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【中文期刊】 吴曦 霍桂桃 等 《中国实验动物学报》 2019年27卷5期 583-591页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 使用CRISPR/Cas9基因编辑技术敲除长度约为90 kb的小鼠FcγR2b,FcγR3,FcγR4基因簇,为构建FcγR基因人源化小鼠奠定基础.方法 使用在线预测软件在FcγR2b,FcγR3外显子区设计sgRNA,在每一位点挑选...
【关键词】 CRISPR/Cas9；FcγR基因；大片段敲除；
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【中文期刊】 刘改改 李爽 等 《遗传》 2015年11期 1167-1174页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 CRISPR/Cas9技术提供了一个全新的基因组编辑体系。本文利用CRISPR/Cas9平台，在人胚胎干细胞株中对选取的一段特定基因组区域进行了多种基因组编辑：通过在基因编码框中引入移码突变进行基因敲除；通过单链DNA提供外源模板经由同源重...
【关键词】 CRISPR/Cas9基因编辑；人多能干细胞；基因敲除；
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【中文期刊】 姚毅 朱力 等 《生物技术通讯》 2011年22卷3期 334-338页ISTICCA
【摘要】 目的:构建志贺菌毒力大质粒大片段缺失突变体库.方法:首先利用λ-Red重组系统构建弗氏2a志贺菌301株毒力大质粒特定位点缺失株,再在距离此位点20 kb处缺失另一突变位点,最后根据重组酶识别远端FRT位点的特性,将两个远端FRT位点之间的...
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【中文期刊】 王仁霞 刘荣娇 等 《微生物学报》 2017年57卷7期 1126-1137页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]利用Red同源重组系统,通过二步PCR法建立一种适合鼠疫耶尔森菌sRNA和大片段染色体基因敲除的方法.[方法]第一步PCR先扩增出目的基因的上、下游同源臂(600-1000 bp)及卡那抗性盒,再以上、下游同源臂及卡那抗性盒等摩尔混...
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【中文期刊】 王金龙 陈捷胤 等 《微生物学报》 2012年52卷11期 1335-1343页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]初步明确高毒菌株VDG1特异片段SCF73与大丽轮枝菌致病力的关系.[方法]通过比较基因组学分析和PCR鉴定,明确大丽轮枝菌高毒菌株VDG1相对于低毒菌株VDG2的特异片段SCF73 ;构建SCF73片段敲除质粒,导入农杆菌AGL-...
- 概要：
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【中文期刊】 周冰娜 赵笛辰 等 《中华骨质疏松和骨矿盐疾病杂志》 2024年17卷2期 114-122页ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 基于自主构建的丝束蛋白 3(Plastin 3,PLS3)大片段基因Pls3 敲除的新型骨质疏松大鼠模型,评估心血管表型及其与胶原代谢的关系.方法 采用CRISPR/Cas9 技术构建Pls3 基因 10～16 外显子大片段敲除的大鼠...
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【学位论文】 作者：张冲 导师：石德利 邵明 山东大学 生物学 发育生物学（博士） 2021年
【摘要】 母源因子是卵母细胞在成熟过程中积累的mRNA和蛋白质。其对于调控卵母细胞的成熟和胚胎的早期发育十分重要。在斑马鱼中，有超过一半的基因都有母源表达。斑马鱼的合子基因组激活起始于一千细胞期（受精后3小时），在这之前的所有发育过程完全由母源因子调...
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【中文期刊】 牛风娟 陈向前 等 《植物遗传资源学报》 2022年23卷3期 842-856页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 长链非编码RNAs(lncRNAs,long non-coding RNAs)是长度在200个核苷酸以上的功能性RNA分子,在植物的生长发育及逆境应答中发挥重要调控功能.前期研究发现一个大豆盐胁迫响应lncRNA,称其为lncRNA7758...
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【中文期刊】 刘丁源 邱婷 等 《遗传》 2016年38卷8期 756-764页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 IAA2(Indole Acetic Acid2)是拟南芥Aux/IAA生长素响应基因大家族中的一员,目前还没有它的突变体的报道,阻碍了对其功能和作用机制的深入研究.在CRISPR/Cas9基因组编辑技术中,1个sgRNA只能靶向基因的1个...
【关键词】 CRISPR/Cas9；多重sgRNA串联；基因组编辑；
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【中文期刊】 马婧 陈炜 等 《中国比较医学杂志》 2015年3期 1-8页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：敲除大鼠多药耐药基因1（Abcb1），并在基因敲除大鼠的基础上建立Abcb1人源化大鼠模型，为Abcb1相关药物代谢和药物评价研究提供更接近人类的动物模型。方法利用大片段转基因技术和CRISPR／Cas9技术相结合，建立人源化大鼠模型...
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【中文期刊】 伍展红 郑穗平 《生物技术通报》 2012年2期 107-111页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 谷氨酸棒杆菌中ldh基因编码乳酸脱氢酶,可催化丙酮酸转化生成乳酸.利用重叠延伸PCR的方法,获得中间缺失部分序列的dldh基因片段,将其与载体pk 18mobsacB连接,转化大肠杆菌感受态,筛选出阳性转化子后,转化谷氨酸棒杆菌ATCC 1...
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【中文期刊】 马张庆 洪宗元 《中国临床药理学与治疗学》 2006年11卷11期 1296-1300页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨前列腺素DP受体(DPR)对小鼠睡眠-觉醒调节的影响.方法:在苯巴比妥麻醉下,于DPR基因敲除(KO)小鼠及其野生型(WT)小鼠大脑皮层及颈部肌肉分别植入脑电(Electroencephalogram, EEG)和肌电(Elect...
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【中文期刊】 田永强 赵国屏 等 《中国抗生素杂志》 2006年31卷3期 129-134,180页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 基于微生物内源重组系统建立的体内重组工程已成为对生物体内基因功能研究的主要技术,通过基因敲除与嵌入,或大片段DNA的缺失与插入,然后根据生物体表型的变化可以确定该基因或基因簇在体内行使的功能.随着对噬菌体重组系统的认识,发展出了一种新的重组...
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【中文期刊】 姚建凤 李明 等 《解剖学杂志》 2019年42卷1期 1-5页ISTICCA
【摘要】 目的:探讨针对p62双sgRNA向导CRISPR/Cas9基因编辑效率.方法:采用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功敲除p62基因,通过细胞有限稀释法和嘌呤霉素筛选,免疫印迹法验证双sgRNA和单sgRNA向导的基因编辑成功率;流式细胞...
【关键词】 CRISPR/Cas9基因编辑；p62基因；过氧化氢；
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【中文期刊】 童鹏 李楠 等 《生物加工过程》 2016年14卷1期 14-18,35页ISTICCABP
【摘要】 构建一种新型的含有大片段同源臂的重组质粒用来对节杆菌进行代谢工程的改造.使用PCR扩增线性化载体片段,并通过酶切获取同源重组大片段,利用一步克隆技术将上述两片段连接起来;通过PCR-targeting将目标基因替换,并利用酶切自连将插入的片...
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【中文期刊】 谢中斌 王利霞 《广西医学》 2014年9期 1209-1211页ISTICCA
【摘要】 目的：探讨敲除基因iha对尿路致病性大肠杆菌生物被膜的影响。方法通过Red重组系统的pcP20、pkD3及pkD46质粒将菌株W140中的iha基因敲除，将噬菌体中的3个重组蛋白转入W140菌株使其具有相同的重组能力，氯霉素抗性基因替换敲除...
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【中文期刊】 胡勇 丛延广 等 《生物技术》 2011年21卷3期 10-13页ISTICCA
【摘要】 目的:构建伤寒沙门菌Ty2菌株菌毛亚单位bcfD基因敲除突变株.方法:利用交错PCR得到bcfD基因缺失且含其两侧翼序列的片段,将该片段与pMD 18-T连接,亚克隆到pYG4,电转入大肠埃希菌S17-1/λpir菌株,阳性菌株与受体菌伤寒...
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【中文期刊】 汪莉 王玉民 《军事医学科学院院刊》 2007年31卷4期 308-311页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:利用Red重组系统构建aroL和aroK缺失的大肠杆菌工程菌株.方法:本研究应用PCR扩增两翼与目的基因上下游同源的、含有氯霉素抗性基因片段,电击转化大肠杆菌BW25113.在阿拉伯糖诱导下,含有质粒pKD46的菌株DH5α表达λ噬菌...
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【中文期刊】 赵春燕 晏国洪 等 《江苏农业科学》 2016年44卷3期 59-63页
【摘要】 苔藓植物能否合成木质素目前还存在一定的争议。肉桂醇脱氢酶（CAD）催化木质素单体合成的最后一步反应，Real －Time PCR 表达分析表明，小立碗藓 CAD1基因在接种灰霉菌后的第2天表达量迅速上升。本试验利用PCR 技术，以小立碗藓基...
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【中文期刊】 李涛 曹庆华 等 《四川大学学报（自然科学版）》 2016年53卷1期 209-214页
【摘要】 为了提高外源基因整合到染色体的效率,在已构建的运动发酵单胞菌-大肠杆菌穿梭载体基础上,构建了RecET表达质粒pSUZM3a-RecET.选取乙醇脱氢酶Ⅰ(adhA)基因作为靶基因,四环素抗性基因(Tcr)作为筛选标记基因,检测RecET重...
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