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            【中文期刊】 徐杨玉  温世杰  等 《生物技术通报》 2015年1期 131-137页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 在TvALP基因和TvRBL基因间加入一段柔性链接头(linker)基因序列,构建融合基因。生物信息学分析表明该融合基因含有一段信号肽序列。利用RT-PCR技术从绿色木霉菌丝体总RNA中扩增出TvRBL基因、TvALP基因和去除信号肽的?T...

            【关键词】 绿色木霉TvALP-linker-TvRBL融合基因信号肽

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            【中文期刊】 胡琼文  谢婷婷  等 《现代预防医学》 2014年41卷24期 4478-4481页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 原核表达并纯化人肠道病毒71型(EV71)亚单位VP1蛋白,分析其免疫原性.方法 采用PCR技术扩增EV71 VP1 (AB204852.1)基因序列,构建重组质粒pET32a(+)-VP1并转化E.coli BL21 (DE3),I...

            【关键词】 人肠道病毒71型(EV71)VP1融合蛋白原核表达

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            【中文期刊】 刘彤  李洋  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷3期 437-440页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建人p21活化激酶6(PAK6)的各个截短区域原核表达质粒,并诱导和鉴定其融合蛋白的表达,为探讨PAK6基因的生物学功能提供依据.方法:以真核表达质粒pcDNA3.1-GFP-PAK6为模板,PCR扩增出PAK6基因的各个截短片段....

            【关键词】 P21活化激酶截短区域原核表达质粒

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            【中文期刊】 宋天一  李菁华  等 《吉林大学学报(医学版)》 2013年39卷3期 620-624页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建蜱传森林脑炎病毒(TBEV)非结构蛋白1(NS1)的原核表达载体,以期获得其高纯度的表达,为制备多克隆抗体及其功能的研究奠定实验基础.方法:根据目的基因序列设计PCR引物,利用基因重组技术构建原核表达载体pEASYTM-E1-NS...

            【关键词】 蜱传森林脑炎病毒非结构蛋白1原核表达

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            【中文期刊】 张士尧  浦昀  等 《吉林大学学报(医学版)》 2012年38卷3期 404-408页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建重组钩端螺旋体(钩体)优势抗原表位原核表达系统,以期获得高纯度的钩体优势抗原表位重组融合蛋白,为进一步研究钩体快速检测方法奠定基础.方法:利用基因重组的方法构建表达质粒pET-rLP.经IPTG诱导后,获得高效表达带组氨酸标签的以...

            【关键词】 钩端螺旋体原核表达融合蛋白

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            【中文期刊】 亓燕红  邹竹荣  等 《生物工程学报》 2011年27卷6期 952-962页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 SUMO融合系统已成为目前大肠杆菌重组蛋白生产的重要手段,但在载体构建效率和蛋白可溶性等方面仍有待改进.本研究在PCR克隆酿酒酵母SUMO基因Smt3(Sm)时意外发现Sm具有组成型原核启动子活性;而且经软莓BPROM程序预测发现大多数物种...

            【关键词】 SUMO基因原核启动子SUMO融合系统

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            【中文期刊】 王晓辉  郭杰  等 《生物工程学报》 2009年25卷5期 701-707页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本实验克隆了人的4种SENP(Sentrin-specific protease)C 端催化结构域、3种SUMO(Small ubiquitin-like modifer)、ECFP(Enhanced cyan fluorescent pr...

            【关键词】 小泛蛋白样修饰物小泛蛋白样修饰物特异性蛋白酶小泛蛋白样修饰物双荧光融合蛋白

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            【中文期刊】 赵飞兰  李立志  等 《肿瘤防治研究》 2014年41卷3期 248-251页ISTICCA

            【摘要】 目的 为进一步研究临床应用癌-睾丸抗原GAGE-1诱导特异性抗肿瘤免疫反应,对GAGE-1基因进行克隆、体外原核重组表达及蛋白分离纯化.方法 运用RT-PCR技术从人QGY-7701肝癌细胞株中扩增GAGE-1基因片段,插入原核表达载体pG...

            【关键词】 GAGE-1原核表达纯化

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            【中文期刊】 王琪  闫见敏  等 《植物生理学报》 2024年60卷11期 1707-1716页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 核编码叶绿体蛋白通过叶绿体被膜上的TOC-TIC装置靶向导入叶绿体,对于叶绿体生物发生以及植物生长发育至关重要.Toc159家族蛋白是前体蛋白导入叶绿体这一过程中最重要的受体.以前期克隆到的番茄SlToc159-2基因为模版,选取SlToc...

            【关键词】 番茄叶绿体外膜转运蛋白Toc159

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            【中文期刊】 王欣怡  王晓倩  等 《生物技术通报》 2023年39卷10期 323-331页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 纳米抗体是一种新型的蛋白质工程抗体,其体积小、稳定性强、亲和力高等特性为科学研究提供了新的可能性.FLAG标签是一种广泛应用于生物学研究中的短肽标签,在生物学研究中具有重要的作用.为了制备FLAG标签的纳米抗体,利用酵母双杂交技术筛选出具有...

            【关键词】 FLAG标签纳米抗体酵母双杂

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            【中文期刊】 李爽  郝志明  《生物化学与生物物理进展》 2012年39卷2期 137-141页SCIISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 亲和体(affibody)是一种衍生于葡萄球菌A蛋白B结构域的人工蛋白质分子.B结构域含58个氨基酸,形成3个α螺旋结构,分子质量约为6.5 ku.其中第一及第二螺旋中的13个特定位点的氨基酸对其结构无明显影响,这些位点可被随机突变形成理论...

            【关键词】 亲和体人工突变体外筛选

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            【中文期刊】 刘洋  曹雪玮  等 《生物技术通报》 2019年35卷8期 146-154页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 将核糖体失活蛋白类鼻疽伯克霍尔德菌致死因子1(BLF1)与细胞穿膜肽(CPP)HBP融合表达并与商陆皂苷甲(EsA)联合使用,提高BLF1重组蛋白抑制肿瘤细胞生长的活性.通过原核表达及NI-NTA亲和层析纯化BLF1、BLF1-HBP融合蛋...

            【关键词】 类鼻疽伯克霍尔德菌致死因子1穿膜肽商陆皂苷甲

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            【中文期刊】 钟李婷  陈秀珍  等 《生物技术通报》 2019年35卷12期 10-15页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 对广藿香的法尼基焦磷酸酶(PatFPPS)进行重组蛋白的原核表达,并筛选与之互相作用的蛋白.利用PCR扩增PatFPPS编码区并连接到pGEX-6P-1表达载体,测序验证后将质粒转化BL21(DE3)表达菌株,并用IPTG诱导表达蛋白,最终...

            【关键词】 广藿香蛋白表达广藿香醇

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            【中文期刊】 唐美琼  闵丹丹  等 《中草药》 2018年49卷15期 3667-3671页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 为研究GGPPS基因在三七中的功能,从三七中克隆GGPPS基因CDS序列,并进行原核表达.方法 以3年生三七叶组织为材料,依据Genbank中已报道的GGPPS基因序列设计引物,利用RT-PCR技术,克隆得到编码区序列;克隆片段连接到...

            【关键词】 三七GGPPS基因CDS

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            【中文期刊】 徐艳红  田美慧  等 《中草药》 2018年49卷9期 2133-2139页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建国产沉香基原植物白木香AsMAPK3基因的原核表达载体,诱导重组蛋白正确表达,并研究AsMAPK3的亚细胞定位情况,为抗体制备准备材料,为筛选其互作蛋白及进一步研究其功能奠定基础.方法 通过PCR方法克隆AsMAPK3基因的部分编...

            【关键词】 白木香MAPK原核表达

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            【中文期刊】 王虹  马东明  等 《中草药》 2018年49卷6期 1390-1397页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 阳春砂是中药砂仁的主要来源植物,其转录组中己筛选出预测与萜类合成相关的候选转录因子unigene,对其进行克隆、序列分析和原核表达,以进一步认识阳春砂药效物质萜类合成的调控元件.方法 根据阳春砂转录组数据中预测为AvMYC4b的Uni...

            【关键词】 阳春砂AvMYC4b转录因子

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            【中文期刊】 腾桥  夏丽洁  等 《生物技术通报》 2017年33卷11期 188-193页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 旨在构建人磷酯酰肌醇蛋白聚糖3(Glypican3,GPC3)原核蛋白,制备小鼠GPC3抗血清.扩增人GPC3基因cDNA的完整的开放阅读框,克隆至pET28a原核表达载体,在大肠杆菌BL21表达菌株中诱导表达磷酯酰肌醇蛋白聚糖融合蛋白,利...

            【关键词】 磷酯酰肌醇蛋白聚糖3融合蛋白多克隆抗体

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            【中文期刊】 邵娜  李以圣  等 《中华疾病控制杂志》 2017年21卷6期 572-576页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 表达肠出血型大肠埃希菌O104∶H4的融合蛋白GST-AatA,获得单克隆抗体.方法 人工合成肠出血型大肠埃希菌O104∶H4的转运蛋白基因aatA,连接至pMDl8-T载体,转化E coli DH5α,双酶切回收,构建原核表达质粒P...

            【关键词】 肠出血型大肠杆菌抗体单克隆

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            【中文期刊】 陈莹  王远卓  等 《生物技术通报》 2017年33卷7期 138-144页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 制备家蚕GAPDH内参蛋白多克隆抗体,并对该抗体进行检测.利用PCR技术从家蚕中克隆GAPDH基因,构建其原核表达载体,转化大肠杆菌,诱导表达重组蛋白并纯化.纯化后的蛋白作为抗原免疫新西兰大白兔制备GAPDH多克隆抗体.用酶联免疫吸附法和W...

            【关键词】 家蚕甘油醛-3-磷酸脱氢酶多克隆抗体

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