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【中文期刊】 徐君 张园海 等 《江苏大学学报(医学版)》 2011年21卷3期 224-228页ISTICCA
【摘要】 目的:构建乙型肝炎病毒(hepatitis B virus,HBV)基本核心启动子(base core promoter,BCP)区A1762T/G1764A双突变株的复制质粒.方法:以1.5拷贝HBV野生型全基因组序列质粒(pHBV1.5...
- 概要：
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【中文期刊】 周亚芹 张洪梅 等 《现代医学》 2009年37卷5期 321-324页ISTIC
【摘要】 目的 采用环状定点诱变技术将重组真核表达质粒pcDNA3.1-hTSHR中hTSHR cDNA序列上发生突变的单碱基诱变回正常的序列.方法 设计1对含预期突变的完全互补的诱变引物,以环状质粒为模板进行PCR扩增,得到带缺口的突变质粒,酶消化...
- 概要：
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【中文期刊】 邵晓婷 戴玉璇 等 《重庆医学》 2024年53卷8期 1121-1125,1131页MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 构建波形蛋白(vimentin)糖基化突变质粒并研究其对大鼠肾上腺嗜铬细胞(PC12细胞)分化的影响.方法 构建波形蛋白糖基化突变质粒,进行凝胶电泳并测序鉴定;采用空载质粒pcDNA3.1b(对照组)、波形蛋白质粒(Vim组)、波形蛋...
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【中文期刊】 王琴 林春霖 等 《吉林大学学报（医学版）》 2021年47卷3期 551-558页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:预测人肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)基因上的泛素化位点,并构建泛素化位点突变质粒,探讨突变质粒对人结直肠癌HCT116和SW480细胞中核因子κB(NF-κB)和激活蛋白1(AP-1)相对荧光素酶活性的影响.方法:采用UbP...
【关键词】 肿瘤坏死因子受体相关因子6；突变质粒构建；泛素化；
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【中文期刊】 何叶 潘林鑫 等 《安徽医科大学学报》 2019年54卷10期 1526-1531页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建脊椎骨骺发育不良蛋白(Sedlin)的缺失突变和点突变体质粒,检测其在细胞内的表达、定位及其与RB1蛋白的共定位情况,为后续研究蛋白质相互作用提供依据.方法 以Sedlin全长cDNA序列为模板,扩增目的基因序列,连接至表达载体,...
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【中文期刊】 赖扬帆 王鹏 等 《口腔疾病防治》 2021年29卷12期 801-808页ISTIC
【摘要】 目的 构建hit基因缺陷型变异链球菌株并验证其细胞周期调控的功能.方法 从变异链球菌株ATCC25175中提取基因组DNA,采用PCR扩增技术,将hit基因上下游片段克隆到pFW5质粒(壮观霉素抗性)上以构建重组质粒;利用该菌株天然遗传转化...
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【中文期刊】 卢岩岩 姚楠 等 《中国组织工程研究》 2018年22卷24期 3831-3836页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:自噬可以通过抑制凋亡来缓解膝骨关节炎,miR-140是否可以调节自噬关键基因丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶-失调51样激酶1(uncoordinated 51 like kinase-1,ULK1)基因未见报道.目的:探索miRNA-140对...
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【中文期刊】 苏敬阳 王蓉蓉 等 《中国医科大学学报》 2018年47卷2期 97-101页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 制备钙调蛋白(CaM)突变体CaME141G的融合蛋白质粒,并进行蛋白表达、提取纯化和活性鉴定.方法 利用定点突变技术将野生型CaM的第141个氨基酸E(GAG)突变为G(GGG),再将突变体质粒转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培...
- 概要：
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【中文期刊】 朱亮亮 韩卢 等 《安徽医科大学学报》 2016年51卷11期 1595-1599页ISTICPKUCA
【摘要】 目的：根据活化蛋白激酶C受体1( RACK1)的蛋白结构，构建其缺失突变体的真核表达质粒，研究RACK1缺失突变体在真核细胞内的表达及定位改变。方法根据RACK1蛋白的结构域特点，以 pcDNA3．1-RACK1-FLAG 为模板，构建真核...
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【中文期刊】 马旸 韩陈陈 等 《安徽医科大学学报》 2016年51卷10期 1547-1551页ISTICPKUCA
【摘要】 GRK2-S670A突变体导入pIRES-EGFP真核表达载体,为寻找GRK2磷酸化GPCR的位点提供研究基础.利用PCR定点突变试剂盒,获得pGEM-T-GRK2-S670A,用Sal Ⅰ/Apa Ⅰ分别对pGEM-T-GRK2-S670...
【关键词】 pIRES-EGFP-GRK2-S670A突变质粒；重组质粒；细胞转染；
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【中文期刊】 牛卫卫 白华 等 《中国抗生素杂志》 2013年38卷12期 942-946页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建过表达SOS阻遏蛋白编码基因lexA的大肠埃希菌菌株,研究SOS应答对恩诺沙星抗药性突变的影响,并建立SOS应答抑制剂筛选平台.方法 构建lexA重组表达质粒pET-22b(+)-lexA,转化大肠埃希菌BL21(DE3)构建重组...
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【中文期刊】 李立 石小云 等 《中国组织工程研究》 2013年2期 315-319页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:细胞周期末期促进复合物调节亚基Cdh1的活性受到磷酸化调节,磷酸化的Cdh1不能与细胞周期末期促进复合物结合,从而抑制细胞周期末期促进复合物的活性.目的:构建突变型Cdh1基因真核表达质粒及鉴定.方法:采用RT-PCR方法,从大鼠海马...
【关键词】 组织构建；组织构建细胞学实验；细胞周期末期促进复合物；
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【中文期刊】 顾卉 佟宇鑫 等 《中国医科大学学报》 2011年40卷11期 961-963,978页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建GST-LMO1融合蛋白表达载体,并在原核细胞大肠埃希菌(E.coli)中诱导表达.方法 以人胎脑文库为模板,用PCR方法法扩增出LMO1基因全长及各个截短突变体,通过BamH Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点分别将其定向插入pGEX-5...
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【中文期刊】 王桂玲 陈薇 等 《中国医科大学学报》 2011年40卷6期 484-486页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建GST-C/EBPa融合蛋白表达载体,并在大肠埃希茵(E.coli)中诱导表达.方法 以质粒pcDNA3.1-C/EBPa为模板,用PCR法扩增C/EBPα全长及各个截短片段,通过EcoRI和XhoI酶切位点将C/EBPα全长及各...
【关键词】 CCAAT增强子结合蛋白α；截短突变体；质粒；
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【中文期刊】 王峰 黄鹏 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷2期 156-162页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:制备和纯化重组人NAMPT和NAMPT(H247A)蛋白,并对其体外酶活性进行检测.方法:以pcDNA3.1-hnampt为模板,通过PCR扩增获得两端分别为BamH I和Nde I酶切位点的hnampt片断,将该片断与pET-11a...
【关键词】 磁共振波谱学；大肠杆菌；磷酸转移酶类/遗传学；
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【中文期刊】 黄鹏 孙红颖 等 《浙江大学学报（医学版）》 2011年40卷3期 297-303页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:优化稀有密码子提高重组肠毒素O的表达量.方法:将带His标签的肠毒素O成熟肽克隆至pET28a质粒上,采用PCR方法对15个稀有密码子进行突变,将突变后的重组质粒转化入大肠杆菌BL21(DE3),并进行蛋白表达及活性鉴定.结果:通过稀...
【关键词】 葡萄球菌,金黄色/免疫学；肠毒素类/免疫学；密码子；
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【中文期刊】 陈刚 糜祖煌 等 《中华医院感染学杂志》 2011年21卷21期 4426-4430页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 了解1株多药耐药肺炎克雷伯菌的遗传学背景.方法 采用聚合酶链反应(PCR)的方法分析1株多药耐药肺炎克雷伯菌可能存在的65种耐药相关基因:包括β-内酰胺类、氨基糖苷类、喹诺酮类耐药相关基因及可移动的遗传元件(整合子、转座子、接合性质粒...
【关键词】 多药耐药肺炎克雷伯菌；耐药相关基因；整合子；
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【中文期刊】 涂婉 赵虎 《复旦学报(医学版)》 2010年37卷2期 189-193页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 研究质粒传播和ampD基因突变两种机制对阴沟肠杆菌AmpC β-内酰胺酶由诱导型转变为组成型的影响作用和比率.方法 收集医院感染患者标本,将诱导型阴沟肠杆菌和其转变后的组成型阴沟肠杆菌分为一组.对每组细菌的质粒ampC基因和染色质am...
【关键词】 AmpC β-内酰胺酶；组成型；质粒传播；
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【中文期刊】 曹莹 王卫国 等 《南方医科大学学报》 2009年29卷4期 652-655页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 对人端粒酶RNA进行多位点的突变并构建该突变体的酵母三杂交诱饵质粒,且进行毒性检测.方法 根据人端粒酶RNA(hTR)序列及突,变位点设计引物,运用重叠延伸PCR法埘hTR基因的第41位、第80位及第102位碱基进行T→A突变,将突变...
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【中文期刊】 童忠春 倪龙兴 等 《华西口腔医学杂志》 2009年27卷4期 386-389页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 敲除变异链球菌中的luxS基因,构建luxS突变株,测试变异链球菌失去luxS基因后形成牙菌斑生物膜的能力.方法 把luxS基因敲除重组质粒转入变异链球菌UA159中,得到转化菌,在含有卡拉霉素的培养基中进行筛选,得到变异链球菌lux...
【关键词】 pMD-19TUKD质粒；变异链球菌UA159；luxS突变株；
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