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            【中文期刊】 王俊  沈微  等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷2期 14-18页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用重叠PCR技术拼接PTH和HSA基因,并将构建好的融合基因插入到载体pUC19测序后插入表达载体pPIC9K中,在启动子AOX Ⅰ和α交配因子信号肽的作用下,分泌表达融合蛋白PTH-HSA.重组质粒pPIC9K/PTH-HSA经Sal ...

            【关键词】 人甲状旁腺激素融合蛋白表达载体pPIC9K

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            【中文期刊】 孟亚鹏  徐敏  等 《四川动物》 2006年25卷1期 68-71页ISTICPKU

            【摘要】 将草鱼生长激素基因(cGH)的cDNA亚克隆到酵母表达载体pPIC9K中, 经电击转化导入毕赤巴斯德酵母GS115菌株,获得转化子.菌落PCR技术筛选证实cGH已经整合到了酵母染色体上.对重组酵母进行诱导表达, SDS-PAGE和Weste...

            【关键词】 草鱼生长激素基因pPIC9K表达载体

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            【中文期刊】 刘煜  吴国祥  等 《中国药科大学学报》 2003年34卷6期 577-581页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:采用基因工程方法构建基因工程菌制备人VEGF165蛋白.方法:自人肿瘤组织中获取人VEGF165 cDNA,构建pPIC9K酵母表达载体,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白.结果:SDS-PAGE及Western-blot结...

            【关键词】 血管内皮生长因子165巴氏毕赤酵母pPIC9K酵母表达载体

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            【中文期刊】 范建华  赵建阳  等 《同济大学学报(医学版)》 2004年25卷1期 11-14页ISTIC

            【摘要】 目的采用基因工程方法构建基因工程菌制备人EGFR配体结合区蛋白.方法自人肿瘤细胞SK中获取人EGFR cDNA,构建pPIC9K酵母表达载体,采用Pichia酵母真核表达系统表达目的蛋白.结果 SDS-PAGE及Western-blot结果...

            【关键词】 表皮生长因子受体巴氏毕赤酵母pPIC9K酵母表达载体

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            【中文期刊】 韩雅莉  林非凡  等 《广东工业大学学报》 2017年34卷1期 19-23页

            【摘要】 采用PCR技术,以含有TFP(Tenebrio Fibrinolyric Proteins, TFP) cDNA质粒作为模板,扩增出TFP基因片段.将克隆获得的目的基因插入到毕赤酵母表达载体pPIC9K中,经测序无误后,获得重组表达质粒pP...

            【关键词】 黄粉虫纤溶酶基因

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            【中文期刊】 孟志刚  张锐  等 《西北农业学报》 2005年14卷4期 166-170页

            【摘要】 为了解决酵母发酵时贫氧限制目的蛋白表达量,利用透明颤菌血红蛋白基因vgb设计毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K-vgb,并以人乳铁蛋白基因为目的基因转入毕赤酵母GS115.研究结果表明,该表达载体具有转化操作简单、后期工程菌筛选简便、菌体耐...

            【关键词】 透明颤菌血红蛋白基因vgb毕赤酵母表达载体pPIC9K

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            【中文期刊】 白凤霞  娄世峰  《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷1期 106-108页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建大肠杆菌·毕赤酵母表达载体Ppic9k-IL3-Linker-PE38KDEL.方法:用PCR的方法扩增所需要的目的片段IL3及PE38KDEL,再通过酶切和连接的方法定向克隆到载体Ppic9k-Linker中,得到融合基因Ppi...

            【关键词】 融合基因IL3PE38KDEL

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            【学位论文】 作者:时纪元 导师:李兆申   许国铭   第二军医大学   临床医学 内科学(消化系病)(博士) 2007年

            【摘要】 目的: 人工合成SHH蛋白N末端基因的Pichia酵母表达,制备多克隆抗体。 方法: 构建人工合成SHH蛋白N末端基因的Pichia酵母表达载体,获得酵母表达株,甲醇诱导表达目的蛋白,免疫Balb/c小鼠制备多...

            【关键词】 Hedgehog信号通路人工合成SHH蛋白N末端基因

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            【学位论文】 作者:唐键 导师:谢琪璇   暨南大学   生物学 发育生物学(硕士) 2004年

            【摘要】 透明带(ZP)是哺乳类动物卵细胞膜外包被的一层特殊的非细胞结构,是精子与卵细胞识别和结合的部位。人卵透明带蛋白ZP3是精卵识别和结合过程中的初级精子受体,因而成为研究孕前型避孕疫苗的潜在靶抗原。体内自身透明带抗体的存在会导致卵巢功能紊乱.....

            【关键词】 人卵透明带ZP3蛋白载体pPIC9K

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            【中文期刊】 王岚  贾国超  《中国免疫学杂志》 2024年40卷7期 1501-1506页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:观察IGFBP-3抗原在不同真核细胞中的表达差异,筛选最优的IGFBP-3抗原进行IGFBP-3抗原诊断试剂盒开发的校准品性能分析.方法:将人IGFBP-3基因分别克隆至毕赤酵母表达载体pPIC9K及哺乳动物细胞表达载体pCMV中,分...

            【关键词】 IGFBP-3抗原真核表达校准品

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            【中文期刊】 盛彦敏  肖丽娟  等 《长春中医药大学学报》 2024年40卷12期 1342-1346页ISTIC

            【摘要】 目的 表达纯化人线粒体DNA聚合酶γ(Pol γ),并分析其活性,以应用于核苷(酸)类抗病毒药的毒副作用检测与筛选.方法 以质粒PCMV-SPORT6-POLG为模板,PCR扩增人线粒体DNA聚合酶γ基因(POLG),并克隆至pPIC9K载...

            【关键词】 人线粒体DNA聚合酶γGS115毕赤酵母表达纯化

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            【中文期刊】 蔡思泽  王斌  《现代食品科技》 2023年39卷3期 129-137页

            【摘要】 胶原蛋白在人体内有重要作用,并且在食品、保健品、医疗等方面有广泛应用.该研究针对毕赤酵母的密码子偏好性对人源Ⅲ型胶原蛋白基因进行了密码子优化,在此基础上构建了人源Ⅲ型胶原蛋白单串联、二串联和二串联四拷贝表达载体pPIC9K-COL3-S、p...

            【关键词】 胶原蛋白毕赤酵母重组表达

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            【中文期刊】 徐艳艳  廖志银  等 《浙江大学学报(理学版)》 2022年49卷6期 753-759页

            【摘要】 人溶菌酶(human lysozyme,hLYZ)是一种天然活性蛋白质,具有抗菌性,目前主要应用于食品添加剂、动物饲料、药物治疗领域.根据毕赤酵母表达偏爱密码子特点,通过优化hlyz基因密码子,人工合成目的基因,构建了分泌表达载体pPIC9...

            【关键词】 人溶菌酶毕赤酵母密码子优化

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            【中文期刊】 于松尼  贾鹏飞  等 《农业生物技术学报》 2022年30卷7期 1385-1393页

            【摘要】 粉红聚端孢(Trichothecium roseum)是一种重要的菌寄生真菌,能够通过菌寄生作用抑制病原微生物的生长,可以有效防治多种植物病原真菌.几丁质酶(chitinase,chi)在粉红聚端孢寄生和抑菌过程中发挥重要作用,本研究旨在实...

            【关键词】 粉红聚端孢几丁质酶Trchi2毕赤酵母

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            【中文期刊】 韩秀娥  秦兰霞  等 《中国食品学报》 2022年22卷4期 76-82页

            【摘要】 为确定玉米谷氨酰胺转氨酶基因在毕赤酵母中的最佳诱导表达条件,将构建好的重组表达载体pPIC9K-TGZ经Sac I线性化处理,电转入巴斯德毕赤酵母GS115,利用抗生素Zeocin筛选阳性克隆,聚合酶链式反应扩增验证,甲醇诱导表达.通过正交...

            【关键词】 玉米谷氨酰胺转氨酶毕赤酵母

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            【中文期刊】 马建荣  余永红  等 《生物学杂志》 2011年28卷5期 60-64,69页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 采用PCR的方法对AGAP(anti-cancer analgesic peptide,抗癌镇痛肽)的N端进行了基因改造,保留了Kex2初步切割信号序列,去除了Ste13的切割序列,加入了对蝎毒蛋白抗癌镇痛活性无影响的氨基酸作为linker...

            【关键词】 pPIC9K毕赤酵母构建

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            【中文期刊】 王强  彭开松  等 《生物学杂志》 2011年28卷2期 43-46页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用RT-PCR技术,从鸡肺脏总RNA中克隆了Gal-2 eDNA全序列,以克隆载体为模板PCR扩增Gal-2成熟肽eDNA,将成熟肽eDNA插入到分泌型表达载体pPIC9k中,构建pPIC9k-Gal-2成熟肽表达载体;通过电转化方法将表...

            【关键词】 β-防御素Gal-2pPIC9k

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            【中文期刊】 李忠清  王亮  《生物技术通报》 2011年6期 145-149页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 利用巴斯德毕赤酵母系统表达抗菌肽牛乳铁蛋白肽衍生肽简称LfcinBD,获得的表达产物具有较强的抗菌活性.将人工设计的用化学合成法合成的以酵母偏爱密码子编码的LfcinBD基因片段克隆到巴斯德毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,获得的重组质...

            【关键词】 牛乳铁蛋白肽衍生肽(LfcinBD)毕赤酵母表达系统抗菌活性

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            【中文期刊】 杨湘越  张惠菊  等 《医学研究生学报》 2011年24卷9期 908-912页ISTICPKU

            【摘要】 目的 人自身抗原U1RNP 70K通常采用组织提取法或原核表达获得.文中用基因克隆技术,在毕赤酵母中表达人U1RNP 70K自身抗原,并建立斑点免疫金渗滤检测法.方法 PCR扩增U1RNP 70K基因,与酵母表达载体pPIC9k重组,构建表...

            【关键词】 自身抗原U1RNP 70K克隆

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            【中文期刊】 胡廷章  肖国生  等 《生物技术通报》 2011年2期 146-150,183页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 将番茄脂氧合酶基因TomloxD克隆至酵母表达载体pPIC9K中,转化毕赤酵母GS115菌株,构建组成型表达T0mloxD的酵母工程菌株.SDS-PAGE和western blot分析表明,经甲醇诱导,TomloxD蛋白在酵母中得到表达,表...

            【关键词】 脂氧合酶番茄脂氧合酶活性

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