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【中文期刊】 刘芙蓉 李彦姝 等 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2011年20卷3期 271-274页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 构建SCG10真核表达载体并证实融合蛋白在细胞内表达及定位.方法 以人胎脑cDNA文库为模板,PCR扩增SCG10全长编码基因,亚克隆至pEGFP-C1表达载体中.将构建的重组质粒测序并转染到人胚肾HEK293中,提取细胞蛋白进行We...
【关键词】 SCG10； Western blot； 质粒构建；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 赵善成 胡水君 等 《中国血液流变学杂志》 2011年21卷2期 199-202,243页 ISTICCA
【摘要】 目的 β3GnT2和β3GnT8的克隆及真核表达载体的构建.方法 RT-PCR法检测β3GnT2、β3GnT8在胃癌、胶质瘤、乳腺癌三类癌细胞株中的表达;PCR扩增带酶切位点β3GnT2、β3GnT8全长编码片段并构建真核表达载体pEGFP...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 马玲 卢晓梅 等 《解剖科学进展》 2011年17卷2期 121-123页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建pHIF-1α/EGFP-C2真核细胞表达质粒载体.方法 缺氧培养与化学性缺氧两种方法诱导A498人肾癌细胞中HIF-α mRNA水平升高.RT-PCR法扩增HIF-1α的cDNA片段,经T-A克隆扩增后,连接入pEGFP-C2质...
- 概要：
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【中文期刊】 潘小霞 张顺 等 《中国医药生物技术》 2011年06卷4期 241-245页 ISTIC
【摘要】 目的 构建增强型绿色荧光蛋白(EGFP)与轮状病毒(RV)VP6基因融合表达载体,研究融合蛋白表达及在细胞中的分布.方法 提取A组人RV TB-Chen株VP6基因,用PCR扩增VP6编码cDNA片段.将此基因片段与真核表达载体pEGFP-...
- 概要：
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【中文期刊】 陈杰 陈苏芳 等 《南华大学学报（医学版）》 2010年38卷1期 34-37页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建人乳头瘤病毒16型E2(HPV16 E2)及其N端(TAD)、C端(DBD)删除突变体与增强型绿色荧光蛋白(GFP)融合蛋白的真核表达载体,观察其在Hela细胞中的表达与定位. 方法 HPV16 E2基因经PCR扩增后,与pMD-...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 张平 刘斌 等 《广州医学院学报》 2010年38卷6期 1-5页 ISTIC
【摘要】 目的:探讨重组人转化生长因子(TGF)-β1荧光质粒的构建及经脂质体转染软骨细胞的表达情况.方法:体外酶消化分离法培养兔关节软骨细胞并采用特异性细胞外基质Ⅱ型胶原免疫细胞染色进行鉴定.双酶切法切取TGF-β1的cDNA片段,通过T4 DNA...
- 概要：
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【中文期刊】 赵晶 田晓丰 等 《中国实验诊断学》 2010年14卷12期 1906-1910页 ISTIC
【摘要】 目的 构建含有EGFP及Ad5.EIA基因的重组真核表达载体pEGFP-E1A,研究其在体外对肝癌细胞的裂解作用.方法 对pUC119-E1A质粒双酶切获得E1A基因,定向克隆带EGFP和neo筛选标记的真核表达载体到pEGFP-C1载体中...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周琳华 郑文岭 等 《医学分子生物学杂志》 2010年07卷4期 296-299页 ISTICCA
【摘要】 目的 克隆扩增APC11开放阅读框基因片段,构建其真核表达重组质粒,为后续研究其功能做准备.方法 按照GenBank中人APC11序列设计引物,以HeLa细胞cDNA为模板,扩增出基因片段.该片段与真核表达载体pEGFP-C1连接,得到的重...
【关键词】 APC11基因； 基因表达与构建； pEGFP-C1载体；
- 概要：
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【中文期刊】 岳丽玲 樊丽 等 《世界华人消化杂志》 2009年17卷31期 3210-3213页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建增强型绿色荧光蛋白为报告基因的pEGFP-C1-FUT3真核表达载体,分析其在细胞系MDA-MB-231中的表达.方法:采用RT-PCR扩增FUT3全长基因片段,克隆至pMD18-T载体进行测序分析,将FUT3亚克隆至pEGFP-...
【关键词】 α 1； 3-岩藻糖基转移酶Ⅲ； 增强型绿色荧光蛋白；
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【中文期刊】 黄波 田大力 等 《现代肿瘤医学》 2009年17卷3期 393-397页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建ABCE1基因的pEGFP重组表达载体pEGFP-C1-ABCE1,并将其转染至小细胞肺癌细胞(NCI-H446),观察其表达,并检测转染前后细胞增殖情况.方法:RT-PCR扩增ABCE1基因cDNA,酶切后和携带绿色荧光蛋白报告...
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【中文期刊】 《南华大学学报（医学版）》 2009年37卷5期 525-527页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建携带融合型microRNA(微小RNA)基因miR-335的荧光真核表达质粒pEGFP-C1-miR-335,并观察其在乳腺癌细胞MDA-MB-231中的表达.为研究小RNA基因表达调控机制建立实验基础. 方法 应用基因重组技术,...
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【中文期刊】 李雅林 白波 等 《中华临床免疫和变态反应杂志》 2009年3卷4期 259-262页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGEP)融合的人apelin受体(Apelin receptor,apelin-R)真核表达载体.方法 以质粒pcDNA3.1-hApe...
- 概要：
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【中文期刊】 刘强 贺志锐 等 《畜牧兽医学报》 2014年45卷4期 541-546页
【摘要】 旨在构建PLCζ真核表达载体,初步研究其在体细胞系中的表达特性.本研究用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,克隆至载体pEGFP-N1,鉴定无误后,将构建了重组质粒pEGFP-N1-PLCζ转染293T细胞和绵羊成纤维细胞,在倒置荧光显微镜和...
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【中文期刊】 陶晓莉 吕利英 等 《畜牧与兽医》 2013年45卷6期 36-39页
【摘要】 通过构建猪核转录因子C/EBPβ编码区真核表达体pEGFP-N1-C/EBPβ,将猪C/EBPβ异位表达于小鼠成肌细胞C2C12细胞中,为进一步研究C/EBPβ在猪脂肪发育中的调控机制奠定基础.本试验利用RT-PCR扩增C/EBPβ编码区序...
【关键词】 猪； C/EBPβ； pEGFP-N1-C/EBPβ；
- 概要：
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【中文期刊】 于德涵 赵文阁 等 《中国农学通报》 2011年27卷14期 17-21页
【摘要】 克隆岩栖蝮蛇(Gloydius saxatilis)纤维溶解酶(Fibrinolytic enzyme,FLE)基因,分析基因序列并对该基因的功能进行分析;构建真核表达载体并鉴定.从岩栖蝮蛇毒腺细胞中提取总RNA,通过RT-PCR法扩增纤溶...
- 概要：
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【中文期刊】 郭政 崔丽娟 等 《石河子大学学报（自然科学版）》 2011年29卷1期 54-58页
【摘要】 通过克隆DLL1-ICD(Delta-like1细胞内区域)的cDNA及测序鉴定,构建pEGFP-C1-DLL-ICD真核表达载体并进行细胞转染,为研究Notch信号通路与Neuritin的关系奠定基础.首先根据小鼠全长DLL1 cDNA序...
【关键词】 DLL1-ICD； 真核表达载体； 转染Notch信号通路；
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【中文期刊】 胡徐庞 李伟 等 《浙江理工大学学报》 2011年28卷5期 783-788页
【摘要】 获得Hsa-miR-1的方法主要由人工合成,需耗费很高的成本与时间.文章通过将Hsa-miR-1前体部分连接至pcDNA3.0,可实现Hsa-miR-1基因的高表达.构建含有Hsa-miR-1基因表达前体的表达载体pcDNA-Hsa-miR...
【关键词】 Hsa-miR-1载体； Taqman探针检测； pcDNA-Hsa-miR-1；
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【中文期刊】 刘伟 杨幼聪 等 《动物医学进展》 2010年31卷6期 26-30页
【摘要】 为研究分子伴侣Jiv90对猪瘟病毒复制的影响,克隆了分子伴侣Jiv90基因,构建了真核表达载体并在猪脐静脉血管内皮细胞中表达.根据牛的Jiv90基因序列和真核表达载体pEGFP-C1设计引物,经PCR扩增,成功克隆到猪Jiv90基因,回收后...
【关键词】 猪瘟病毒； 真核表达； 猪脐静脉血管内皮细胞；
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【中文期刊】 徐引弟 陈焕春 等 《河南农业科学》 2009年3期 99-102页
【摘要】 以伪狂犬病毒Ea株BamHⅠ5′片段为模板,PCR扩增出约0.6kb ORF-1基因完整编码区序列,将该基因克隆到pBluescriptⅡSK+中,构建重组载体pSKORF1.进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强型绿荧光蛋白...
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【中文期刊】 徐引弟 陈焕春 等 《中国畜牧兽医》 2009年36卷11期 57-60页
【摘要】 以伪狂犬病毒Ea株Bam H I 5'片段为模板,PCR扩增出约0.9 kb gK基因完整编码区片段,将该基因克隆到pBluescriptIISK+中,构建重组载体pSKgK.进一步将该片段插入真核表达载体pEGFP-C1的增强绿荧光蛋白E...
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【中文期刊】 余晓岚 肖少波 等 《畜牧市场》 2009年10期 21-23页
【摘要】 以牛疤疹病毒Ⅰ型(BHV-Ⅰ)国内地方分离株感染的细胞培养物制备PCR模板,扩增出大小约0.77kb的u149基因完整编码区片段,将扩增片段克隆到pMD18-T载体中,获得含u149基因的重组质粒pMD-VP22.采用双脱氧末端终止法进行序...
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【中文期刊】 王孝芸 皮爽 等 《泸州医学院学报》 2009年32卷1期 14-17页
【摘要】 目的构建携带信号转导子与转录活化子6(STAT6)基因的真核表达载体,为进一步研究STAT6转录因子在肺纤维化中的作用与作用机制提供基础.方法:以含有STAT6的基因文库为模板通过PCR反应扩增出该基因的全序列cDNA,并克隆到增强型绿色荧...
【关键词】 信号转导子与转录活化子6； 成纤维细胞； 真核表达载体；
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【中文期刊】 赵微 李久纯 等 《安徽农业科学》 2008年36卷35期 15364-15366页
【摘要】 [目的]了解猪CFL2b基因在成肌细胞中的表达与定位.[方法]用RT-PCR方法扩增得到猪CFL2b基因,连接到T载体上,双酶切后通过定向克隆将其与真核表达载体pEGFP-N1的绿色荧光蛋白基因融合,构建CFL2b-荧光蛋白融合基因表达载体...
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【中文期刊】 沈涛 李妍 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷3期 237-239页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建真核表达载体GFP-hArgBP2并检测在骨肉瘤细胞内的表达及定位.方法:以pcDNA3.1-hArgBP2为模板,利用PCR扩增hArgBP2基因cDNA全长,并将其克隆至真核表达载体pEGFP-C1中.进一步将构建的重组质粒进...
【关键词】 ArgBP2； Western blot； 免疫沉淀；
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【中文期刊】 沈涛 梁峰 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2012年28卷2期 141-143页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建hCAP真核表达载体并检测融合蛋白在细胞内的表达及定位.方法:提取工具细胞CV-1的mRNA,反转录为cDNA.PCR扩增hCAP基因的cDNA全长,并将其克隆至pEGFP-C1表达载体中.进一步将构建的重组载体进行酶切和测序鉴定...
【关键词】 hCAP； Western blot； 绿色荧光蛋白；
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【中文期刊】 胡计华 吴晓云 等 《解放军医学杂志》 2012年37卷4期 300-303页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建人转录辅助因子CITED2突变型(c.573-578del6)及野生型真核表达质粒并检测两种重组质粒CITED2蛋白的表达情况.方法 分别以健康儿童和CITED2基因突变的先天性心脏病患儿血细胞DNA为模板,PCR定向克隆扩增野生...
- 概要：
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【中文期刊】 张宇丝 马樱 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2011年27卷1期 109-111页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建带有绿色荧光蛋白(GFP)标签的汉滩病毒(HTNV)包膜糖蛋白(GP)真核表达载体,并进行初步表达鉴定.方法:以peGFP-C1质粒为模板扩增GFP片段,将其插人真核表达载体pFLAG-CMV3中,构建成可表达带有GFP标签分泌型...
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【中文期刊】 方道奎 袁建辉 等 《现代预防医学》 2011年38卷23期 4921-4923页 ISTICPKUCA
【摘要】 [目的]构建XRCC1基因的发卡样siRNA(small interfere RNA)真核表达载体,为建立XRCC1缺陷的细胞株,及进一步研究XRCC1的功能奠定基础. [方法]根据GenBank提供的XRCC1基因cDNA序列及软件构建发...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李鹏 马艳娇 等 《吉林大学学报（医学版）》 2011年37卷4期 582-586页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建pcDNA3.1(+)-CCNL1、pVAX Ⅰ -CCNL1和pEGFP-C1-CCNL1三组重组载体,鉴定其在MDA-MB-231细胞中的表达情况.方法:用PCR方法扩增得到CCNL-1基因,然后用EcoR Ⅰ、HindⅢ酶切...
【关键词】 乳腺肿瘤； 真核表达载体； 细胞周期调节蛋白—1；
- 概要：
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【中文期刊】 任海亮 孙学军 等 《中国肿瘤生物治疗杂志》 2011年18卷4期 434-436页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨过表达CDX2对结肠癌LoVo细胞裸鼠皮下移植瘤的抑制作用,为结肠癌生物治疗提供实验依据.方法:脂质体法介导pEGFP-C1-CDX2真核表达载体转染入结肠癌LoVo细胞,G418筛选出稳定表达CDX2的LoVo细胞(LoVo-C...
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