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【中文期刊】 苏慧敏 扈廷茂 等 《内蒙古大学学报(自然科学版)》 2003年34卷5期 506-509页
【摘要】 SRY是哺乳动物性别决定的重要基因,利用绵羊SRY基因序列设计PCR引物,对绵羊胚胎来源的成纤维细胞提取总DNA进行PCR扩增,鉴定6个不同胚胎来源的成纤维细胞的性别.结果表明,3个有扩增带为雄性,3个无扩增带为雌性,为核移植选取雄性或雌性...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 吴宪 荆乾鸽 等 《基因组学与应用生物学》 2019年38卷3期 1006-1011页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 抗生素常被用于对转基因动物、植物及微生物细胞进行筛选.在进行抗生素抗性筛选前,需要摸索合适的抗生素使用浓度,其原因在于:过低的筛选浓度无法抑制非转基因细胞的生长;反之,过高的筛选浓度会导致转基因细胞死亡.为了摸索绵羊皮肤成纤维细胞(shee...
- 概要：
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【中文期刊】 赵逸凡 张迎冰 等 《生物工程学报》 2023年39卷1期 204-216页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在利用单碱基编辑系统(single base editing system)实现欧拉藏绵羊成纤维细胞FecB和GDF9基因靶位点A到G和C到T的碱基替换并检测其编辑效率.首先设计合成靶向欧拉藏绵羊FecB和GDF9基因的sgRNA序...
- 概要：
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【中文期刊】 王媛媛 叶丽君 等 《农业生物技术学报》 2023年31卷8期 1555-1566页
【摘要】 布鲁氏菌病(Bruollosis)是对羊养殖业危害最严重的传染病之一,在山羊(Capra hircus)中,干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)基因调控区的突变对抵抗布鲁氏杆菌(Bruc...
【关键词】 CRISPR/Cas9；先导编辑(PE)；干扰素调节因子3(IRF3)；
- 概要：
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【中文期刊】 赵若琳 张成图 等 《中国畜牧杂志》 2023年59卷6期 274-277,283页
【摘要】 肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)基因突变时会导致肌纤维增粗,肌肉细胞增多,表现出双肌性状.为敲除欧拉藏绵羊MSTN基因以获得产肉性状更优的欧拉藏绵羊,利用胞嘧啶碱基编辑系统(CBE)在欧拉藏绵羊MSTN基因编码区提前引入终止密...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 任秀美奥 姚旭东 等 《中国畜牧兽医》 2022年49卷7期 2661-2668页
【摘要】 [目的]研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响.[方法]采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子,将绵羊卵丘-卵母细胞复合体(COCs)在培养箱中培养16～18 h获得成熟卵母细胞,从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞,...
- 概要：
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【中文期刊】 王小志 何惠宇 等 《中国组织工程研究》 2013年47期 8141-8148页ISTICPKUCA
【摘要】 背景：多项体内外实验表明外源性植入碱性成纤维细胞生长因子能明显促进骨形成过程，但外源性碱性成纤维细胞生长因子在体内易降解，影响疗效。目的：利用分子生物学技术将碱性成纤维细胞生长因子转染至骨髓间充质干细胞中，观察同种异体骨复合基因转染骨髓间充...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李海静 马友记 等 《生物技术通报》 2012年9期 94-98页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据绵羊Y-染色体的特异序列和常染色序列分别设计了确定公羊Y-染色体特异序列的3对特异性引物和内标基因的4对特异性引物.单重PCR扩增绵羊基因组DNA,筛选出了3对Y-染色体特异引物和3对羊DNA特异内标引物.将不同的绵羊Y-染色体特异引物...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 朱汇 张红琳 等 《生物技术通报》 2012年9期 74-79页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在研究高硫角蛋白基因启动子及相关调控序列的表达活性.以绵羊基因组为模板,克隆KAP1.3基因启动子序列,对其进行5个系列缺失片段pGL4.10表达载体构建,将不同重组质粒转染小鼠成纤维细胞,通过裂解细胞测定其荧光值方法来检测启动子的表达活...
- 概要：
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【中文期刊】 王玮 袁建龙 等 《生物技术通报》 2011年11期 140-145页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 旨在构建骨骼肌特异表达人卵泡抑制素( follistatin,Fs)基因载体并得到其稳定转染的蒙古绵羊胎儿成纤维细胞系,为后期通过体细胞核移植方法制作转FS基因克隆绵羊奠定基础.首先通过RT-PCR方法克隆得到人FS基因cDNA序列,然后与...
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【中文期刊】 杨娇馥 王志钢 等 《生物技术通报》 2010年11期 134-136,152页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 克隆细粒棘球蚴EG95基因cDNA并构建核酸疫苗pcDNA3.1-EG95.根据GenBank中细粒棘球蚴EG95基因序列(AF134378)设计引物并在上游引物起始密码子前加上Kozak序列(CCACC),提取细粒棘球蚴总RNA,RT-P...
- 概要：
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【中文期刊】 Chousheng Liu 白昌明 等 《生物工程学报》 2008年24卷7期 1268-1273页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)为饲养层,研究了用Knockout血清替代品(Knockout serum replacement,KSR)代替胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ES cell)培养液中的胎牛血清(FBS)...
【关键词】 绵羊类ES细胞；小鼠ES细胞条件培养基；knockout血清替代品；
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【学位论文】 作者：王子竹导师：安铁洙 东北林业大学 生物学 发育生物学（硕士） 2013年
【摘要】 蜘蛛丝是目前已知的一种集多种优良性能于一身的纤维，无论与其它天然材料还是人工合成的材料相比，蜘蛛丝都显示出了绝对的优势。但是由于蜘蛛的生活习性以及织网特点，无法通过人工进行大规模饲养繁殖，这些都给蜘蛛丝的大量获取造成了巨大困难。本研究通过绵...
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【学位论文】 作者：渠俊杰导师：安铁洙 东北林业大学 生物学 发育生物学（硕士） 2012年
【摘要】 近年来,iPS技术得到快速发展,主要的iPS诱导因子已克隆并相继建立相应动物(包括人)iPS诱导方法。然而,绵羊的iPS技术相对滞后,目前主要利用异源(小鼠)诱导因子获得绵羊的iPS。为了建立完善的绵羊iPS技术,本研究根据Oct4基因启动...
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【学位论文】 作者：孙丹导师：金梅 杜立新 辽宁师范大学 生物学 动物学（硕士） 2011年
【摘要】 肌肉生长抑制素(Myostatin,MSTN)又名GDF-8(转化生长因子),首次于1997年美国约翰霍普金斯大学医学院Mcpherron科研小组在研究TGF-β(转化生长因子超家族)时采用简并PCR法在该家族的保守区域扩增得以发现。该基因...
- 概要：
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【学位论文】 作者：姚雅馨导师：张勇 关伟军 甘肃农业大学 兽医学 临床兽医学（硕士） 2009年
【摘要】 体细胞核移入去核的卵母细胞后，必定要经过表观遗传修饰的重编程过程。对供体细胞进行不同的处理，会导致克隆胚胎重编程能力和程度的不同。本研究利用Trichostatin A（TSA）、Roscovitine（ROS）、血清饥饿和接触抑制等方法分...
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【学位论文】 作者：白昌明导师：王新庄 西北农林科技大学 西北农林科技大学 兽医学 临床兽医学（硕士） 2008年
【摘要】 绵羊ES细胞(embryonic stem cells，ES细胞)是制备乳腺生物反应器的理想候选细胞，然而至今仍没有成功建系的报道。昆白小鼠是我国科研工作中最常用的实验动物之一，但已经建立的小鼠ES细胞系大多来源于129、C57BL/6J和...
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【学位论文】 作者：张红琴导师：周欢敏 内蒙古农业大学 畜牧学 动物遗传育种与繁殖（硕士） 2007年
【摘要】 本研究的目的是以绵羊皮肤成纤维细胞为供体，绵羊卵母细胞为受体，生产克隆绵羊。建立了绵羊皮肤成纤维细胞系，比较了不同激活方法对绵羊卵母细胞的孤雌激活，并在此基础上较为深入研究了影响绵羊体细胞核移植过程的供体细胞所处状态、融合条件等各个环节。 ...
- 概要：
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【学位论文】 作者：杨丽导师：张涌 西北农林科技大学 西北农林科技大学 兽医学 临床兽医学（硕士） 2007年
【摘要】 本试验研究了山羊.绵羊异质体细胞克隆胚(以山羊胎儿成纤维细胞为核供体，以体外培养成熟的绵羊卵母细胞为核受体)的构建过程中促卵泡素(FSH)和发情牛血清(ECS)对绵羊卵母细胞体外成熟的影响以及电融合参数的确定；此外，在异质克隆胚早期发育的不...
- 概要：
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【学位论文】 作者：郭镇华导师：周欢敏 内蒙古农业大学 畜牧学 动物遗传育种与繁殖（硕士） 2005年
【摘要】 本研究构建了绵羊体细胞-绵羊卵母细胞重组胚、骆驼体细胞-绵羊卵母细胞重组胚和骆驼体细胞-牛卵母细胞重组胚三种重组胚，并研究了它们早期的发育情况。首先用不同的方法体外培养骆驼和绵羊皮肤成纤维细胞，作为核供体，然后体外成熟牛和绵羊的卵母细胞作为...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【外文期刊】 Hovey RC ; Davey HW ; 等 《Molecular and Cellular Endocrinology》 2001年181卷1/2期 47-56页SCISCIEMEDLINE
【外文期刊】 Weiler Andreas ; Unterhauser FrankN ; 等 《Journal of orthopaedic research》 2002年20卷2期 310-317页SCISCIEMEDLINE
【中文期刊】 王晶晶 杨涵羽璐 等 《中国畜牧兽医》 2019年46卷10期 2988-2997页
【摘要】 本研究旨在构建高甘氨酸—酪氨酸蛋白(HGTP)启动子荧光素酶报告基因载体并验证其活性,阐明HGTP基因在萨福克羊和中国美利奴羊皮肤毛囊组织中的表达差异与羊毛经济性状的关系.运用PCR方法扩增HGTP基因启动子序列片段,克隆至pGL3-Bas...
【关键词】 绵羊；高甘氨酸—酪氨酸蛋白(HGTP)；启动子；
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【中文期刊】 王利 金曙光 等 《生物技术》 2007年17卷3期 30-33页ISTICCA
【摘要】 目的:观察过量氟对绵羊肋软骨中BNP-2基因表达及分布的影响.方法:利用内蒙古内陆湖泊乌梁素海高氟水草龙须眼子菜作为饲料氟源,设计3个不同氟添加水平(50、100、150mg/kg)和1个对照组.2个月饲喂后屠宰,采用cRNA-mRNA原位...
- 概要：
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【中文期刊】 孙洪新 张英杰 等 《畜牧兽医学报》 2015年49卷9期 1540-1548页
【摘要】 本研究旨在克隆绵羊CYP19基因卵巢启动子序列片段,构建真核表达载体,并在细胞水平检测其组织特异性表达情况.参考已知序列设计特异性引物,PCR扩增绵羊CYP19基因卵巢启动子1.1和0.5 kb两个片段,并与已公布的序列进行同源性比较;将测...
- 概要：
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【中文期刊】 鲁玉荣 袁莉刚 等 《甘肃农业大学学报》 2015年50卷6期 12-17页
【摘要】 为了比较分析不同月龄藏绵羊羔羊睾丸leydig细胞发育特征,探索其发育特征与生精功能的关系.应用组织化学方法及电子显微镜技术,研究了1～6月龄羔羊睾丸leydig细胞增龄性变化特征.光镜观察结果表明:leydig细胞及其周围间质组织结构随月...
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【中文期刊】 李聪 曹文广 《中国畜牧兽医》 2015年42卷11期 2813-2821页
【摘要】 肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因突变可引起动物出现"双肌"性状,提高产肉性能.利用CRISPR/Cas9技术制备MSTN基因敲除的绵羊胎儿成纤维细胞,为制备MSTN基因敲除羊提供材料.设计构建4个靶向MSTN基因的CRIS...
【关键词】 CRISPR/Cas9系统；肌肉生长抑制素；基因敲除；
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- 方法：
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【中文期刊】 靳木子 吴慧 等 《畜牧与兽医》 2015年47卷11期 28-33页
【摘要】 蒙古绵羊体外受精的胚胎干细胞(SESC)一直未能成功建系,确定一种适合的培养体系及传代方法对其成功建系有着重要的意义.本研究将获得的体外受精胚胎直接培养,以胎鼠成纤维细胞为饲养层,运用机械传代法传代,采用培养液Ⅰ和培养液Ⅱ两种不同的培养液培...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 刘强 贺志锐 等 《畜牧兽医学报》 2014年45卷4期 541-546页
【摘要】 旨在构建PLCζ真核表达载体,初步研究其在体细胞系中的表达特性.本研究用PCR技术扩增出PLCζ基因片段,克隆至载体pEGFP-N1,鉴定无误后,将构建了重组质粒pEGFP-N1-PLCζ转染293T细胞和绵羊成纤维细胞,在倒置荧光显微镜和...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 韩琳 张继瑜 等 《江苏农业科学》 2012年40卷8期 30-31,87页
【摘要】 以846 bp的牛双芽巴贝斯虫兰州株潜在药物靶标pGEM-T-rap-1质粒为模板,选择真核表达载体GFP,构建真核表达质粒.采用脂质体转染法,将质粒转染绵羊成纤维细胞,通过G418筛选,筛选阳性克隆.结果显示牛双芽巴贝斯虫rap-1蛋白在...
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