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【中文期刊】 王勇 诸葛斌 等 《生物学杂志》 2009年26卷3期 1-3页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 有氧条件下,建立了克雷伯杆菌破碎方法及其生产1,3-丙二醇代谢途径中关键酶甘油脱水酶的酶活测定方法.甘油脱水酶酶活测定时在超声时间25min,功率为300w的条件下最适破碎频率为破碎时间1s,停息时间4s;甘油脱水酶酶活测定所用磷酸盐缓冲液...
【中文期刊】 李红梅 李英华 等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷5期 46-51页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将来自于肺炎克雷伯氏杆菌的甘油脱水酶基因插入到质粒pET28(a+)-yqhD的上游,并用SD序列隔开,串联构建重组质粒pET28(a+)dhaBCE-yqhD,转化到大肠杆菌E.coli Novablue中进行共表达.结果显示:含有pET...
【中文期刊】 张晓梅 诸葛健 《生物工程学报》 2007年23卷5期 841-845页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用PCR技术扩增来源于弗氏柠檬杆菌(Citrobacter freundii)的甘油脱水酶编码基因dhaB以及甘油脱水酶激活因子编码基因dhaG dhaF,将其与1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的编码基因yqhD串联在温控表达载体pHsh上...
【中文期刊】 田平芳 谭天伟 《生物工程学报》 2007年23卷2期 201-205页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 微生物发酵生产1,3-丙二醇因对环境友好而成为研究热点.通过对发酵菌种、代谢途径、调节子和关键酶的分析,阐述了微生物转化甘油为1,3-丙二醇的分子机理.尤其对还原途径的限速酶-甘油脱水酶的分子结构及再激活因子进行了详细分析,为菌种的遗传改造...
【中文期刊】 王宝光 刘铭 等 《中国生物工程杂志》 2006年26卷6期 59-65页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为提高克雷伯氏肺炎杆菌产1,3-丙二醇的能力,以离子束、紫外线和氯化锂为复合诱变法,建立了产酸圈和产物耐受相结合的平板筛选方法,获得可耐受高浓度1,3-丙二醇并且副产物中乙醇含量较少的优良突变菌株2株.与出发菌株相比,两株高产突变菌株Kle...
【中文期刊】 齐向辉 韦宇拓 等 《工业微生物》 2009年39卷5期 7-12页 ISTICCA
【摘要】 1,3-丙二醇是一种重要的化工原料,其生物法生产的研究越来越受到广泛的关注.以克雷伯氏菌的总DNA为模板,通过PCR分别扩增出约1.8 kb的 gdrA 和 0.4 kb的 gdrB 的两个基因片段,随后,将此两基因以多顺反子的方式与 pS...
【中文期刊】 陈永胜 刘长江 等 《中国生物制品学杂志》 2008年21卷1期 19-22页 ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 克隆甘油脱水酶α亚基基因,构建表达载体,表达并纯化融合蛋白.方法 采用PCR技术克隆甘油脱水酶α亚基gldA基因,并将其重组到含组氨酸标签的表达质粒pET-32a(+)中.将重组质粒经热激转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱...
【中文期刊】 洪燕 李雯君 等 《生物技术》 2006年16卷4期 1-4页 ISTICCA
【摘要】 依赖辅酶B12的甘油脱水酶和二醇脱水酶是同工酶.它们不仅氨基酸序列和蛋白质折叠方式非常相似,而且有着相同的催化机制.该文在同一菌株中将编码甘油脱水酶β亚基基因和编码二醇脱水酶β亚基基因片段分别克隆至T载体,从而获得两段核苷酸片段序列,将pd...
【中文期刊】 陈永胜 刘长江 等 《工业微生物》 2005年35卷2期 19-23页 ISTICCA
【摘要】 为了表达及纯化甘油脱水酶β亚基蛋白,采用PCR及DNA重组技术将甘油脱水酶β亚基基因gldB重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果表明,转化重组质粒pMAL/gldB的大肠杆菌经IP...
【中文期刊】 陈永胜 刘长江 等 《生物技术》 2005年15卷1期 1-3页 ISTICCA
【摘要】 目的:表达及纯化甘油脱水酶γ亚基蛋白.方法:使用PCR及DNA重组技术,将甘油脱水酶γ亚基基因gldC重组到含麦芽糖结合蛋白(MBP)的融合蛋白表达载体pMAL-c2x中,在大肠杆菌中进行表达.结果:转化重组质粒pMAL/gldC的大肠杆菌...
【中文期刊】 邵敬伟 刘长江 等 《生物技术通讯》 2004年15卷1期 13-16页 ISTICCA
【摘要】 采用PCR方法从肺炎克雷伯氏杆菌基因组中分别扩增得到了编码依赖辅酶B12的甘油脱水酶α、β、γ三个亚基的基因gldA、gldB、gldC,将gldBC基因克隆至pSIM-T载体上,经测序正确后亚克隆至pGEX-4T-1载体中.将gldA进行...
【关键词】 肺炎克雷伯氏杆菌； 依赖辅酶B12的甘油脱水酶； pGEX-4T-1融合表达载体；
【中文期刊】 张根林 徐小琳 等 《石河子大学学报（自然科学版）》 2009年27卷2期 226-230页
【摘要】 以自主筛选的Klebsilla pneumoniae XJ-Li为甘油脱水酶酶源,研究了其催化反应特性和稳定性.结果表明,甘油脱水酶的最适催化反应温度和pH分别为40℃和8.0.温度在40℃以下,pH处于6.0～8.0之间时酶的稳定性较好....
【中文期刊】 曲荟锦 王凤寰 等 《北京化工大学学报（自然科学版）》 2007年34卷4期 421-424页
【摘要】 甘油脱水酶(GDHt)和1,3-丙二醇氧化还原酶(PDOR)是甘油歧化为1,3-丙二醇(1,3-PD)的两个关键酶.采用多顺反子重组和质粒共存两种策略,对来自克雷伯肺炎杆菌(Klebsiella pneumoniae)的两个关键酶进行共表达...
【关键词】 甘油脱水酶； 1,3-丙二醇氧化还原酶； 共表达；
【中文期刊】 郑艳 管艺飞 等 《食品科学》 2007年28卷3期 203-205页
【摘要】 以肺炎克雷伯氏菌As1.1736的基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到了目的基因(gldABC)并将该基因克隆到pMD19-T Simple载体,通过对该基因的序列分析,甘油脱水酶(gldABC)结构基因的全长为2816 bp,由三个独立...
【中文期刊】 张根林 李春 等 《石河子大学学报（自然科学版）》 2007年25卷1期 92-94页
【摘要】 甘油脱水酶是生物法合成1,3-丙二醇的关键限速酶,对1,3-丙二醇的合成速度和发酵终浓度具有重要的影响.本文通过实验研究了Klebsilla pneumoniae XJ-Li的基础产酶条件,结果表明:该菌株甘油脱水酶的合成与菌体的生长具有较...
【关键词】 甘油脱水酶； K.pneumonia XJ-Li； 产酶条件；
【中文期刊】 郑艳 管艺飞 等 《食品研究与开发》 2007年28卷2期 38-41页
【摘要】 以肺炎克雷伯氏菌Asl.1736的基因组DNA为模板,通过基因扩增仪(PCR)扩增得到了目的基因(gldABC)并将该基因克隆到pMD19-T Simple载体.通过对该基因的序列分析,甘油脱水酶(gldABC)结构基因的全长为2 816 ...
【关键词】 甘油脱水酶(gldABC)； 克隆； 1,3-丙二醇氧化还原酶(dhaT)；
【中文期刊】 邵敬伟 刘长江 《无锡轻工大学学报》 2004年23卷2期 27-30页
【摘要】 甘油脱水酶是1,3-丙二醇发酵过程中的重要限速酶,具有很好的工业应用前景.其中α亚基为甘油脱水酶的主要组成部分,该基因的正确克隆与分析对甘油脱水酶的正确表达起重要作用.作者采用PCR技术,从肺炎克雷伯氏杆菌A.S.1.1736基因组中扩增得...
【中文期刊】 陈宏文 王蔚 等 《广州食品工业科技》 2004年20卷3期 5-9页
【摘要】 有氧条件下,建立了克雷伯杆菌破碎方法及其生产1,3-丙二醇代谢途径中关键酶酶活测定方法.超声波细胞破碎优化条件为:超声频率30kHz,100%振幅,间歇频率0.6,超声时间12min.细胞抽提液中甘油脱氢酶、1,3-丙二醇氧化还原酶、甘油脱...
【关键词】 1,3-丙二醇； 甘油脱氢酶； 1,3-丙二醇氧化还原酶；
【中文期刊】 权国燕 方慧英 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷6期 75-80页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 甘油脱水酶是甘油转化3-羟基丙酸生物合成途径中的关键性限速酶,然而底物甘油的存在会抑制该酶的活性,从而引起3-羟基丙酸合成量的下降.因此解除底物甘油对甘油脱水酶活性的抑制作用,是提高生物合成3-羟基丙酸产量的方法之一.克隆来源于克雷伯氏菌(...
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