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            【中文期刊】 陈建国  韩跃武  《国际检验医学杂志》 2014年24期 3297-3299,3303页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建 BAG-1、Bcl-2双靶区反义 RNA 重组载体 pVITRO2-AsBAG-1-Bcl-2及单表达重组载体 pVITRO2-As-BAG-1和 pVITRO2-AsBcl-2,并初步研究它们对人胃癌细胞株 SGC-7901增...

            【关键词】 反义 RNA细胞增殖重组载体

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            【中文期刊】 彭承宏  马迪  等 《组织工程与重建外科杂志》 2013年9卷2期 85-88页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建含hTERT基因的慢病毒重组载体,进行病毒包装并检测hTERT在293T细胞中的表达.方法 PCR扩增hTERT,插入慢病毒载体,并与包装质粒转染293T细胞,进行病毒包装,并测定其滴度.Western-Blot检测慢病毒液感染2...

            【关键词】 人端粒酶逆转录酶慢病毒重组载体

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            【中文期刊】 魏庆宽  肖婷  等 《中国临床新医学》 2013年6卷3期 191-195页ISTIC

            【摘要】 目的 探讨通过体外扩增乙肝表面抗原(HBsAg)基因,构建真核表达载体pcDNA3-HBsAg-ROP2的可行性.方法 根据乙肝S基因序列及pcDNA3-p30-ROP2酶切位点等情况设计、合成引物,应用聚合酶链反应(PCR)技术,扩增HB...

            【关键词】 乙肝表面抗原(HBsAg)弓形虫棒状体分泌抗原2(ROP2)

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            【中文期刊】 田坤  钱桂生  等 《中华肺部疾病杂志(电子版)》 2012年5卷6期 497-504页ISTIC

            【摘要】 目的 探讨重组表达载体pcDNA3.1(+)-CD40L在肿瘤细胞中的表达状况.方法 将两种不同构型的pcDNA3.1(+)-CD40L重组载体以脂质体法分别转染于H446、H460 及SK-hepⅠ细胞株,对三种转染细胞用PE标记的抗CD...

            【关键词】 CD40L,人重组载体pcDNA3.1(+)-CD40L细胞株,肿瘤

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            【中文期刊】 罗祎敏  王淑敏  等 《中南医学科学杂志》 2011年39卷6期 643-645页ISTICCA

            【摘要】 目的 从健康人的外周静脉血中获得人类基因组DNA,扩增出抗菌肽LL-37的全长基因,插入原核表达载体pQE-30以获得重组表达载体pQE-30/LL-37. 方法 用Nal法从健康人外周静脉血中提取人类基因组DNA,然后以它为模板PCR扩增...

            【关键词】 人类基因组DNALL-37重组载体

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            【中文期刊】 张国桥  陈宏  等 《肿瘤预防与治疗》 2011年24卷1期 4-8页ISTIC

            【摘要】 目的:构建含线粒体编码的细胞色素氧化酶亚单位I基因并使其转染入PoSK-Hep1细胞,并对其构建的载体的生物学行为及表达进行观察及检测.方法:应用真核表达载体Pmito-RFP质粒构建含线粒体编码的细胞色素C氧化酶亚单位I,将表达载体PCO...

            【关键词】 重组载体Pmito-RFP-CO I构建线粒体的功能

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            【中文期刊】 刘卫卫  白欣立  等 《脑与神经疾病杂志》 2010年18卷6期 405-407页ISTICCA

            【摘要】 目的 以空肠弯曲菌( CJ)细胞扩张毒素(cytolethal distending toxi , CDT) cdtA、cdtB及cdtC为目的基因,构建CJ-cdtA、cdtB及cdtC基因的真核表达重组载体pcDNA3.1(+)-cdt...

            【关键词】 空肠弯曲菌cdtA、cdtB及cdtC真核表达重组载体

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            【中文期刊】 魏亚红  郝建忠  等 《牙体牙髓牙周病学杂志》 2009年19卷6期 338-341,367页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建釉成熟蛋白真核表达载体peDNA3.1-Amelotin,并观察其在293T细胞中的表达情况.方法:以出生后6d的昆明小鼠下颌磨牙中提取的总RNA为模板,设计合成特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠的釉成熟蛋白[Amelotin...

            【关键词】 釉成熟蛋白重组真核表达载体pcDNA3.1磷酸钙法转染

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            【中文期刊】 李晖  田德英  等 《中西医结合肝病杂志》 2008年18卷4期 232-234页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建并鉴定包含人乙型肝炎病毒(HBV)HBcAg基因和PreS1(1~65)肽基因的真核重组载体.方法:采用PCR法扩增HBcAg基因,并通过基因突变在79~80位氨基酸处生成一个Nhe I酶切位点,然后将这段基因连接到真核表达载体p...

            【关键词】 乙型肝炎病毒(HBV)乙型肝炎病毒核心抗原(HBcAg)PreS1(1~65)肽基因

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            【中文期刊】 王桂兰  鲁继荣  《中国妇幼保健》 2007年22卷34期 4920-4922页ISTICCA

            【摘要】 目的:构建具有拮抗IL-4作用的IL-4变异体(IL-4RA)的真核表达载体,并通过真核细胞表达变异蛋白.方法:设计突变引物,从小鼠的PBMC细胞提取总RNA,RT-PCR方法扩增目的片断,将该片断构建在真核表达载体上,并在真核细胞BHK-...

            【关键词】 IL-4RA逆转录病毒载体逆转录聚合酶反应

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            【中文期刊】 司英健  张曦  等 《重庆医学》 2007年36卷10期 927-929页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的 构建间隙连接蛋白43(Cx43)和绿色荧光蛋白(GFP)双基因共表达重组腺病毒载体.方法 利用PCR方法从真核表达载体pcDNA3.0-Cx43扩增Cx43片断,利用DNA重组技术,将目的基因Cx43克隆至含有报告基因GFP的穿梭质粒...

            【关键词】 连接蛋白43绿色荧光蛋白同源重组

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            【中文期刊】 匡志鹏  谢裕安  等 《中国现代医学杂志》 2007年17卷9期 1059-1061页ISTIC

            【摘要】 目的 构建真核表达载体pcDNA3.1-mAFP,观察其在293肿瘤细胞中的表达情况.方法 从Hepa1-6 小鼠肝癌细胞中提取总RNA,设计特异性引物,通过RT-PCR法扩增小鼠甲胎蛋白(mAFP)基因编码区全长序列,测序确认后,插入到p...

            【关键词】 小鼠甲胎蛋白重组真核表达载体pcDNA3.1

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            【中文期刊】 刘志杰  张艳  等 《实用预防医学》 2007年14卷3期 625-628页ISTICCA

            【摘要】 目的 以幽门螺杆菌外膜脂蛋白Lpp20为目的基因,构建H.pylori Lpp2基因的真核表达重组载体pcD-NA3.1(+)-Lpp20,为H. Pylori核酸疫苗的研制奠定实验基础.方法 用Primer 5.0软件分析GenBank中...

            【关键词】 幽门螺杆菌Lpp20真核表达重组载体

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            【中文期刊】 刘新宇  梁东春  等 《天津医药》 2006年34卷12期 875-876,后插1页MEDLINEISTICCA

            【摘要】 目的:构建人甲状旁腺激素相关蛋白1-141(hPTHrP1-141)基因的表达载体.方法:提取人基因组DNA,PCR扩增PTHrP1-141基因,将其克隆人原核表达载体pQE-30Xa,构建重组表达载体pQE-30Xa/hPTHrP1-14...

            【关键词】 甲状旁腺激素相关蛋白质克隆,分子遗传载体

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            【中文期刊】 潘巍巍  赖国旗  等 《中国现代医学杂志》 2006年16卷21期 3201-3204页ISTIC

            【摘要】 目的 构建HPV16 E6/E7关键基因的原核载体pET-32(+)-E6/E7并将其转到大肠杆菌BL-21(DE3)中诱导表达,最后获得E6/E7基因表达产物.方法 用PCR方法从含有HPV16全基因序列的质粒中扩增E6/E7基因,将E6...

            【关键词】 人乳头瘤病毒HPV16E6/E7构建重组载体

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            【中文期刊】 《中国现代医学杂志》 2005年15卷19期 2948-2950,2955页ISTIC

            【摘要】 HIV疫苗研制的困难在于HIV病毒的高度遗传变异.根据已发现的10种亚型HIV-1型病毒研制的能激发CTL的新疫苗,已证实在临床上有了实际的应用效果.目前的疫苗研制策略包括质粒DNA载体,活重组载体和联合疫苗等.本文着重介绍这几种艾滋病疫苗...

            【关键词】 人类免疫缺陷病毒疫苗质粒DNA

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            【中文期刊】 唐晖  李弘剑  等 《广东药学院学报》 2005年21卷1期 60-63页ISTICCA

            【摘要】 目的构建人β地中海贫血突变基因β41/42及具有调控功能的基因座控制区(LCR)重组载体,为该病基因治疗的体外细胞模型和转基因小鼠模型的建立奠定基础.方法抽提β41/42纯合子患者的DNA,PCR扩增人β珠蛋白基因座控制区(LCR)和β41...

            【关键词】 地中海贫血巢式PCRβ41/42基因

            浏览:189 被引:0 下载:2
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            【中文期刊】 孙运祥  任丽君  等 《实用肿瘤学杂志》 2005年19卷4期 260-263页ISTICCA

            【摘要】 目的 构建含hIL-2的复制缺陷型重组腺病毒.方法将hIL-2 DNA片段与载体pDNR-Dual-CMV融合,转化大肠杆菌DH5α.得到重组质粒(pDNR-Dual-hIL-2),经鉴定正确,将pDNR-Dual-hIL-2质粒与pLP-...

            【关键词】 白细胞介素2腺病毒载体同源重组

            浏览:201 被引:3 下载:0
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            【中文期刊】 何才姑  郑文岭  等 《陕西医学杂志》 2005年34卷4期 387-389,411页ISTICCA

            【摘要】 目的:探讨克隆人自噬基因hAPG12,构建重组真核表达载体pEGFP-C2-hAPG12,为进一步研究hAPG12的功能奠定基础.方法:从正常人外周血单个核细胞中提取总RNA,采用两步法RT-PCR,首先把RNA逆转录为cDNA,而后通过一...

            【关键词】 基因 遗传载体 DNA,重组 @hAPG12

            浏览:159 被引:1 下载:0
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            【中文期刊】 李志刚  杨林  等 《热带医学杂志》 2005年5卷1期 19-21页ISTICCA

            【摘要】 目的构建包含人乙型肝炎病毒 (HBV)大分子表面蛋白基因的重组载体,以便进一步研究其基因免 疫以及对宿主细胞丝裂原活化蛋白激酶 (MAPK)p38等信号传导通路的影响.方法设计合成 2对寡核苷酸引物,以 adr亚型 HBV质粒 pHBV D...

            【关键词】 乙型肝炎病毒大分子表面蛋白重组载体

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            【中文期刊】 游捷  黄清玲  等 《福建医科大学学报》 2005年39卷2期 117-120页ISTIC

            【摘要】 目的构建晚期糖化终产物受体(RAGE)、核因子-κB(NF-κB)反义RNA单/双基因共表达载体.方法从人脐静脉内皮细胞ECV304中提取总RNA,RT-PCR扩增RAGE基因片段;从糖尿病人外周血单核细胞提取总RNA,RT-PCR扩增NF...

            【关键词】 RNA,反义基因表达调控糖基化终产物,高级

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            【中文期刊】 梁春敏  钟翠平  等 《解剖学报》 2004年35卷2期 147-151页ISTICCSCDCABP

            【摘要】 目的构建含小鼠次级淋巴组织趋化因子(SLC)cDNA的重组腺相关病毒载体. 方法以C57BL/6J小鼠的淋巴组织为材料抽提总RNA,用RT-PCR方法克隆小鼠SLC的成熟肽基因.PCR产物回收后经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切,插入pAAV-I...

            【关键词】 次级淋巴组织趋化因子RT-PCR载体

            浏览:120 被引:1 下载:0
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            【中文期刊】 吕海侠  刘勇  等 《中国现代医学杂志》 2002年12卷15期 8-10页ISTIC

            【摘要】 目的:构建并鉴定携带人NT-3基因的逆转录病毒载体以及稳定的包装细胞系.方法:用DNA重组技术将人NT-3定向克隆入逆转录病毒载体pLXSN,并用限制性内切酶进行酶切鉴定;磷酸钙转染方法将重组的逆转录病毒转染入包装细胞系PA317,G418...

            【关键词】 NT3逆转录病毒载体基因重组

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            【中文期刊】 廖智萍  郭永清  等 《医疗装备》 2015年14期 1-2页

            【摘要】 目的:构建 TSLP 基因的原核载体 pGEX -4T -1/TSLP 并将其转到大肠杆菌 BL -21(DE3)中诱导表达,最后获得基因表达产物。方法:用 PCR 方法从含有 TSLP 全基因序列中扩增目的基因,将 TSLP 基因连接到p...

            【关键词】 胸腺基质淋巴生成素 (TSLP)pGEX-4T-1/TSLP构建重组载体

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            【中文期刊】 伊静  李靖  等 《国外医学(医学地理分册)》 2015年36卷4期 274-277,283页CA

            【摘要】 目的 构建并鉴定大鼠转录因子Smad2的高表达载体(简称pLJM1-Smad2).方法 首先以E3大鼠肝脏cD-NA为模板、PCR法获取转录因子Smad2 mRNA CDS区(即目的基因片段);然后用AgeⅠ、EcoRⅠ双酶切pLJM1-M...

            【关键词】 转录因子Smad2高表达载体目的片段

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            【中文期刊】 李公奇  马春玲  等 《山东医学高等专科学校学报》 2014年36卷1期 31-33,封2页

            【摘要】 目的 构建密码子优化型gp120基因重组腺病毒载体(rAden-mgp120),为研发新型HIV预防性疫苗奠定基础.方法 首先利用PCR的方法扩增mgp120基因,将目的基因克隆入载体pENTR/D-TOPO以获得重组穿梭载体克隆pENTR...

            【关键词】 人类免疫缺陷病毒Ⅰ型gp120基因重组腺病毒载体

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            【中文期刊】 王美晨  王璇  等 《国外医学(医学地理分册)》 2014年3期 189-193页CA

            【摘要】 目的:利用 pmirGLO Dual-Luciferase miRNA Target Expression Vector(简称为pmirGLO 报告基因载体)构建并鉴定含 miR-497野生及突变结合位点的胰岛素受体 mRNA 3′UTR ...

            【关键词】 胰岛素受体 mRNA 3′UTR区pmirGLO 报告基因载体目的片段

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            【中文期刊】 张才成  陈静  等 《实验与检验医学》 2013年6期 521-523页CA

            【摘要】 目的:构建mTOR siRNA 重组表达载体,为探讨RNA干扰技术抑制巨噬细胞 mTOR 基因的相关研究奠定基础。方法设计具有短发夹结构的DNA序列,经退火成互补双链,再克隆至载体pGPU6/GFP/Neo中构建重组表达载体,转化DH5α菌...

            【关键词】 mTORRNA干扰重组表达载体

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            【中文期刊】 于永忠  郭雯  等 《黑龙江八一农垦大学学报》 2012年24卷4期 38-41页

            【摘要】 羊口疮(Orf)是由羊口疮病毒(ORFV)引起的人畜共患的一种急性、接触性和具有高度嗜上皮性传染病,主要感染绵羊、山羊和人。由于该病缺乏全身性感染症状,因此在防治上也缺乏有效的疫苗或抗体。RNA干扰技术是目前较为成熟的抑制目的基因表达生物技...

            【关键词】 羊口疮病毒DNA聚合酶shRNA片段

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            【中文期刊】 杨胜利  曾波  《现代医药卫生》 2010年26卷12期 1766-1767页

            【摘要】 目的:观察构建含人的肿瘤侵袭和转移的特异性抗原CD44v5编码基因的真核表达的重组载体,为进一步研究CD44v5修饰的DC融合瘤苗的免疫治疗作用及机制提供实验依据及理论基础.方法:以pcDNA3.1作为真核表达载体,选择CD44v5编码基因...

            【关键词】 CD44v5基因重组载体肿瘤

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