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【中文期刊】 钟义军 吴晓玉 等 《微生物学通报》 2011年38卷6期 847-852页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用十二烷基硫酸钠和提高生长温度结合法、紫外线涂布平板法、冻融法、吖啶橙法和黄芩甙提取液消除法等方法消除洋葱伯克霍尔德菌T1828菌株质粒，探讨适合洋葱伯克霍尔德菌质粒消除的方法，并研究最佳质粒消除条件。结果表明十二烷基硫酸钠和提高生长温度...
【关键词】 洋葱伯克霍尔德菌T1828；质粒消除；质粒提取；
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【中文期刊】 万谦 曹健 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷2期 94-99页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将前人报道的乳酸菌质粒提取方法与大肠杆菌质粒提取方法相结合,对常用试剂盒质粒提取方法进行改进,建立了一种快速、安全、高效的乳酸菌质粒提取方法.提取过程中,溶菌酶最佳浓度为20mg/ml,最佳处理时间为30min,同时避免了毒性物质溴化乙锭的...
- 概要：
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【中文期刊】 庞浩 封毅 等 《微生物学通报》 2009年36卷5期 768-772页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 堆肥环境中高浓度腐殖酸的存在阻碍了对这个环境中的未培养微生物的宏基因组研究.我们提出了一个确实可行的提取堆肥环境DNA的方法,这个方法通过使用Sephadex G200+酸洗PVPP层析柱与电洗脱两步纯化的方法成功地纯化堆肥环境来源的DNA...
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【学位论文】 作者：万谦 导师：曹健 吴兴泉 河南工业大学 生物学 微生物（硕士） 2010年
【摘要】 乳酸菌(Lactic acid bacteria)大多是益生菌,是现阶段研究较多的一类工程菌株.由于食品工业中使用的乳酸菌一般被认为是安全的,因而研究与开发乳酸菌食品级载体-受体系统,探索重要基因在乳酸菌中的克隆表达,已成为乳酸菌分子生物学...
- 概要：
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【中文期刊】 于耀洋 赵佳 等 《中草药》 2019年50卷10期 2371-2376页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨南蛇藤提取物(COE)联合miR-302对人食管癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及对PI3K/Akt信号通路的调控作用.方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测人正常食管上皮细胞Het-1A及不同食管癌细胞株中miR-302表达...
- 概要：
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【中文期刊】 单纯 吴培 等 《中国微生态学杂志》 2019年31卷2期 164-166,170页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用重组酶聚合酶扩增(Recombinase Polymerase Amplification,RPA)技术检测结核分支杆菌.方法 采用Axxin T8-ISO扩增仪(TwistDX公司),反应温度设置为39℃,反应时间20 min....
- 概要：
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【中文期刊】 菅璐 黄映辉 等 《中国生物工程杂志》 2019年39卷7期 39-47页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用CRISPR/Cas9技术对K562细胞系JAK2基因进行编辑,构建JAK2基因敲除的K562细胞系.方法:使用CRISPR在线设计工具,针对JAK2基因设计sgRNA,构建Cas9-sgRNA共表达质粒.使用第二代慢病毒包装系统...
【关键词】 CRISPR/Cas9系统；JAK2基因；K562细胞；
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【中文期刊】 杨杰 郑晋南 等 《现代预防医学》 2019年46卷15期 2837-2841页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 利用CRISPR_Cas9基因编辑技术构建TGFBI敲除的Met-5A稳定细胞株,为进一步深入研究TGFBI低表达在人膜间皮细胞恶性转化过程中的功能角色提供技术支持.方法 根据CRISPR_Cas9靶点设计原则针对TGFBI基因第4号...
【关键词】 CRISPR/Cas9；TGFBI；Met-5A细胞；
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【中文期刊】 林军 胡海峰 等 《中国天然药物》 2011年09卷5期 380-384页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 目的:利用毕赤酵母表达具有生物活性的H1N1神经氨酸酶并从发酵提取物中筛选其新型抑制剂.方法:截短型H1N1神经氨酸酶编码基因被亚克隆进质粒pPICZαA中以构建重组质粒pPICZαA-NA,线性化的质粒pPICZαA-NA经电转化导入毕赤...
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【中文期刊】 尹中波 霍云龙 等 《中华肿瘤防治杂志》 2018年25卷14期 985-989页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 染色质重塑因子SNF5在肝细胞肝癌中的生物学功能仍有待深入研究,本研究检测SNF5在HepG2和Hep3B肝癌细胞系中的表达及亚细胞定位,并构建Flag-SNF5真核表达质粒.方法 提取HepG2和Hep3B两种肝癌细胞系的总蛋白,蛋...
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【中文期刊】 尹舒贤 赵月华 等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷7期 88-96页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:外源RNA导入细胞特异性上调或下调基因表达,目前外源RNA的制备方法主要有化学合成、体外转录、细胞提取.Alu DNA和Alu RNA是人基因组和转录组中最重要的成分,参与基因表达调节.建立工程菌制备基因工程人源Alu RNA (Al...
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【中文期刊】 申永铭 郭成瑾 等 《菌物学报》 2017年36卷10期 1383-1391页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 立枯丝核菌Rhizoctonia solani融合群3(anastomosis group 3,AG3)是引发马铃薯黑痣病的主要病原菌,严重威胁着马铃薯产业的发展.菌核是马铃薯黑痣病菌在土壤中的主要存活结构,是马铃薯黑痣病的初侵染源,其密度...
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【中文期刊】 程丽华 刘玉 等 《中华血液学杂志》 2017年38卷5期 427-431页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 应用CRISPR-Cas9基因编辑技术来实现同一染色体片段上的多个基因共缺失.方法 利用分子克隆技术构建能使小鼠染色体11B3上Aloxe3-Alox 12b-Alox8基因簇缺失的CRISPR-Cas9慢病毒质粒;通过转染HEK29...
【关键词】 CRISPR-Cas9；基因编辑；染色体大片段缺失；
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【中文期刊】 徐秀章 Sentot Santoso 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2016年36卷6期 458-462页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的：通过TA克隆和细胞转染技术建立稳定表达人CD36的转染细胞,并应用于CD36抗体检测。方法提取人血小板总RNA,逆转录为cDNA,经PCR扩增获得人血小板的CD36基因片段；TA克隆后转化TOP10 E. coli,蓝白斑筛选获得阳性...
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【中文期刊】 张雪 陈萍 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷4期 690-693页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:对木糖氧化产碱菌中亚硝酸盐还原酶基因(nir)进行克隆并表达,并测定酶的活力,探讨亚硝酸盐还原酶(NiR)对亚硝酸盐的降解特性.方法:提取木糖氧化产碱菌DNA,根据GenBank公布的nir基因序列设计引物,利用PCR技术扩增nir基...
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【中文期刊】 宋丽华 齐力 等 《吉林大学学报（医学版）》 2013年39卷4期 759-762,后插4页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建携带Hath1基因的真核表达载体并转染神经母细胞瘤细胞(SH-SY5Y),观察其在SH-SY5Y细胞中的表达.方法:从人全血中提取DNA,克隆Hath1基因,同时扩增绿色荧光蛋白(GFP) gfp基因；利用引物GFP-R和Hath...
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【中文期刊】 张红艳 王春玉 等 《吉林大学学报（医学版）》 2012年38卷2期 202-206页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.lmyc-HisA-Smad2/3/4真核表达质粒,证实融合蛋白在细胞内表达.方法:以pcDNA3.1-Smad2/3和pGEX2T-Smad4质粒为模板,设计特异性引物,PCR扩增Smad2/3/4全长编码基因,亚...
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【中文期刊】 李波清 张玉梅 等 《中国公共卫生》 2012年28卷3期 331-332页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建幽门螺杆菌热休克蛋白GroEL基因的真核表达载体pcDNA3.0-GroEL,为幽门螺杆菌的基因疫苗研制提供参考依据.方法 提取幽门螺杆菌基因组DNA,PCR扩增GroEL基因,克隆至pMD19-T载体,通过PCR、酶切及测序鉴定...
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【中文期刊】 沈涛 梁峰 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷2期 141-143页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建hCAP真核表达载体并检测融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法:提取工具细胞CV-1的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hCAP基因的cDNA全长,并将其克隆至pEGFP-C1表达载体中.进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定...
【关键词】 hCAP；Western blot；绿色荧光蛋白；
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【中文期刊】 张文帅 温恬 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷1期 91-93页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建禽流感病毒(H5N1)血凝素蛋白HA真核表达载体并表达其编码蛋白(转染293T细胞).方法:从江苏H5N1流感病毒毒株(A/Jiangsu/07-4(H5N1))提取病毒RNA,采用RT-PCR技术扩增HA全长基因,将其克隆至pM...
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