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【中文期刊】 马海燕 方彧聃 等 《生命科学研究》 2009年13卷5期 394-398页 ISTICCA
【摘要】 慢病毒载体已经广泛应用于动物模型中基因治疗的研究和转基因动物的制备,而准确地测定重组慢病毒的滴度和感染效率是其关键步骤.通过荧光实时定量PCR的方法定量分析重组慢病毒的颗粒数以及病毒的活性滴度,并以GFP报告基因的方法作为对照来验证定量PC...
【中文期刊】 代洋 石伟林 等 《武汉大学学报(医学版)》 2018年39卷2期 258-263,304页 ISTICCABP
【摘要】 目的:利用特异探针检测慢病毒拷贝数,在CART免疫治疗中准确区分携带不同靶点的CART细胞在体内的增殖情况.方法:采用分子克隆技术构建含CD19和CD22 CAR结构的慢病毒重组质粒;通过流式和ELISA技术检测两种CART细胞在体外与Ra...
【关键词】 CART免疫治疗; 慢病毒拷贝数; TaqMan实时定量技术;
【中文期刊】 马强 李明 等 《生物化学与生物物理进展》 2007年34卷8期 836-843页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为了建立新型、高产量的慢病毒载体制备体系,将构建好的主框架质粒pVECRNA、包装质粒pGAGPOL及包膜质粒pVSVG通过脂质体共转染至BHK21细胞.再用含有T7RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF-3感染细胞,培养4天后,收集培养上清...
【中文期刊】 张婷 杨博 等 《畜牧兽医学报》 2022年53卷6期 1877-1885页
【摘要】 旨在研究非洲猪瘟病毒(African swine fever,ASFV)编码的D1133L基因功能,本文利用慢病毒表达系统构建了过表达D1133L的MA-104/D1133L细胞系,分析ASFV在MA-104/D1133L细胞系与MA-10...
【中文期刊】 李晓波 顾建娟 等 《首都医科大学学报》 2013年34卷6期 872-878页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 体外分离和培养人脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cell,UC-MSCs),并将含有人磷脂磷酸水解酶3(human lipid phosphate phosphatases 3,hLP...
【关键词】 脐带; 间充质干细胞; 胶质源性神经营养因子;
【中文期刊】 王淑艳 任萍 等 《生物工程学报》 2008年24卷12期 2061-2067页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用含胶质源性神经营养因子(Glial cell derived neurotrophic factor,GDNF)基因的慢病毒载体转染了人胚胎来源的神经干细胞,探讨了转染后GDNF在神经干细胞中的体外表达水平及其影响因素.首先GDNF基因...
【关键词】 胶质源性神经营养因子; 神经干细胞; 慢病毒载体;
【中文期刊】 宋现让 迟伟玲 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷2期 19-23页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨慢病毒载体介导人肿瘤细胞RNA干扰的影响因素.方法:用介导RNAi的慢病毒载体Lenti6-HIF1α和Lenti6-HIF1β分别转导人肿瘤细胞系Hela、SPCA1和A549,筛选靶基因稳定表达沉默的细胞株.病毒RNA分子拷贝...
【中文期刊】 马强 李明 等 《生物工程学报》 2007年23卷5期 958-960页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了建立新型、高产量的慢病毒载体制备体系,将构建好的主框架质粒pVECRNA、包装质粒pGAGPOL及包膜质粒pVSVG通过脂质体共转染至BHK21细胞,再用含有T7RNA聚合酶基因的重组痘苗病毒vTF-3感染细胞,培养4d后,收集培养上清...
【中文期刊】 迟伟玲 刘贤锡 等 《山东大学学报(医学版)》 2005年43卷3期 199-202,207页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建人鸟氨酸脱羧酶(ODC)基因的RNAi慢病毒载体.方法:根据ODC mRNA序列,选择3个19nts的靶序列,设计并合成包含各正反义靶序列的互补DNA链,退火后插入pSuper载体的H1RNA启动子后产生pRiODC,将其中的OD...
【中文期刊】 张飞飞 孙文 等 《生物技术通讯》 2019年30卷4期 523-527,588页 ISTICCA
【摘要】 目的:建立一种有效、灵敏、准确的慢病毒滴度的分子检测方法.方法:分别构建慢病毒调控元件WPRE和单拷贝基因白蛋白(Alb)基因的重组质粒,紫外吸收法测量后经数学换算得到相应的拷贝数,以梯度稀释质粒为模板,利用基于SYBR Green的荧光定...
【中文期刊】 刘军 仇珍珍 等 《生物技术通讯》 2017年28卷6期 762-767页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建分泌表达牛病毒性腹泻病毒(BVDV)E0蛋白的MDBK细胞系,并探究其传代和冻存稳定性.方法:用实验室制备的BVDV E0基因重组慢病毒感染MDBK细胞,荧光观察并收集MDBK细胞培养上清进行Western印迹分析,通过qPCR方...
【中文期刊】 张丽萍 高越 等 《医学分子生物学杂志》 2015年4期 187-191页 ISTICCA
【摘要】 目的:研究慢病毒在感染细胞后,是否全部整合入染色体。方法用慢病毒载体的假病毒感染293 T细胞后,抽提培养2 d和10 d的细胞基因组DNA。通过定量PCR检测细胞基因组中LTR拷贝数,计算出整合率。分别取病毒感染3 d和11 d的细胞,离...
【中文期刊】 吴建臣 李胜文 等 《中华实验外科杂志》 2011年28卷2期 203-205页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建含血管内皮生长因子(VEGF)基因的慢病毒载体,转染人胚胎来源的胰岛干细胞(hPSC),探讨VEGF在胰岛干细胞中的体外表达水平及其影响因素.方法 将VEGF基因克隆入慢病毒载体,利用293T细胞包装出病毒,按拷贝数分别为2、5、...
【中文期刊】 段安琴 王宁 等 《农业生物技术学报》 2014年22卷9期 1065-1073页
【摘要】 建立含有TetO-FUW-OSKM和FUW-M2rtTA的第二代猪(Sus scrofa domesticus)成纤维细胞,使其在添加强力霉素(doxycycline,DOX)而无需再次感染病毒的条件下可以重编程.将慢病毒(Lentivir...
【关键词】 猪; 成纤维细胞; 四环素调控基因(TetO)诱导系统;
【中文期刊】 张敬之 郭歆冰 等 《自然科学进展》 2006年16卷5期 571-577页
【摘要】 以慢病毒(lentivirus)载体为骨架,携带绿色荧光蛋白(GFP)基因的假病毒,通过小鼠受精卵卵周隙注射,将其感染小鼠受精卵,经移植于假孕母鼠后获得转基因小鼠.应用PCR、荧光显微镜观察和流式细胞仪分析等技术,证明了GFP基因的整合率达...
【中文期刊】 潘万龙 方岩 等 《第三军医大学学报》 2012年34卷19期 1925-1928页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探索宿主因子FEN1对HBV复制过程的影响.方法 构建FEN1过表达慢病毒质粒,酶切鉴定并测序,转染293FT细胞,Western blot检测FEN1蛋白表达.将该质粒转染HBV复制稳定细胞系,设立慢病毒包装改造质粒pLenti6/...
【关键词】 DNA瓣核酸内切酶类; 慢病毒载体; 乙型肝炎病毒;