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【中文期刊】 白凤霞 娄世峰 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷1期 106-108页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建大肠杆菌·毕赤酵母表达载体Ppic9k-IL3-Linker-PE38KDEL.方法:用PCR的方法扩增所需要的目的片段IL3及PE38KDEL,再通过酶切和连接的方法定向克隆到载体Ppic9k-Linker中,得到融合基因Ppi...
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【中文期刊】 余果宇 张红芸 等 《动物学研究》 2010年31卷6期 565-569页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 Bm-TFF2,一种从大蹼铃蟾皮肤分泌物中分离得到的两栖类三叶因子,具有比人三叶因子更强的生物学活性.该研究以Bm-TFF2的cDNA为模板,利用PCR方法扩增Bm-TFF2基因,然后插到含有AOXl启动了和α-因子信号肽序列的表达载体pP...
- 概要：
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【中文期刊】 刘奔 钟民涛 等 《中国微生态学杂志》 2012年24卷2期 126-131页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过构建毕赤酵母表达载体将香菇菌C91-3凋亡相关蛋白24414在毕赤酵母GS115中进行表达,同时对表达产物进行鉴定.方法 从香菇菌C91-3菌丝体中提取总RNA,根据转录组测序结果,用3'-Full RACE、5'-Full ...
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【中文期刊】 吴蒙 刘宇鸽 等 《中国公共卫生》 2011年27卷1期 37-39页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆和表达H5N1型流感病毒血凝素(HA)基因和神经氨酸酶(NA)基因,为制备抗体和亚单位疫苗打基础.方法 采用PCR技术扩增H5N1型流感病毒H5A和N1A基因,克隆人含有醇氧化酶-1(AOX1)启动子和分泌信号肽序列的巴斯德毕赤酵...
- 概要：
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【中文期刊】 张云华 杨秀芬 等 《生物工程学报》 2011年27卷11期 1631-1636页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了实现激发子PebC1编码基因在毕赤酵母中的分泌表达,采用PCR方法从灰葡萄孢菌BC-4-2-2-1菌株中扩增获得激发子PebC1的编码序列,将其亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K中,以此片段构建了pPIC9K-pebC1重组表达质粒...
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【中文期刊】 李春丽 韩露 等 《生物工程学报》 2011年27卷8期 1158-1163页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据甜蛋白des-pGlu1-Brazzein的成熟区氨基酸序列,按照酵母密码子的偏好优化其编码序列,合成了4对末端具粘合位点的寡聚核苷酸序列,经连接、PCR扩增后得到了179 bp的des-pGlu1-Brazzein编码序列,插入到pP...
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【中文期刊】 李壮林 姚雪静 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷1期 24-28页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 人血管抑素包含了4个环饼状结构域(Kringle),是一个有效的血管生成抑制因子.采用PCR方法从人胚肝cDNA文库中扩增了人血管抑素Kringles 1-3的基因,重组于pPIC9K载体中,获得重组载体pPIC9K-K1-3,然后转化毕赤...
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【中文期刊】 蒋慧慧 李丰功 等 《中国生物工程杂志》 2011年31卷5期 60-68页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 启动子是基因表达调控的重要顺式元件,启动子功能的强弱对于目的基因的表达非常重要.为找到一个启动转录功能较好的启动子,以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因,在毕赤酵母中研究不同启动子对外源蛋白表达的影响.首先采用PCR扩增的方法克隆了酿酒酵母甘...
【关键词】 3-磷酸甘油脱氢酶基因启动子；pAOX1；pGAP；
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【中文期刊】 李洋 李晖 等 《中国生物工程杂志》 2010年30卷4期 54-59页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将萝卜磷脂氢谷胱甘肽过氧化物酶(RsPHGPx)基因插入到分泌表达载体pPIC9K中,转化巴斯德毕赤酵母GS115细胞,筛选具有G418抗性的单拷贝转化子.经过优化表达条件,RsPHGPx在1%甲醇、pH6.0、28℃条件下诱导60h后得到...
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【中文期刊】 李小波 王婷婷 等 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 2010年28卷5期 332-336页MEDLINEISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 构建家蝇抗菌肽(攻击素, attacin)成熟肽的重组表达质粒并转化巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115,诱导attacin表达.方法 PCR扩增家蝇抗菌肽attacin基因成熟肽编码区,克隆至酵母表达载体pPI...
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【中文期刊】 李栋 俞慧清 等 《生物工程学报》 2009年25卷11期 1711-1717页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了获得有活性的重组人白细胞介素21(rhIL-21),本研究建立了在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达rhIL-21的技术.首先,通过RT-PCR从人外周血淋巴细胞中扩增IL-21cDNA,克隆到酵母表达载体pPIC9K...
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【中文期刊】 刘玲玲 朱松 等 《微生物学报》 2009年49卷5期 597-602页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 [目的]β-葡萄糖苷酶可用于酶法生产龙胆低聚糖.为了给龙胆低聚糖的生产提供大量的酶来源,构建基因工程菌表达黑曲霉(CMI CC 324626)β-葡萄糖苷酶基因(bgl)并研究重组酶生产龙胆低聚糖的工艺条件.[方法]将bgl克隆到表达载体p...
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【中文期刊】 强慧妮 杨欣伟 等 《生物工程学报》 2009年25卷12期 1962-1968页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用RT-PCR技术从黑曲霉(EIM-6)中扩增得到去除信号肽的果胶裂解酶基因A,将其插入到毕赤酵母表达载体pPIC9k上,构建重组表达质粒pPIC9K-pelA,电击转化毕赤酵母GS115,得到了表达成功的工程菌株.用终浓度为1.5%的甲...
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【中文期刊】 张佳瑜 吴丹 等 《生物工程学报》 2009年25卷12期 1948-1954页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过PCR扩增软化芽孢杆菌α-CGT酶基因,将基因片段分别克隆到毕赤酵母表达载体pPIC9K和大肠杆菌-枯草杆菌穿梭载体pMA5中,分别转化毕赤酵母KM71和枯草杆菌WB600.结果表明,重组毕赤酵母发酵上清液中α-CGT酶活性仅0.2 U...
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【中文期刊】 刘海英 王娟 等 《微生物学通报》 2009年36卷3期 355-359页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 一株纤维素酶高产菌株经ITS序列鉴定并命名为长梗木霉SSL(Trichoderma longi-brachiatum,SSL).利用RT-PCR的方法从该菌株中克隆出内切-1-4-β-D-葡聚糖酶Ⅰ的基因(eg1),该基因全长1386 bp...
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【中文期刊】 刘延锋 曾洪梅 等 《生物工程学报》 2009年25卷3期 413-417页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 建立了在毕赤酵母(Pichia pastoris)中分泌表达PeaT1蛋白的技术.将来源于极细链格孢菌(Alternaria tenuissima)的基因peaT1亚克隆至酵母分泌型表达载体pPIC9K,构建了重组表达载体pPIC9K-pe...
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【中文期刊】 李巍 李秀锦 等 《生物工程学报》 2009年25卷10期 1470-1476页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为制备重组狐狸生长激素(fGH),采用RT-PCR方法,从银狐垂体中扩增fOH cDNA基因,利用SnaB Ⅰ和Not Ⅰ位点将fGH基因插入到酵母分泌型表达载体pPIC9K中α-因子信号肽的下游,构建成fGH基因的酵母分泌型表达载体pPI...
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【中文期刊】 王书全 李明 等 《中国生物制品学杂志》 2011年24卷2期 173-175,178页ISTICCSCDCABP
【摘要】 目的 在毕赤酵母中表达杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)(ADM),并检测其抗菌活性.方法 根据毕赤酵母(Pichia pastoris)偏爱密码子,合成杂合抗菌肽CA(1-11)CD(12-37)ME(1-18)...
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