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【中文期刊】 罗刚 李淑琴 等 《生物化学与生物物理进展》 2004年31卷2期 154-158页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 通过体外重组的方法,将asd基因插入重组表达质粒,使抗生素抗性失活,并与弗氏志贺氏菌FWL01构成宿主-载体平衡致死系统.通过蛋白质印迹结果表明,在没有抗生素条件选择的情况下,可稳定表达肠毒素大肠杆菌定居因子抗原CS6.重组菌通过口服和鼻饲...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 杨亚东 丁轲 等 《中国免疫学杂志》 2017年33卷10期 1520-1525页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:为构建减毒鼠伤寒沙门菌分泌性蛋白K1缺失株平衡致死系统,并将其开发为能够稳定携带外源基因的活疫苗载体.方法:利用重组自杀性质粒(pREΔasd)介导的等位基因交换技术,以减毒鼠伤寒沙门菌株SL1344ΔsseK1为亲本株,运用二步法筛...
【关键词】 鼠伤寒沙门菌； 自杀性质粒； 宿主-载体平衡致死系统；
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【中文期刊】 张春杰 陈松彪 等 《中国免疫学杂志》 2016年2期 210-213页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：为研究用于能够稳定携带外源基因的口服活疫苗载体。方法：本研究以减毒鼠伤寒沙门菌SL1344ΔsipB为研究对象，利用自杀性质粒pREΔasd介导的细菌同源重组技术，构建SL1344ΔsipBΔasd宿主-载体平衡致死系统，并进一步研究...
【关键词】 自杀性质粒； 宿主-载体平衡致死系统； SL1344ΔsipBΔasd(pYA3493)；
- 概要：
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【中文期刊】 尚珂 张俊峰 等 《中国免疫学杂志》 2015年3期 358-363页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：开发应用于猪的稳定携带异源基因的口服活疫苗载体。方法：本研究在减毒猪霍乱沙门菌ΔcrpΔcyaC78-1的基础上，运用自杀性质粒pREasd介导的细菌同源重组技术，构建缺失株ΔcrpΔcyaΔasdC78-1，再将携带asd基因的互补...
【关键词】 自杀性质粒； 宿主-载体平衡致死系统； ΔcrpΔcyaΔasdC78-1(PYA3493)；
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【中文期刊】 陈松彪 李静 等 《中国免疫学杂志》 2014年8期 1083-1087,1092页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：为了研制更加安全的鸡白痢沙门菌弱毒株，并将其开发为疫苗活载体。方法：本研究构建了鸡白痢沙门菌C79-13ΔcrpΔasd缺失株。双基因缺失株的构建是以含有重组自杀性质粒pREΔasd的大肠杆菌χ7213为供体菌，C79-13Δcrp为...
【关键词】 鸡白痢沙门菌C79-13； asd+平衡致死系统； 重组自杀性质粒；
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【中文期刊】 梁爱心 冯细钢 等 《生物工程学报》 2008年24卷6期 995-998页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将生长抑素(SS)与乙肝表面抗原(S)融合基因插入平衡致死系统原核表达质粒pYA3493中,转化至缺失asd基因的减毒猪霍乱沙门氏菌C500,经酶切、测序筛选得到非抗性的目的克隆,命名为pYA-SS.应用SDS-PAGE和Westernbl...
- 概要：
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【中文期刊】 袁盛凌 王芃 等 《微生物学通报》 2006年33卷2期 10-15页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 质粒pMM085是含有猪毒素源性大肠杆菌(ETEC)的黏附素K88与无毒肠毒素LTA-B+基因的重组质粒,含氯霉素抗性基因,由此构建的菌苗株带有抗药性.利用平衡致死系统改建此疫苗株,即将质粒上的氯霉素抗性基因cat替换成asd基因,并把新构...
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【中文期刊】 徐引弟 郭爱珍 等 《生物工程学报》 2006年22卷3期 366-372页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 猪霍乱沙门氏菌C500株是用化学方法致弱、用于预防仔猪副伤寒的弱毒疫苗株,虽具有较好的免疫原性,但仍有一定的残余毒力.为了研制更加安全并保持C500株良好免疫原性的弱毒株,及将C500开发为适于粘膜免疫的疫苗活载体,本文构建了猪霍乱沙门氏菌...
【关键词】 猪霍乱沙门氏菌C500株； △crp△asd缺失株； 重组自杀性质粒；
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【中文期刊】 黄维 钟辉 等 《微生物学报》 2004年44卷1期 62-66页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 大肠杆菌K-12 DY330菌株的染色体上整合有一种新型的同源重组系统--缺陷型λ原噬菌体同源重组系统.以DY330为出发菌,通过同源重组构建大肠杆菌thyA-株DY330-TI,其基因组特点是:thyA基因除保留N端的1～49氨基酸残基相...
【关键词】 thyA； 染色体-质粒平衡致死系统； 同源重组；
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【中文期刊】 张明亮 孙长江 等 《中国畜牧兽医》 2019年46卷11期 3341-3349页
【摘要】 本研究旨在构建基于减毒鼠伤寒沙门菌的平衡致死系统.将打靶基因片段Cat基因重组入鼠伤寒沙门菌LH430株asd基因位置,之后将温敏型质粒pCP20转入菌体中用以消除Cat基因片段,通过PCR技术两步法筛选出缺失株Δasd LH430;将as...
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【中文期刊】 宁元元 毛旭虎 等 《免疫学杂志》 2007年23卷2期 187-190页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 利用平衡致死系统构建表达O157:H7 EspA 的减毒鼠伤寒沙门氏菌.方法 构建表达EspA的重组质粒,再将其转入终宿主菌减毒鼠伤寒沙门氏菌x4550 株中构建成口服活疫苗株,用IPTG进行诱导表达,经聚丙烯酰胺凝胶电泳、Weste...
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【中文期刊】 李勣 李淑琴 等 《生物技术通讯》 2003年14卷3期 175-177页 ISTICCA
【摘要】 以鼠伤寒沙门氏菌标准株基因组DNA作为模板,用PCR的方法扩增鼠伤寒沙门氏菌的asd基因并克隆入质粒pUC19,并对其进行测序,序列与文献报道一致.同时将质粒pYA248上的链球菌asd基因进行了置换,观察了分别含有链球菌asd基因与鼠伤寒...
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【中文期刊】 黄维 钟辉 等 《生物技术通讯》 2002年13卷5期 378-382页 ISTICCA
【摘要】 以营养选择标志代替抗生素抗性标志为主要特征的染色体-质粒平衡致死系统的建立为基因工程产品的生产和基因治疗提供了更为安全,有效的操作平台.通过质粒载体基本元件与宿主菌之间的优化,构建出用于不同目的的外源基因的平衡致死系统.它对构建单价或多价减...
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【中文期刊】 毛旭虎 邹全明 等 《免疫学杂志》 2001年17卷6期 413-416页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的采用平衡致死系统构建表达幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的减毒沙门氏菌工程菌株.方法 PCR扩增幽门螺杆菌尿素酶B亚单位,与pYA3149(asd+)载体质粒重组,转化减毒的伤寒沙门氏菌突变株,SDS-PAGE,用western-blot分析其...
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【中文期刊】 王小舟 杨样 等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷8期 595-599页
【摘要】 为研发以禽伤寒沙门氏菌(SG) SG9R弱毒疫苗株为载体表达外源基因的活菌疫苗,本研究利用Red同源重组系统对SG9R株基因组中编码天冬氨酸β-半醛脱氢酶的asd基因进行敲除,构建SG9R△asd缺失突变株.该突变株在缺乏外源DAP培养条件...
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【中文期刊】 耿士忠 陈晓娟 等 《畜牧兽医学报》 2015年46卷12期 2243-2250页
【摘要】 敲除鸡伤寒沙门菌(SG)减毒疫苗株97A asd基因,构建宿主载体平衡致死系统并表达新城疫病毒(NDV)F蛋白,构建二价活菌苗.PCR扩增两段位于asd基因外侧的序列作为等位基因,以氯霉素抗性(CmR)基因替代asd基因,构建自杀质粒pGM...
【关键词】 鸡伤寒沙门菌； asd基因； 宿主载体平衡致死系统；
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【中文期刊】 吉玉辉 孙怀昌 等 《中国兽医科学》 2008年38卷11期 919-924页
【摘要】 将大肠杆菌DH5α在含胸腺嘧啶核苷和三甲氧苄二氨嘧啶的琼脂平板上培养,获得了遗传稳定的ThyA-大肠杆菌DH5α21株.用PCR扩增野生菌和ThyA-大肠杆菌的thyA基因,将测定的序列与野生型thyA基因相比,6号突变株的thyA基因第9...
【关键词】 ThyA-大肠杆菌； 染色体-质粒平衡致死系统； 构建；
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【中文期刊】 杨健美 张小荣 等 《动物医学进展》 2005年26卷7期 45-48,68页
【摘要】 利用平衡致死系统成功地将构建表达致PWD和ED大肠杆菌保护性抗原基因的重组菌BL21(pFSFaeG)中所含氨苄抗性基因敲除,并转化沙门氏菌宿主菌X4550.经过质粒酶切分析和表达产物的SDS-PAGE证实,氨苄抗性基因已经成功敲除,并且目...
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【中文期刊】 武军元 许程剑 等 《动物医学进展》 2005年26卷11期 105-107页
【摘要】 以染色体-质粒平衡致死系统为特征的减毒鼠伤寒沙门氏菌是一种有效的基因递呈载体,突变菌体通过入侵到宿主的派伊尔氏结,进而被抗原递呈细胞如树突状细胞和巨噬细胞吞噬,最终将突变菌体携带的外原基因导入真核细胞并在其中表达,从而诱导机体产生针对外原基...
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【中文期刊】 张明明 叶浩达 等 《微生物学报》 2024年64卷3期 767-779页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]构建一种基于谷氨酸消旋酶(MurI)基因的染色体-质粒平衡致死系统,用于杀香鱼假单胞菌减毒活疫苗株(Pseudomonas plecoglossicida ΔtssD-1,Pp ΔtssD-1)中表达外源抗原,为开发多联活疫苗提供新...
【关键词】 杀香鱼假单胞菌ΔtssD-1株； 营养缺陷株； 平衡致死系统；
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