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            【中文期刊】 张春  苏丛  等 《安徽医科大学学报》 2024年59卷3期 398-402页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建p62 基因过表达慢病毒载体及其表达系统,并在人单核细胞白血病细胞(THP-1)中稳定表达,为在细胞水平研究p62 基因的作用提供途径与方法.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增p62 基因片段,将扩增产物连接至线性化pcDNA...

            【关键词】 P62慢病毒载体构建三质粒包装系统

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            【中文期刊】 李善琴  黄保英  等 《生物技术通讯》 2016年27卷3期 348-353页ISTICCA

            【摘要】 目的:优化A/Anhui/1/2013 (H7N9)流感假病毒的制备条件.方法:采用基于慢病毒载体的假病毒包装系统,通过对质粒组合方式、骨架质粒与包膜质粒配比、质粒复合物与转染试剂配比、换液时间点、维持液血清浓度、假病毒收获时间点等条件的探...

            【关键词】 慢病毒载体包装系统H7N9流感病毒假病毒

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            【学位论文】 作者:李善琴导师:田厚文   黄保英   任皎   中国疾病预防控制中心   生物学 病原生物学(硕士) 2016年

            【摘要】 背景2013年3月31日中国首次报道了人感染H7N9禽流感病例,截止5月19日,已确诊病例786例,包括307.虽然目前没有明确的证据说明H7N9能否人传人,但是家庭聚集性病例的报道提示H7N9流感病毒有大流行的可能性.A/Anhui/1/...

            【关键词】 慢病毒载体包装系统H7N9流感病毒

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            【学位论文】 作者:范雁导师:黄瑞   苏州大学   基础医学 免疫学(博士) 2010年

            【摘要】 近年来,病毒载体已经成功地用于介导基因或小分子干扰RNA进入哺乳动物神经元或脑。然而,这个途径的缺点是病毒载体的表达会随时间而消退,表达的高峰出现在2-3天,7天后就消失了。如何将基因高效转染及长期稳定表达成为人们研究的热点。近期研究者把目...

            【关键词】 Phox2基因多巴胺β-羟化酶

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            【学位论文】 作者:高强导师:刘党生   邓继先   沈阳药科大学   药学 微生物与生化药学(硕士) 2006年

            【摘要】 慢病毒载体因为可以介导外源基因在非分裂细胞中稳定高效地表达而成为转基因动物和基因治疗研究的重要工具。为了能够制备安全的慢病毒,慢病毒的元件被构建在多个质粒上以减少因重组产生可复制病毒的可能性,其中最具代表性的是基于HIV-1的第三代慢病毒载...

            【关键词】 慢病毒载体包装细胞系

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            【中文期刊】 郭旺  彭光众  等 《畜牧兽医学报》 2024年55卷11期 5310-5316页

            【摘要】 旨在通过慢病毒表达系统构建稳定表达marco基因的HD11细胞系,为研究marco基因的抗病毒免疫功能提供重要工具.首先,以HD11细胞为模板,通过PCR扩增获得marco基因编码区序列,并将其克隆到慢病毒载体上,获得重组慢病毒质粒pLV3...

            【关键词】 marco细胞系稳定表达慢病毒

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            【中文期刊】 覃铮  刘大男  等 《重庆医科大学学报》 2020年45卷2期 212-216页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建过表达Ⅲ型纤连蛋白结构域包含蛋白5 (fibronectin typeⅢdomain-containing protein 5,FNDC5)基因的慢病毒载体,获得稳定转染FNDC5的THP-1细胞系.方法:PCR扩增目的基因FND...

            【关键词】 FNDC5基因动脉粥样硬化慢病毒载体

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            【中文期刊】 肖斌  庄玉格  等 《实用医学杂志》 2018年34卷13期 2137-2140页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 构建人BLNK基因慢病毒载体,筛选稳定表达BLNK的人乳腺癌MDA-MB-231细胞株,为探讨BLNK对乳腺癌的调控作用提供细胞株模型.方法 采用PCR法从3×Flag-BLNK质粒中扩增BLNK基因片段,连接到带有绿色荧光蛋白(GF...

            【关键词】 BLNK慢病毒载体乳腺癌

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            【中文期刊】 高月  邓小芳  等 《中国免疫学杂志》 2016年32卷5期 678-681页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨构建Arm重复蛋白1(ALEX1)基因过表达慢病毒表达载体,感染乳腺癌细胞系SK-BR3后观察ALEXI的表达,为研究ALEX1在乳腺癌中的作用及机制奠定基础.方法:利用DNA重组技术将ALEX1基因插入到慢病毒穿梭质粒LV5中,...

            【关键词】 ALEX1慢病毒构建

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            【中文期刊】 李敏  赵珂  等 《中国实验血液学杂志》 2016年24卷4期 1173-1178页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建蛋白磷酸酶2A的催化亚基PPP2Cβ慢病毒表达载体,获得较高滴度慢病毒颗粒,感染K562细胞建立稳定株,检测过表达PPP2Cβ对K562红系分化的影响.方法:将PPP2Cβ的CDS序列插入到第二代慢病毒表达载体FUGW,并与包装质...

            【关键词】 PPP2Cβ慢病毒载体红系分化

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            【中文期刊】 张修彦  詹纯列  等 《中国组织工程研究》 2015年24期 3813-3817页ISTICPKUCA

            【摘要】 背景:有研究表明人白细胞抗原-A*0206亚型与鼻咽癌的发生正相关,但目前还没有相应的转基因动物模型,以用于从整体水平评价HLA-A*0206与鼻咽癌的关系及进一步研究免疫和基因疗法。目的:构建 pLVX-CMV-人白细胞抗原-A*0206...

            【关键词】 组织构建组织工程鼻咽癌

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            【中文期刊】 席进  陈月娟  等 《华中科技大学学报(医学版)》 2015年44卷2期 176-179页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 构建大鼠少突胶质细胞转录因子1(Olig1)的慢病毒表达载体,并进行鉴定和包装.方法 采用聚合酶链反应(PCR),分别以大鼠pEGFP-N3-Olig1表达质粒和pDsRed-monomer-N1为模板,扩增获得大鼠Olig1片段和红...

            【关键词】 少突胶质细胞转录因子1慢病毒表达载体包装

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            【中文期刊】 刘晓军  王娜  等 《中国癌症杂志》 2013年11期 857-862页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 背景与目的:前列腺癌抗原3(prostate cancer antigen 3,PCA3)作为一种长链非编码RNA(lncRNA)已被证实在前列腺癌中高度特异性表达,暗示其可能在前列腺癌中发挥重要作用,为深入研究,我们将完整的PCA3基因转...

            【关键词】 前列腺癌前列腺癌抗原3真核表达载体

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            【中文期刊】 许朝  胡端敏  等 《生物学杂志》 2013年30卷2期 18-22页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用PCR方法合成EEF1A2的基因全长,经 NotⅠ和NsiⅠ酶切后克隆到慢病毒载体pGLV5-EF1a-EGFP/Puro上.构建的重组质粒pGLV5/EEF1A2经 PCR、酶切及测序鉴定正确后,利用慢病毒表达系统 (pGLV5 Le...

            【关键词】 真核延伸因子1A2慢病毒载体真核表达

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            【中文期刊】 王慧方  郑振中  《安徽医科大学学报》 2012年47卷10期 1165-1168页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 拟构建人纤维蛋白原样蛋白2(FGL2)凝血酶原酶基因RNA干扰慢病毒载体,为调控人FGL2凝血酶原酶表达水平提供有利的工具.方法 根据人FGL2凝血酶原酶基因的mRNA序列选择4条靶序列,设计合成靶序列的Oligo DNA,退火形成双...

            【关键词】 慢病毒载体RNA干扰FGL2基因

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            【中文期刊】 吴顺泉  林君  等 《中国实验血液学杂志》 2012年20卷1期 159-163页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究旨在建立miRNA靶基因高通量筛选系统,筛选出能调控p21NAs,以便试验验证及探索这些miRNA的生物学功能及意义.利用分子克隆技术构建并鉴定2个慢病毒表达载体-pWPXL-Luc及pWPXL -Luc -P21-3 'UTR,分别...

            【关键词】 慢病毒荧光素酶报告载体microRNA

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            【中文期刊】 李霏  李松林  等 《中国医科大学学报》 2011年40卷12期 1081-1084页ISTICPKUCABP

            【摘要】 目的 构建共表达人NK4基因和增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的重组慢病毒载体,转染人高侵袭转移肝癌细胞LM3(HCCLM3),观察其转染效率及表达情况.方法 采用DNA重组技术,将NK4基因克隆至带EGFP的慢病毒表达载体pLent...

            【关键词】 NK4慢病毒载体人高侵袭转移肝癌细胞LM3

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            【中文期刊】 蒋易楠  李长燕  等 《安徽医科大学学报》 2011年46卷9期 843-846页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的 制备GATA2分子慢病毒干涉颗粒,建立GATA2表达下调的K562稳定细胞系.方法 采用第3代慢病毒包装系统,将携带特异性干涉GATA2的DNA序列克隆入穿梭质粒PsicoR中,转染K562细胞,Western blot法检测对内源性...

            【关键词】 GATA2转录因子RNA干扰慢病毒

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            【中文期刊】 张焕新  陈翀  等 《中国实验血液学杂志》 2011年19卷3期 574-577页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本研究旨在构建携带人血管内皮钙黏蛋白(VE-cadherin)基因的重组慢病毒载体及探讨VE-cadherin蛋白在Sup-B15细胞中的表达.采用RT-PCR扩增人VE-cadherin基因并克隆至pCR-Blunt载体.将VE-cadh...

            【关键词】 慢病毒载体血管内皮钙黏蛋白Sup-B15细胞

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            【中文期刊】 刘真  甄艳  等 《南方医科大学学报》 2011年31卷1期 65-68页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 克隆人NESG1基因,构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体pGC-FU-NESG1-EGFP,包装慢病毒,感染293FT细胞并进行鉴定.方法 以NESG1全长克隆为模板扩增其编码框序列,通过限制性内切酶AgeⅠ酶切...

            【关键词】 NESG1慢病毒增强型绿色荧光蛋白

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