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【中文期刊】 马建荣 余永红 等 《生物学杂志》 2011年28卷5期 60-64,69页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 采用PCR的方法对AGAP(anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽)的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影响的氨基酸作为linker...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王莲哲 张现青 等 《农业科学与技术(英文版)》 2009年10卷2期 49-53页
【摘要】 [Objective] The research aimed to study the secreted expression of S-adenosyl-L-methionine synthetase (SAMS) in Pichia p...
【关键词】 SAM；Pichia pastoris；pPIC9K；
- 概要：
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【中文期刊】 张红绪 张怡 等 《中国药房》 2009年20卷22期 1707-1709页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建Exendin-4基因真核表达裁体,并在巴斯德毕赤酵母GS115中进行表达,为大量获得Exendin-4奠定基础.方法:采用重叠聚合酶链反应法扩增出Exendin-4的完整序列,将其亚克隆到表达载体pPIC9K上,得到重组质粒pP...
- 概要：
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【中文期刊】 王强 彭开松 等 《生物学杂志》 2011年28卷2期 43-46页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用RT-PCR技术,从鸡肺脏总RNA中克隆了Gal-2 eDNA全序列,以克隆载体为模板PCR扩增Gal-2成熟肽eDNA,将成熟肽eDNA插入到分泌型表达载体pPIC9k中,构建pPIC9k-Gal-2成熟肽表达载体;通过电转化方法将表...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王俊 沈微 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷2期 14-18页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用重叠PCR技术拼接PTH和HSA基因,并将构建好的融合基因插入到载体pUC19测序后插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOX Ⅰ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白PTH-HSA.重组质粒pPIC9K/PTH-HSA经Sal ...
【关键词】 人甲状旁腺激素；融合蛋白；表达载体pPIC9K；
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【中文期刊】 孟亚鹏 徐敏 等 《四川动物》 2006年25卷1期 68-71页ISTICPKU
【摘要】 将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中, 经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子.菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上.对重组酵母进行诱导表达, SDS-PAGE和Weste...
【关键词】 草鱼；生长激素基因；pPIC9K表达载体；
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【中文期刊】 姜丽华 卢海蓉 等 《生物工程学报》 2006年22卷6期 1036-1039页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 PBD-1是猪防御系统起重要作用的抗菌小肽,为实现其在毕赤酵母中的表达,根据已发表的猪β防御素1(PBD-1)氨基酸序列和酵母偏好密码子,用PCR方法获得PBD-1基因,克隆到分泌型表达载体pPIC9K信号序列α因子之后,构建重组表达质粒p...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 郭建强 李运敏 等 《生物工程学报》 2006年22卷2期 237-242页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用PCR方法扩增来源于极端嗜热厌氧古菌Pyrococcus furiosus中的超耐热酸性α-淀粉酶的结构基因,将该结构基因引入载体pPIC9K中,将重组质粒pPIC9K-Amy转化大肠杆菌DH5α细胞,测序结果表明,克隆到的α-淀粉酶结构...
- 概要：
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【中文期刊】 刘煜 吴国祥 等 《中国药科大学学报》 2003年34卷6期 577-581页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF165蛋白.方法:自人肿瘤组织中获取人VEGF165 cDNA,构建pPIC9K酵母表达载体,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白.结果:SDS-PAGE及Western-blot结...
【关键词】 血管内皮生长因子165；巴氏毕赤酵母；pPIC9K酵母表达载体；
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【中文期刊】 郑育声 谢琪璇 等 《第三军医大学学报》 2002年24卷6期 716-718页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的用基因工程技术克隆人巨细胞病毒(Human cytomegalovirus,HCMV)中抗原性较强的蛋白片段-gp52C末端和pp150C末端的DNA序列,插入pPIC9K质粒,构建适于酵母表达系统的重组表达质粒.方法根据人巨细胞病毒糖...
- 概要：
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【中文期刊】 陈晓丽 潘善培 等 《暨南大学学报（自然科学版）》 2000年21卷5期 116-121页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:为用基因重组技术表达hCG避孕疫苗抗原,构建在酵母细胞中表达的重组质粒βhCG-pPIC9K, 转化嗜甲醇酵母. 方法:根据βhCG的cDNA 序列设计两条引物,使上游带EcoR I酶切位点,下游带Not I酶切位点,以质粒βhCG-...
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【中文期刊】 王跃华 张青云 《山西医科大学学报》 2005年36卷6期 677-680页ISTICCA
【摘要】 目的克隆细胞因子midkine (MK)基因,并转化甲醇酵母Pichia pastoris.方法利用RT-PCR方法从人胃癌MGC803细胞总RNA中扩增MK cDNA,构建分泌表达载体pPic9k-MK,然后转入宿主菌GS115中,提取G...
【关键词】 midkine；Pichia pastoris；pPic9k；
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【中文期刊】 吴永和 王桂玉 等 《中国计划生育学杂志》 2005年13卷7期 409-413页ISTIC
【摘要】 目的:在毕赤酵母表达系统中获得巨噬细胞抑制因子(MIC-1)高效分泌表达,并鉴定其免疫活性.方法:从BeWo细胞系中提取总RNA,通过反转录PCR获得目的片段,然后将基因亚克隆人pPIC9k表达载体,线性化后转化GS115酵母细胞,经G41...
【关键词】 巨噬细胞抑制因子(MIC-1)；毕赤酵母表达系统；pPIC9k质粒；
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【中文期刊】 戴文建 彭淑平 等 《湖南师范大学学报（医学版）》 2005年2卷1期 18-23页ISTIC
【摘要】 目的:利用PCR技术从含有目的基因的质粒pGEX-4T-1-VBMDMP获得带有SnabⅠ和NotⅠ酶切位点并融合有GST的目的基因片段并测序鉴定,将PCR产物纯化、酶切、回收,克隆到pPIC9K载体,转化入大肠杆菌DH5a扩增,用琼脂糖凝...
【关键词】 肿瘤；血管基膜衍生多功能肽；毕赤酵母GS115；
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【中文期刊】 范建华 赵建阳 等 《同济大学学报(医学版)》 2004年25卷1期 11-14页ISTIC
【摘要】 目的采用基因工程方法构建基因工程菌制备人EGFR配体结合区蛋白.方法自人肿瘤细胞SK中获取人EGFR cDNA,构建pPIC9K酵母表达载体,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白.结果 SDS-PAGE及Western-blot结果...
【关键词】 表皮生长因子受体；巴氏毕赤酵母；pPIC9K酵母表达载体；
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【中文期刊】 韩雅莉 林非凡 等 《广东工业大学学报》 2017年34卷1期 19-23页
【摘要】 采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins, TFP) cDNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒pP...
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【中文期刊】 林红梅 方长旬 等 《福建农林大学学报（自然科学版）》 2016年45卷5期 561-566页
【摘要】 以水稻根系cDNA为模板,PCR扩增含His标签的Lsi1基因开放阅读框,并将该基因克隆到巴斯德毕赤酵母表达载体pPIC9k中,PCR及测序验证重组质粒pPIC9k-Lsi1目的基因序列.将验证正确的重组质粒pPIC9k-Lsi1通过Sac...
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【中文期刊】 刘旻 《中国食品工业》 2014年5期 58-60页
【摘要】 葡萄糖氧化酶(GOD)被广泛应用于食品工业、医学诊断试剂等[1,3].目前葡萄糖氧化酶生产主要采用的发酵体系,大多数属于胞内表达存在生产成本偏高,且产出蛋白有杂质使产品纯度不够高等问题[2].因此,如何构建优良的GOD产生菌株,并让它有效的...
【关键词】 GOD；SDS-PAGE；pPIC9K-His-GOD；
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【中文期刊】 朱井玲 汪海燕 等 《石河子大学学报（自然科学版）》 2014年32卷6期 710-714页
【摘要】 为构建Neuritin毕赤酵母分泌表达系统,进一步得到高纯度的具有天然活性的Neuritin蛋白提供实验基础.采用人工合成去除信号肽的neuritin基因并在N端引入His标签序列,两端引入EcoR Ⅰ和Not Ⅰ酶切位点,克隆至pPIC9...
- 概要：
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【中文期刊】 徐立群 王皓 等 《食品科学》 2013年34卷9期 224-227页
【摘要】 用PCR方法以Ⅵ型胶原蛋白基因组DNA为模板,获得Ⅵ型胶原蛋白a2链基因,并将该基因插入到表达载体pPIC9K,对重组质粒pPIC9K-COL6A2所含的目的片段进行双向测序.将测序正确的重组质粒用限制性内切酶Sal线性化,经电击转化到毕赤...
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