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【中文期刊】 陈玮 鲍朗 等 《华西医科大学学报》 2002年33卷1期 35-39页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建分泌性表达结核分枝杆菌抗原蛋白ESAT-6的重组卡介苗.方法分别以卡介苗(BCG)和结核分枝杆菌H37Rv株基因组DNA为模板,通过PCR扩增得到约117bp的BC Gα抗原(α-Ag)信号肽序列和285bp的结核杆菌esat-6基...
【关键词】 结核分枝杆菌；ESAT-6；重组穿梭质粒PCR扩增；
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【中文期刊】 刘海涛 孙晓文 等 《上海医学》 2004年27卷5期 309-311页ISTICCA
【摘要】 目的构建分泌性表达白介素(IL)-2的重组卡介苗(BCG).方法分别以BCG和IL-2 cDNA为模板,通过PCR扩增得到约117 bp的BCG抗原85B(BCG-Ag85B)信号肽序列和399 bp的IL-2基因序列.将BCG-Ag85B...
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【中文期刊】 周晓燕 冯永堂 等 《潍坊医学院学报》 2006年28卷5期 321-323,Ⅰ页
【摘要】 目的 构建分泌性表达IFN-α2a的卡介苗重组质粒.方法 分别以卡介苗(BCG)和IFN-α2a cDNA为模板,通过PCR扩增得到约117bp的BCG-Ag85B信号肽序列和495bp的IFN-α2a基因序列.将BCG-Ag85B信号肽序...
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【学位论文】 作者：刘春雨 导师：马腾骧 天津医科大学 临床医学 泌尿外科学（博士） 2003年
【摘要】 该课题采用基因工程技术,将GFPcDNA利用穿梭质粒作为载体转导到BCG中,使其表达GFP蛋白,以用于对BCG的作用过程、机制以及最后命运的探讨.表达GFP重组BCG在探讨BCG的作用过程方面与电镜或荧火体标记等方法相比有以下优点:(a)不...
- 概要：
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【中文期刊】 刘强 顾金金 等 《南方医科大学学报》 2013年33卷2期 202-206页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建稳定表达成熟miRNA-30a和miRNA-30e腺病毒表达载体.方法 小鼠基因组中分别扩增出带有酶切位点的mmu-miR-30a、mmu-miR-30e目的基因,目的基因连接到穿梭质粒pSES-HUS,带有目的基因的穿梭质粒重组...
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【中文期刊】 周建民 王勤章 等 《临床与实验病理学杂志》 2012年28卷1期 33-37页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建含有人干细胞白血病(stem cell leukemia,SCL)基因的重组腺病毒载体,并观察其对豚鼠膀胱Cajal样间质细胞的转染及其介导SCL基因的表达.方法 采用PCR方法从含人SCL基因质粒中扩增SCL基因,连接到腺病毒穿...
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【中文期刊】 史静 胡晶 等 《南方医科大学学报》 2011年31卷11期 1806-1811页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建表达SH2-DED融合基因的新型重组腺病毒Ad5F35-SD-EGFP,观察其对K562细胞增殖的抑制作用.方法 重叠PCR扩增SH2-DED融合基因并克隆至腺病毒穿梭载体pAdTrack-CMV中,构建成穿梭质粒pAdT-SD-...
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【中文期刊】 朱佑明 罗永艾 等 《中国人兽共患病学报》 2011年27卷4期 303-306页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建和鉴定铜绿假单胞菌重组双歧杆菌(rBb)-OprF疫苗.方法 以铜绿假单胞菌PAOl标准株提取总RNA为模板,自行设计引物,RT-PCR扩增获得OprF抗原编码基因,经酶切、连接定向克隆入大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-...
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【中文期刊】 娄小丽 黄英 等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷4期 579-581页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:制备能够表达大鼠血清淀粉样物质P(Serum amyloid P component,SAP)的重组腺病毒.方法:采用RT-PCR扩增的方法获取大鼠SAP,并将该基因采用定向克隆的方法克隆进入穿梭质粒pAdTraee-TO4中,进一步...
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【中文期刊】 李丙蓉 郑宏庭 等 《重庆医科大学学报》 2010年35卷11期 1676-1680页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建含有人脂联素基因apM1的重组腺病毒载体,制备能表达人脂联素蛋白的重组腺病毒,为脂联素用于体内外干预动脉粥样硬化奠定基础.方法:自质粒pGEM-T-apM1上扩增两端带有Sal Ⅰ和Hind Ⅲ酶切位点的全长apM1基因,将PCR...
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【中文期刊】 张灵霞 吴雪琼 等 《实用医学杂志》 2009年25卷4期 517-520页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:获得结核分枝杆菌esat6-卡介苗重组疫苗.方法:通过基因工程重组技术将结核分枝杆菌保护性抗原esat6的编码基因与穿梭质粒载体pYUB295重组,通过电穿孔技术导入卡介苗中,应用PCR扩增、PAGE电泳鉴定重组卡介苗.结果:通过PC...
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【中文期刊】 曹海霞 诸琦 等 《实用医学杂志》 2009年25卷2期 174-176页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:克隆人类真核翻译延长因子1A2(EEF1A2)基因全长.构建其重组腺病毒载体.方法:应用RT-PCR方法从人胰腺癌组织中扩增人EEF21A2基因全长,经T-A克隆后,亚克隆到腺病毒穿梭质粒pDC316,构建穿梭质粒pDC316-EEF...
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【中文期刊】 周必英 陈雅棠 等 《中国人兽共患病学报》 2009年25卷6期 502-506页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建和鉴定细粒棘球绦虫(Eg)重组双歧杆菌(Bb)-Eg95-EgA31融合基因疫苗.方法 自行设计引物,从细粒棘球蚴包囊中分离原头节,超声粉碎后提取总RNA为模板,通过RT-PCR分别扩增Eg95和EgA31抗原编码基因,然后采用基...
【关键词】 细粒棘球绦虫；重组Bb-Eg95-EgA31融合基因疫苗；构建；
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【中文期刊】 贺鹏 段莉 《东南大学学报（医学版）》 2016年35卷1期 6-10页ISTICCA
【摘要】 目的:构建稳定表达成熟miRNA-140腺病毒表达载体.方法:从人类基因组中扩增出带有酶切位点的miRNA-140目的基因,将目的基因连接到穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP,进一步将带有目的基因的穿梭质粒重组到骨架质粒AdEasy,...
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【中文期刊】 何春耒 刘午阳 等 《中华临床医师杂志（电子版）》 2012年6卷2期 338-341页ISTICCA
【摘要】 目的 探讨构建携带人血管内皮细胞生长因子(hVEGF)的重组腺病毒载体,为进一步的基因转染构建组织工程骨的血管化提供实验基础.方法 采用RT-PCR扩增的方法获得人源性的hVEGF165,并克隆入穿梭质粒pAdTraek CMV.构建的质粒...
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【中文期刊】 黄庆娟 朱惠明 等 《海南医学》 2012年23卷5期 1-5页ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带有凋亡素(Apoptin、VP3)、内皮抑素(Endostatin)双基因的重组腺病毒载体,为其在肿瘤治疗的应用研究打下基础.方法 将VP3基因和Endostatin基因克隆入腺病毒穿梭质粒pDC316中,将该穿梭质粒与腺病毒...
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【中文期刊】 张怡堃 王华 等 《中国医药生物技术》 2012年07卷1期 20-25页ISTIC
【摘要】 目的 制备携带miR29c的重组腺病毒Ad5F 11 p-miR29c,评价miR29c对骨髓瘤细胞凋亡的影响.方法 巢式PCR扩增得到hsa-miR29c,将hsa-miR29c基因克隆到腺病毒穿梭质粒pShuttle-CMV,得到pSh...
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【中文期刊】 谢楚海 吴波以 等 《广东医学》 2012年33卷5期 583-586页ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带凋亡抑制蛋白Livinα和绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒pAd-Livinα.方法 PCR扩增Livinα基因片段,克隆至穿梭质粒pAdTrack-CMV中,再与骨架质粒pAdEasy-1在大肠杆菌BJ5183中同源重...
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【中文期刊】 高军 范亚川 等 《西南国防医药》 2011年21卷10期 1045-1048页ISTICCA
【摘要】 目的 包装负载人miR-29a前体全长cDNA(pre-miR-29a)的复制缺陷型腺病毒载体(Ad-miR29a).方法 将pre-miR-29a全基因合成后,插入腺病毒穿梭质粒pDC315,与腺病毒包装质粒pBHGloxDeltaE1、...
【关键词】 微小RNAs；hsa-miR-29a；人胚肾293细胞；
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【中文期刊】 王慧 张迪 等 《江苏大学学报(医学版)》 2011年21卷3期 241-244,248页ISTICCA
【摘要】 目的:应用基因重组技术,构建表达chemerin基因的重组腺病毒载体.方法:经PCR方法扩增得到chemerin基因,将其插入到带有绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)基因的穿梭载体pShuttle-I...
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