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【中文期刊】 吴立柱 郑海洲 等 《生物学通报》 2004年39卷10期 53-54页ISTICCA
【摘要】 碱裂解法是进行分子克隆实验中质粒DNA制备最为常用的方法.在实际实验操作过程中,对该实验方法进行了改进,改进的碱裂解法解除了所提质粒DNA中RNA污染及RNase的可能影响,快速提取法使阳性克隆的筛选更加迅速,快捷.两种方法的改进使实验更加...
- 概要：
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【中文期刊】 王晓玲 郭明飞 等 《医学理论与实践》 2024年37卷11期 1805-1807,1817页
【摘要】 目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112 蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体.方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112 个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pE...
- 概要：
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【中文期刊】 陈孟璋 何星垚 等 《广东药科大学学报》 2023年39卷5期 87-92页ISTICCA
【摘要】 目的 比较不同的定量方法和总DNA制备方法对实时定量PCR(real-time quantitative PCR,qPCR)测定治疗性HBV DNA疫苗工程菌的质粒拷贝数(plasmid copy number,PCN)的影响,为建立快速简...
- 概要：
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【中文期刊】 冯改丰 靳辉 等 《中南大学学报（医学版）》 2012年37卷3期 290-295页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:原核表达并纯化含β -淀粉样肽(β-amyloid peptide,Aβ)氨基段15肽(Aβ115)和删除c/el表位的截断型HBcAg的融合蛋白,观察其形成的病毒样颗粒,检测其免疫原性,为阿尔茨海默病(Alzheimer'sdise...
【关键词】 β-淀粉样肽(A β)；HBcAg；融合蛋白；
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【中文期刊】 李国辉 唐琦 等 《微生物学杂志》 2011年31卷4期 90-94页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过Primer Premier 5.0设计1对特异性引物,用于扩增家蚕核型多角体病毒囊膜蛋白GP64的部分DNA片段,对PCR扩增得到的DNA片段进行纯化,并对纯化后的双酶切DNA片段与经同样双酶切后的原核表达载体pET28a进行连接；对...
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【中文期刊】 张风荣 侯加法 《中国骨质疏松杂志》 2009年15卷7期 521-524页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 制备地高辛标记的禽OPG cRNA探针.方法 将目的片段重组到T载体中,构建chOPG/pGM-Teasy重组质粒,EcORI酶切鉴定并测序验证.分别用SalI和NcoI进行酶切得到线性化DNA模板,用Sp6和T7 RNA聚合酶体外转...
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【中文期刊】 莫永炎 刘亚伟 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年19卷2期 168-172页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为进一步研究人的一新蛋白--蛋白激酶C相关激酶1相关蛋白(AWP1)的结构、功能及与其相互作用的蛋白而进行GST-AWP融合蛋白表达载体的构建、原核表达、纯化及其抗体的制备.采用逆转录PCR(RT-PCR)法从人ECV304内皮细胞中扩增A...
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【中文期刊】 李红红 曹东升 等 《安徽医学》 2011年32卷12期 1993-1995页ISTIC
【摘要】 目的 利用基因工程技术构建的pcDNA31-VEGF121真核表达质粒,制备由12-烷基化壳聚糖包裹的纳米粒,并将其在体外对基因DNA的保护作用进行检验. 方法 采用碱裂解法白转化阳性细菌菌液中提取出pcDNA3.1-VEGF121真核表达...
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【中文期刊】 陈猛 熊蔚俐 等 《天津医科大学学报》 2010年16卷3期 392-394,409页ISTIC
【摘要】 目的:通过构建重组大鼠TSHα链原核表达系统及表达产物的纯化工作,获得重组GST-rrTSHα融合蛋白,以备作为免疫原制备抗大鼠TSHα链的抗体.方法:提取大鼠垂体组织总RNA,RT-PCR扩增大鼠TSHα链编码序列,构建pGEX-3X/T...
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【中文期刊】 胡大强 陈亮 等 《中国药师》 2009年12卷10期 1351-1353页ISTICCA
【摘要】 目的:为便于人干扰素γ功能研究,制备6His修饰的人干扰素γ.方法:采用一步反向PCR扩增编码人干扰素γ的cDNA序列,克隆到质粒pUC19,测序鉴定正确后构建于pQE80L表达质粒,BamHⅠ和HindⅢ双酶切,行1.2%琼脂糖凝胶电泳鉴...
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【中文期刊】 李素波 高红伟 等 《军事医学科学院院刊》 2009年33卷5期 424-426页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:利用基因免疫的方法制备抗人肝素酶抗体.方法:用本室构建的表达肝素酶全长质粒pcDNA3.1(+)-HPA为基因免疫载体,免疫6～8周龄雄性BALB/c小鼠,使得质粒上的目的基因在动物体内表达,诱导动物体对DNA编码的外源蛋白产生抗体而...
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【中文期刊】 于丽 张阳德 等 《中国现代医学杂志》 2009年19卷8期 1130-1133页ISTICCA
【摘要】 目的 制备壳聚糖-聚乙二醇纳米粒介导的survivin RNAi基因纳米复合物,并对其相关性质进行评价.方法 通过接枝共聚法制备出空白壳聚糖-聚乙二醇纳米粒;通过静电吸附作用连接基因质粒形成基因纳米复合物.并对基因纳米复合物的包封率进行测定...
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【中文期刊】 赵霏 慈彩虹 等 《西北民族大学学报（自然科学版）》 2011年32卷4期 57-62页
【摘要】 目的:通过构建重组腺相关病毒载体( rAAV)包装质粒pAAV- MAGEA3,制备以MAGE - A3基因片段为免疫原的重组AAV病毒载体,为基因疫苗的研究及其进一步肿瘤免疫治疗提供实验基础.方法:提取人胎盘组织总RNA,采用RT - P...
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【中文期刊】 严巧灵 陈剑清 等 《农业生物技术学报》 2010年18卷6期 1156-1162页
【摘要】 家蚕肌钙蛋白CⅢ(TnCⅢ)是肌钙蛋白C(TnC)的一种亚型结构,本研究利用大肠杆菌表达TnCⅢ融合蛋白,并制备其多克隆抗体.从本实验室的家蚕(Bombyx mori)蛹cDNA文库中搜索到1条编码家蚕肌钙蛋白CⅢ亚型的cDNA序列,将其命...
【关键词】 家蚕；肌钙蛋白CⅢ(TnCⅢ)；原核表达；
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【中文期刊】 黄鹤 甘一如 等 《天津大学学报(英文版)》 2002年8卷4期 231-234页
【摘要】 基于基因工程技术,用PCR法扩增出编码ICA69的cDNA片段,直接克隆到pSPORT 1质粒上,经DNA序列测定,插入到GST融合蛋白表达载体pGEX-2T,构成重组质粒p2T-ICA69,得到的表达产物GST-ICA69融合蛋白用间接E...
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【中文期刊】 左华丽 金春英 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷4期 454-455页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建对虾白斑综合症的极早期基因IE3的原核表达载体,制备纯化重组蛋白IE3.方法:以感染白斑综合症病毒的对虾心脏组织为模板,PCR法扩增极早期基因IE3基因的编码序列,并将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-2中,构建重组质粒pGEX...
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【中文期刊】 张平静 李忠明 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷4期 106-112页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 介绍了一种成本低、步骤少、简单易行的质粒纯化制检工艺.该工艺选择优势产生超螺旋质粒的大肠杆菌菌株以无蛋白质培养基进行发酵罐培养,采用碱裂解法,对质粒制备过程中所用的层析吸附材料、核酸结合溶液、去除内毒素等杂质的方法和浓缩等步骤进行了实用性改...
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【中文期刊】 何火聪 苏颖 等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2011年18卷1期 42-45页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:制备TAT-ASPP2融合蛋白,探讨其对人胶质瘤U-87MG细胞和U251细胞增殖的抑制作用.方法:设计TAT-ASPP2引物,应用IN-Fusion技术构建原核表达质粒pET-TAT-ASPP2,双酶切、DNA测序鉴定后转化大肠杆菌...
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【中文期刊】 郭妍 张阳德 等 《中国现代医学杂志》 2008年18卷22期 3358-3359,3362页ISTICCA
【摘要】 目的 构建一种治疗性的乙肝DNA疫苗并测定它的表达.方法 采用基于表位的疫苗设计方法 ,用化学合成的方法 制备该种分子.用适当的载体与目的 分子连接后,转入大肠肝菌宿主细胞扩增.纯化后的疫苗成品转入HEK293细胞中观察它的表达.结果 通过...
【关键词】 DNA疫苗；抗原决定簇；基于表位的疫苗的设计方法；
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【中文期刊】 杜琴 蔡嘉镜 等 《国际医药卫生导报》 2017年23卷13期 1998-2001,2025页
【摘要】 目的 构建PML-RAR o[融合基因相关重组表达质粒,在大肠埃希菌中表达可溶性蛋白并进行纯化.方法 利用聚合酶链反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)以PML-RAR α全长质粒为模板分别扩增出长度均为1 20...
【关键词】 PML-RARα融合基因；重组质粒；蛋白表达；
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