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【中文期刊】 段文婷 李倩 《生物技术》 2024年34卷3期 269-274页ISTICCA
【摘要】 [目的]采用慢病毒系统构建AMP依赖的蛋白激酶α1(AMP activated protein kinase α1,AMPKα1)基因过表达的3T3-L1细胞系,探讨其对炎症因子表达水平的影响.[方法]在美国国家生物技术信息中心(NCBI)...
【关键词】 慢病毒系统；基因过表达；AMP依赖的蛋白激酶α1；
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【中文期刊】 宋喜君 周鹤妍 等 《基因组学与应用生物学》 2021年40卷1期 287-295页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为考察APPswe基因的表达对细胞生长和凋亡作用的影响,本研究采用gateway分子重组技术构建表达APPswe基因的慢病毒质粒,并将该质粒转染至SH-SY5Y细胞中.用RT-PCR和Western blot技术分别测定APPswe基因的m...
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【中文期刊】 张丽霞 吴雪伶 等 《药物分析杂志》 2021年41卷7期 1189-1202页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:建立可定量检测质粒DNA超螺旋构象相对百分含量的毛细管凝胶电泳法(CGE),并开展方法学验证研究及初步应用探讨.方法:选用涂层毛细管,采用荧光检测器CGE法分离质粒DNA,首先通过限制性内切酶和缺刻酶处理法确认质粒DNA超螺旋(cov...
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【中文期刊】 李丹 余涛 等 《生物技术》 2021年31卷6期 534-539页ISTICCA
【摘要】 [目的]构建人CYP39A1基因过表达慢病毒载体,并建立CYP39A1基因过表达的HepG2细胞株,为研究CYP39A1在肝细胞肝癌中的作用机制奠定基础.[方法]构建具有嘌呤霉素抗性的CYP39A1慢病毒载体,经酶切鉴定及DNA测序鉴定后,...
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【中文期刊】 李婷 刘潺潺 《生物技术》 2019年29卷1期 35-38页ISTICCA
【摘要】 [目的]构建可以大规模提取IL35的新型质粒pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35.[方法]质粒pLVX-IRES-ZsGreen1和pUC57-mus-IL35-拼接用XhoⅠ和NotⅠ进行双酶切,将回收纯化的目的片段mu...
【关键词】 pLVX-IRES-ZsGreen1-mus-IL35；慢病毒；PCR；
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【中文期刊】 哈传博 赵然 等 《生物技术》 2018年28卷4期 329-334,391页ISTICCA
【摘要】 [目的]构建抵抗shRNA的同义突变SND1慢病毒质粒,并在SND1敲低的卵巢癌细胞系中回复表达SND1.[方法]依据密码子的简并性,针对shRNA识别的序列(TCTCGTCTCAAACTCTATTTG)设计同义突变序列(TAGG-TATA...
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【中文期刊】 曾燕婷 李理 等 《中国呼吸与危重监护杂志》 2017年16卷5期 451-456页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建稳定表达谷胱甘肽S转移酶mu5 (GSTMS)的人支气管上皮16HBE细胞株,探讨诱导GSTM5核转位的关键因素.方法 构建表达GSTM5基因的重组慢病毒载体(PLVX-puro-GSTM5-SBP-3*flag-N、PLVX-p...
【关键词】 谷胱甘肽S转移酶mu 5；重组慢病毒表达质粒；16HBE；
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【中文期刊】 秦海艳 谢忆 等 《微生物学免疫学进展》 2024年52卷4期 9-15页ISTICCA
【摘要】 目的 通过在人胚肾-293T(human embryo kidney-293T,HEK-293T)细胞中过表达岩藻糖转移酶 2(fucosyl-transferases 2,FUT2)基因,进而催化诺如病毒受体人类组织血型抗原(histo-...
【关键词】 人类组织血型抗原；人胚肾293T细胞(HEK-293T细胞)；诺如病毒；
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【中文期刊】 高明慧 霍云飞 等 《现代生物医学进展》 2024年24卷11期 2043-2051页ISTICCA
【摘要】 目的:构建小鼠shASPP2H22稳转肝癌细胞系,观察ASPP2敲低对血管生成的影响.方法:针对小鼠ASPP2基因设计了 3个不同的shRNA干扰序列(Y18421,Y18422,Y18423)及1个对照序列(GL427NC2),采用双酶切...
【关键词】 H22细胞；肿瘤蛋白p53结合蛋白2；血管内皮生长因子；
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【学位论文】 作者：李振宇导师：徐开林 潘秀英 徐州医学院 徐州医科大学 临床医学 内科学(血液病)（硕士） 2003年
【摘要】 目的:①构建并改造来源于人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)的慢病毒载体三质粒包装系统,重点在转移质粒中引入多聚嘌呤通道序列元件(PPT)和选择不同的内部启动子来驱动标志基因绿色荧光蛋白(GFP)的表达,完成其结构改造.②建立慢病毒载体的包装...
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【外文期刊】 Vargas-J Jr ; Klotman ME ; 等 《Antiviral Research》 2008年80卷3期 288-294页SCISCIEMEDLINE
【中文期刊】 杨博 郑毅 等 《生物化学与生物物理进展》 2017年44卷6期 515-522页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 研究一种蛋白质在神经元中的功能,最有效的方法之一是在该基因敲除动物的神经元中确认其表型.传统的用胚胎干细胞建立基因敲除动物模型的方法虽然稳定,但是复杂、耗时.近几年来,一种新型基因组编辑技术——CRISPR/Cas9,能够在不分裂的神经元中...
【关键词】 CRISPR/Cas9；基因编辑；Synaptotagmin Ⅰ；
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【中文期刊】 杨晓玉 雷文波 等 《中国病原生物学杂志》 2017年12卷4期 311-316页ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 探讨沙眼衣原体(Chlamydia trachomatis,Ct)质粒蛋白pORF5对HeLa细胞自噬的影响,为进一步阐明Ct致病机制提供实验依据. 方法 PCR扩增Ct pORF5质粒蛋白基因,克隆入PLenO-DCE慢病毒质粒,构...
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【中文期刊】 徐然 仇文进 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2017年37卷5期 559-563页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨叉头框P2基因(FOXP2)对胶质细胞瘤细胞侵袭的影响.方法:采用荧光定量PCR技术与Western blot分别检测FOXP2在正常星型胶质细胞与胶质瘤细胞中的核糖核酸与蛋白表达水平.用携带FOXP2基因慢病毒质粒转染胶质瘤细胞...
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【中文期刊】 李玢 张广献 等 《中药新药与临床药理》 2014年3期 373-377页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：构建小鼠黑色素瘤细胞（B16）过表达野生型及点突变型缝隙连接蛋白43（Connexin43， Cx43）细胞模型，为以缝隙连接（Gap Junction， GJ）为靶点的中药复方、中药单药及药物单体的研究提供可靠阳性对照和阴性对照。方...
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【中文期刊】 龚玉芳 刘峰 等 《现代免疫学》 2017年37卷4期 287-293页ISTIC
【摘要】 本研究通过PCR方法扩增含EF1a启动子的DNA片段,利用同源重组酶将该DNA片段整合到pGreenPuro-shRNA慢病毒载体CMV启动子下游,获得新的多启动子慢病毒载体pGreenPuro-Dual.同时,在改造的慢病毒载体的CMV启...
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【中文期刊】 胡丽娟 陈洁 等 《中国卫生检验杂志》 2017年27卷18期 2588-2592页ISTIC
【摘要】 目的 探讨慢病毒介导LOC100132354过表达载体的构建及鉴定.方法 化学合成LOC100132354全基因序列,与GV303载体进行连接反应获得重组质粒;进一步制备感受态细胞,并行转化实验,PCR鉴定进行转化子,对阳性转化子进行测序;...
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【中文期刊】 康赐明 陈远志 等 《生物技术》 2017年27卷2期 123-128页ISTICCA
【摘要】 [目的]建立稳定表达融合EGFP的人新生儿Fc受体(hFcRn)的MDCK细胞株.[方法]构建重组慢病毒质粒pEGFP-hFcRn,采用四质粒包装系统共转染HEK 293T细胞生产重组慢病毒,感染MDCK细胞后对EGFP阳性细胞进行流式单细...
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【中文期刊】 赵文忠 王柏贤 等 《中国优生与遗传杂志》 2017年25卷9期 11-12,84页ISTIC
【摘要】 目的 构建α-珠蛋白基因RNAi重组慢病毒载体.方法 合成靶序列0ligo DNA,退火形成双链DNA,克隆到慢病毒pLK0载体,重组载体进行酶切和测序鉴定.在脂质体的介导下将psPAX2、pMD2.G及慢病毒载体三质粒共转染293T细胞,...
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【中文期刊】 朱丽红 姜霄晖 等 《潍坊医学院学报》 2017年39卷4期 306-309,封3页
【摘要】 目的 构建p27kip1过表达慢病毒载体,观察其感染人晶状体上皮细胞系后p27kip1的表达情况,为探讨p27kip1基因转染治疗后发性白内障(PCO)提供实验基础.方法 设计p27kip1基因引物,通过聚合酶链反应(PCR)扩增制备p27...
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