4条含有限制性酶切位点和相应突变的引物.以马铃薯X病毒(PotatoVirusX,PVX)外壳蛋白cp基因为模板,扩增出相应的片...
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【中文期刊】 柯岩 安云庆 等 《中国免疫学杂志》 2000年16卷6期 312-314,317页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:rBPI23基因(BPI600 bp)克隆与鉴定.方法:采用RT-PCR技术,从HL-60细胞mRNA中扩增编码BPI N端199个氨基酸(rBPI23)的基因片段(BPI600 bp),经酶切后通过连接反应构建重组克隆载体,测序鉴定...
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【中文期刊】 安云庆 柯岩 等 《首都医科大学学报》 2000年21卷2期 93-96页ISTICPKUCA
【摘要】 根据编码人IgG1Fc(Fcγ1)的基因序列,设计合成1对与之相匹配的引物.采用RT-PCR法,从正常人白细胞mRNA中扩增获得预期目的基因Fcγ1700 bp基因片段,成功构建PUC18-Fcγ1700重组克隆载体,酶切、酶谱分析与预期结...
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【中文期刊】 汪珊珊 陈明卫 《山东医药》 2016年4期 31-33页ISTICCA
【摘要】 目的：体外构建胰-十二指肠同源框-1( PDX-1)基因的克隆载体。方法采用TRIzol方法从大鼠胰岛细胞瘤细胞株中提取RNA,通过RT-PCR方法在体外扩增大鼠PDX-1 cDNA,琼脂糖凝胶电泳鉴定,割胶纯化后回收目的基因,与pMD-1...
【关键词】 胰-十二指肠同源框-1；cDNA；胰岛细胞瘤；
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【中文期刊】 张元丁 张延平 等 《中国听力语言康复科学杂志》 2009年1期 13-16页ISTIC
【摘要】 目的 应用TA克隆技术构建含中国人常见GJB2基因突变片段的载体,为构建突变绿色荧光蛋白融合载体提供基础.方法 首先利用定点诱变法在体外构建235delC、299-300delAT和176del16bp绿色荧光蛋白非融合载体,以此为模板利用...
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【中文期刊】 刘汉平 方志正 《中国生物制品学杂志》 2008年21卷5期 353-355,359页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 构建复合通用CD4+T辅助细胞表位基因克隆载体,并进行测序.方法 由DNA work2.0软件设计并人工合成20条55个碱基的寡核苷酸序列,利用套叠PCR技术人工合成全基因序列,并克隆至pUC19载体,转化大肠杆菌DH5α,提取质粒,...
【关键词】 通用CD4+ T辅助细胞表位；克隆载体；构建；
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【中文期刊】 夏玉凤 赵倩 等 《生物技术》 2006年16卷4期 12-13页ISTICCA
【摘要】 目的:将gfp基因克隆到pGEM3Z-f(+)载体.方法:将PCR扩增得到的gfp基因插入到pGEM3Z-f(+)质粒的Sma Ⅰ位点,构建重组质粒转化大肠杆菌DH5α.结果:含重组质粒的大肠杆菌在自然光下呈现黄绿色,而在涂X-gal的培养...
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【中文期刊】 宁勇 姚彩萍 等 《湖北中医学院学报》 2005年7卷4期 31-32页ISTIC
【摘要】 目的应用TA克隆技术构建含HLA-DRα基因的载体,作为实时荧光定量反转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测HLA-DRα基因的标准模板.方法利用RT-PCR法,从提取的外周血单核细胞总RNA中特异地扩增含635bp的HLA-DRαcDNA...
【关键词】 反转录聚合酶链反应；限制性内切酶；HLA-DRα 基因；
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