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            【中文期刊】 蔡林  陈雪  等 《临床皮肤科杂志》 2007年36卷2期 71-73页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨用PCR-限制性片段长度多态性(RFLP)分析法快速检测游泳池肉芽肿组织中海分枝杆菌.方法:对疑诊为游泳池肉芽肿患者5份皮损组织DNA进行PCR扩增,扩增产物分别用BstE Ⅱ和Hae Ⅲ两种限制性内切酶进行酶切,再用琼脂糖凝胶电...

            【关键词】 海分枝杆菌感染,皮肤PCR-限制性片段长度多态性分析

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            【中文期刊】 武敏  施秉银  等 《西安交通大学学报(医学版)》 2007年28卷2期 123-125页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 通过生物技术获得促甲状腺激素受体膜外区表达载体,为TSHR膜外区的研究提供有力工具.方法 从人甲状腺组织中提取总RNA,RT-PCR分离得到TSHR膜外区cDNA,双酶切后插入真核表达载体pcDNA3.1(+).结果 经酶切鉴定、测序...

            【关键词】 人TSHR膜外区RT-PCR真核表达载体

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            【中文期刊】 朱家馨  陈瑞  等 《中国微生态学杂志》 2006年18卷3期 174-175,178页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的扩增铜绿假单胞菌VIM-2型金属β-内酰胺酶基因,导入载体pMD18-T和pGEX-4T-1构建重组质粒pMD18-T/VIM-2和pGEX-4T-1/VIM-2.方法采用PCR技术从铜绿假单胞菌扩增VIM-2基因,先将其亚克隆入pMD...

            【关键词】 铜绿假单胞菌金属β-内酰胺VIM-2

            浏览:307 被引:1 下载:0
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            【中文期刊】 刘运喜  赵仲堂  等 《中国人兽共患病学报》 2006年22卷7期 624-628页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的探讨山东肾综合征出血热重疫区病人血清中HV分子生物学特征,同时寻找准确、简便、迅速的HV检测与分型方法,从而为制定防治决策提供科学根据.方法从山东肾综合征出血热重疫区临沂市费县收集病人早期血清,应用巢式RT-PCR对病人血清中的HV进行...

            【关键词】 HV巢式 RT-PCRRFLP

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            【中文期刊】 王锁英  许化溪  等 《南京医科大学学报(自然科学版)》 2006年26卷3期 184-188页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:构建小鼠Th1细胞特异性转录因子T-bet基因的腺相关病毒载体.方法:利用RT-PCR方法,从Balb/C小鼠脾细胞的mRNA中扩增T-bet基因全长cDNA,经测序证实后插入Pzac2.1质粒,用磷酸钙沉淀法,与pAddeltaF6...

            【关键词】 T-betRT-PCR基因克隆

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            【中文期刊】 李琳  张卓然  等 《中国微生态学杂志》 2006年18卷1期 49-52页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的建立PCR-CE-RFLP方法直接检测女性生殖道感染标本中的细菌,为临床提供快速、准确的诊断依据.方法利用细菌16S rRNA集保守性和变异性于一体的特点,合成1对通用引物,其上游5′端用5′-FAM标记.将8株已知菌和38例临床诊断为...

            【关键词】 16S rRNAPCR-毛细管电泳-限制性片断长度多态性原始标本

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            【中文期刊】 王琦光  郭志刚  等 《南方医科大学学报》 2006年26卷1期 42-45页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的检测112例冠心病患者ABCA1基因全部编码区的单核苷酸多态性(SNP).方法通过聚合酶链反应-单链构象多态性分析结合银染后胶回收、DNA测序和限制性内切酶酶切分析方法检测112例明确冠心病诊断患者的AB-CA1基因全部编码区50个外显...

            【关键词】 冠心病ABCA1单核苷酸多态性

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            【中文期刊】 杨玉艾  孙永科  等 《中国实验动物学报》 2006年14卷4期 241-245,彩插3页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的 利用PCR技术克隆了人类α-actin 基因的启动子(约450 bp).方法 将PCR产物连接到pMD-18T载体上,酶切鉴定后测序,并进行软件分析.结果与结论 序列分析表明,扩增片段虽然与GenBank里登陆的序列同源性仅为72%,...

            【关键词】 人类α-actin启动子PCR真核表达载体

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            【中文期刊】 张朝云  包怀恩  等 《中国寄生虫病防治杂志》 2005年18卷5期 330-332页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的用PCR-RFLP方法对rDNA-ITS1片段进行分析,以进一步明确云贵地区是否存在牛带绦虫亚洲亚种,并建立一种快速鉴定方法. 方法 取贵州都匀株(DY)、贵州从江株(CJ)、云南大理株(DL)带绦虫及台湾株(TW)成虫标本,剪取孕节,...

            【关键词】 牛带绦虫牛带绦虫亚洲亚种rDNA-ITS1

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            【中文期刊】 陈萍萍  张朝武  等 《中国公共卫生》 2004年20卷9期 1096-1098页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的对人谷胱甘肽硫转移酶M1真核表达系统的构建及序列分析.方法采用RT-PCR方法将肺组织中提取总RNA扩增人谷胱甘肽硫转移酶M1基因的cDNA序列,将其插入到真核表达载体pcDNA3.1多克隆位点中,构建重组表达质粒,并用PCR扩增、酶切...

            【关键词】 GSTM1RT-PCR克隆

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            【中文期刊】 姚龙泉  张西臣  等 《中国寄生虫病防治杂志》 2004年17卷6期 321-325页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的建立用巢式聚合酶链反应(Nested PCR)- 限制片段长度多态性(Restriction fragment length polymorphism,RFLP)检测、鉴别微小隐孢子虫(Cryptospordium parvum)和安氏...

            【关键词】 微小隐孢子虫安氏隐孢子虫SSU rRNA 基因

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            【中文期刊】 代丽萍  王凯娟  等 《中国人兽共患病杂志》 2004年20卷11期 947-950页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的为幽门螺杆菌(Helicobacter pylori, 简称Hp)的基因分型提供一种可选择的指标,并通过分型与空泡毒素(vacuolating cytotoxin gene A product, VacA)表达情况分析Hp vacA基因...

            【关键词】 幽门螺杆菌空泡毒素基因(vacA)PCR-RFLP分析

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            【中文期刊】 田中伟  宋向凤  等 《第三军医大学学报》 2004年26卷2期 125-127页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建人FHIT基因真核细胞表达载体.方法采用RT-PCR方法,从人新鲜甲状腺组织的总cDNA中扩增出456 bp的人FHITcDNA片段,然后用KpnⅠ和 BstX Ⅰ双酶切后定向克隆到真核细胞表达载体pcDNA3中,用限制性内切酶酶切...

            【关键词】 FHIT基因RT-PCR基因克隆

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            【中文期刊】 陈萍萍  张朝武  等 《郑州大学学报(医学版)》 2004年39卷5期 759-762页ISTICPKUCA

            【摘要】 目的:构建人谷胱甘肽硫转移酶M1 TV2(GST M1 TV2)基因真核表达载体并进行序列分析.方法:用RT-PCR技术从人肺脏组织总RNA中分离扩增人GST M1 TV2基因的cDNA序列,将其插入到真核表达载体pcD-NA3.1多克隆位...

            【关键词】 GST M1 TV2RT-PCR基因克隆

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            【中文期刊】 雷撼  钱桂生  等 《第三军医大学学报》 2003年25卷10期 921-922页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的合成人β防御素-2(Human β-defensin-2, hBD-2)基因并构建其真核表达载体,为hBD-2基因的转染和表达奠定基础.方法 根据GenBank中的hBD-2结构基因序列,设计合成了3条长度为82 bp的长寡聚核苷酸引物...

            【关键词】 人β防御素-2基因合成PCR延伸扩增方法

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            【中文期刊】 王昌源  陈雅棠  等 《中国寄生虫病防治杂志》 2003年16卷1期 38-42页ISTICPKUCSCD

            【摘要】 目的构建中国四川株多房棘球绦虫elp基因真核表达载体,为核酸疫苗研究奠定基础. 方法应用RT-PCR方法从多房棘球绦虫续绦期幼虫RNA获得elp基因的编码序列,定向克隆于pGEM-11zf(+).经酶切鉴定及测序后将目的基因亚克隆于真核表达...

            【关键词】 多房棘球绦虫elp基因真核表达

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            【中文期刊】 林祥华  陈志哲  等 《中国免疫学杂志》 2002年18卷8期 558-561页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:探讨序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)和聚合酶链反应限制性片段长度多态性分析(PCR-RFLP)对HLA-DRB、DPB1分型在异基因骨髓移植中应用的可行性.方法:应用19对不同的DRB抗原所对应等位基因序列特异性的引物,P...

            【关键词】 PCR-SSP RFLP 人白细胞抗原 基因分型 骨髓移植

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            【中文期刊】 张强  张春艳  等 《中山医科大学学报》 2002年23卷z1期 23-25页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 [目的]克隆人CD134L的cDNA,构建人CD134L的原核表达载体pGEX-4T-1/hCD134L,并进行序列分析.[方法]以EB病毒转化健康人外周血B淋巴细胞,从激活的EB病毒转化的B细胞中提取总RNA,采用RT-PCR方法扩增出人...

            【关键词】 hCD134LRT-PCRDNA序列分析

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            【中文期刊】 刘莉扬  马文丽  等 《西安医科大学学报》 2002年23卷3期 246-248,261页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的应用RD-PCR技术分离酵母基因.方法首先提取酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)总RNA,纯化mRNA;然后,反转录成双链cDNA;再用限制性内切酶Sau3AI酶切,在酶切片段上加上接头后,用通用引物U进行第一...

            【关键词】 RD-PCR酿酒酵母EST

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            【中文期刊】 温新宇  舒翠玲  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2002年18卷6期 533-535页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的克隆并表达人CD38抗原分子的胞外段基因. 方法采用RT-PCR法, 从高表达CD38抗原的Daudi细胞系中, 扩增CD38全长cDNA, 并将其插入pGEM-T载体中.重新设计引物,从重组pGEMT载体中,扩增CD38抗原分子的胞外...

            【关键词】 CD38RT-PCRcDNA克隆

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            【中文期刊】 郭培奋  钟梅  等 《第一军医大学学报》 2002年22卷4期 303-305页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的研究乙型肝炎(乙肝)病毒(HBV)分型在乙肝病毒宫内传播的特点.方法对广州市三家医院的135例HBsAg孕产妇及其139例新生儿外周血及部分婴儿随访标本,巢式PCR扩增HBV S区基因部分片段,限制性核酸内切酶酶切PCR产物,比较酶切片...

            【关键词】 肝炎病毒,乙型基因型宫内传播

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            【中文期刊】 曹虹  张文炳  等 《中国人兽共患病杂志》 2000年16卷6期 3-5页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的为研究人微小病毒B19在广东地区母婴及异常胎儿和新生儿中的感染状况。方法应用PCR方法检测700份孕妇外周血和新生儿脐血,PCR结合限制性内切酶分析以及原位杂交检测24份异常胎儿和新生儿组织。结果孕妇和胎儿血清中B19病毒的检出率分别为...

            【关键词】 人微小病毒B19母婴传播PCR

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            【中文期刊】 戴纪刚  魏泓  等 《第三军医大学学报》 2000年22卷1期 29-32页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:分析KM等3个封闭群小鼠线粒体DNA(mtDNA)的多态性,探讨实验小鼠的遗传监测方法.方法:PCR-RFLP技术,即PCR技术结合限制性内切酶片段长度多态分析(Restriction fragment length polymorp...

            【关键词】 封闭群小鼠mtDNAPCR-RFLP

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            【中文期刊】 成党校  钱桂生  等 《第三军医大学学报》 2000年22卷8期 807-809页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的构建单羧酸转运泵基因反义逆转录病毒真核表达载体.方法应用RT-PCR方法扩增带有双酶切位点的单羧酸转运泵目的基因片段,与带有相同酶切位点的pLXSN逆转录病毒真核表达载体粘末端进行反向基因插入连接,构建具有反义表达的逆转录病毒载体.结果...

            【关键词】 单羧酸转运泵基因RT-PCR反义载体构建

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            【中文期刊】 陈政良  卢晓  等 《细胞与分子免疫学杂志》 2000年16卷5期 417-419页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的获得人甘露聚糖结合凝集素(MBL)相关丝氨酸蛋白酶-1(MASP-1)基因.方法以人胎肝组织总RNA为模板,采用RT-PCR获取目的cDNA片段,克隆入pGEM-T载体,进行酶切图谱分析和测序鉴定.结果以RT-PCR方法获得了含信号顺序...

            【关键词】 甘露聚糖结合凝集素相关丝氨酸蛋白-1RT-PCRcDNA克隆

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            【中文期刊】 柯岩  安云庆  等 《中国免疫学杂志》 2000年16卷6期 312-314,317页ISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 目的:rBPI23基因(BPI600 bp)克隆与鉴定.方法:采用RT-PCR技术,从HL-60细胞mRNA中扩增编码BPI N端199个氨基酸(rBPI23)的基因片段(BPI600 bp),经酶切后通过连接反应构建重组克隆载体,测序鉴定...

            【关键词】 重组杀菌/渗透增强蛋白-23(rBPI23)PUC18克隆载体RT-PCR

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            【中文期刊】 吕志堂  刘志恒  《微生物学报》 2000年40卷6期 567-572页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP

            【摘要】 PCR-RFLP分析适用于种和种间水平的多相分类研究.文章对PCR-RFLP方法应用于糖单孢菌属分类的具体方法进行了探讨;报道了一组适于糖单孢菌属PCR-RFLP分析的限制性内切酶,并用这组酶对6株糖单孢菌属分离株进行了研究,进一步探讨了实...

            【关键词】 糖单孢菌属16S rDNAPCR-RFLP分析

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            【中文期刊】 田红  孙竞  等 《中国实验血液学杂志》 2000年8卷2期 90-92页MEDLINEISTICPKUCSCDCA

            【摘要】 本实验通过合成与原有下游引物(B)相似的一条新引物(B'),经聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)扩增出比原BCR-ABL cDNA序列减少了4个碱基的参照物,达到定点诱变的目的.经酶切分析证明,两型B...

            【关键词】 PCR定点诱变BCR-ABL基因竞争性PCR

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            【中文期刊】 贾琳娜  王小怡  等 《中国性科学》 2017年26卷1期 154-157页ISTIC

            【摘要】 目的:研究位于H19转录起始点-3390 bp的HhaI位点是否为差异甲基化位点,为精子DNA识别提供新依据.方法:从51份血样和20份精子样本提取基因组DNA,每个样本分别在同一反应体系中进行甲基化敏感酶HhaI消化和荧光定量PCR反应(...

            【关键词】 H19差异甲基化甲基化敏感性限制性内实时定量PCR

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            【中文期刊】 吕旭聪  刘志彬  等 《中国食品学报》 2018年18卷8期 214-223页

            【摘要】 基于18S rRNA基因序列的PCR-RFLP分型方法分析前期从传统酒曲中分离纯化的16株代表性真菌, 发现采用Hinf Ⅰ、Hae Ⅲ和Taq Ⅰ 3种限制性内切酶可将不同类型的真菌区分开, 甚至是物种极为接近的真菌菌株.比较不同PCR引...

            【关键词】 红曲黄酒酒曲真菌多样性

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