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【中文期刊】 霍艳英 张开泰 等 《中国癌症研究(英文版)》 2002年14卷3期 170-174页 SCIMEDLINEISTICCSCDCA
【摘要】 Objective: Smad7 was identified as a TGF-β-inducible antagonist of TGF-β signaling and might participate in a negative f...
【关键词】 TGF-β1； Smad7； Tumorigenesis；
【中文期刊】 孙卫国 胡永亮 等 《中华检验医学杂志》 2013年36卷2期 188-190页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 SELEX是一种新近发展起来的组合生物化学技术,即通过配基识别、结合目的靶分子从而筛选出特定靶分子的高特异性和高亲和力的配基.针对筛选获得的特异配基在临床上有多种应用,如应用于疾病的临床诊断,作为功能阻断物质开发新型的治疗药物,或直接参与阻...
【关键词】 SELEX技术； 寡核苷酸类； SELEX technology；
【中文期刊】 李邦印 孙卫国 等 《中国防痨杂志》 2010年32卷11期 752-755页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 从H37Rv标准株克隆出结核菌Rv2653c基因并进行表达与初步分析.方法 根据H37Rv基因组序列合成引物,以PCR方法钓取Rv2653c基因,克隆到pGEM-T上,挑取阳性克隆进行测序,将正确编码基因克隆到pET24b载体上,在B...
【中文期刊】 李国利 陈澎 等 《中国防痨杂志》 2010年32卷10期 616-621页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis,MTB)对左氧氟沙星(levofloxacin,LVF)与莫西沙星(moxifloxacin,MXF)的交叉耐药性,分析gyrA和gyrB基因突变位点分布及突变位...
【中文期刊】 苏锐 李邦印 等 《中国防痨杂志》 2009年31卷7期 389-392页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 在大肠埃希菌中高效表达结核杆菌phoS2,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性.方法 采用DNA重组技术构建结核分枝杆菌phoS2抗原表达载体,用双酶切和PCR等方法鉴定转化子,重组质粒转化大肠埃希菌,诱导表达phoS2;...
【中文期刊】 李邦印 李大伟 等 《实用医学杂志》 2007年23卷11期 1605-1607页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:从结核分枝杆菌基因组克隆Rv3881c基因并重组入pET24b载体,在大肠杆菌中进行融合表达,重组蛋白经纯化后通过Western blot分析初步鉴定其抗原性和特异性.方法:提取H37Rv标准株的基因组DNA,以基因组DNA为模板PC...
【中文期刊】 韩慧新 李邦印 等 《中国全科医学》 2006年9卷13期 1057-1059页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的通过基因工程技术获得重组结核分枝杆菌19-kDa蛋白.方法应用PCR技术扩增结核分枝杆菌H37Rv19-kDa DNA序列;以质粒pET24b为表达载体,构建19-kDa重组质粒,然后转化大肠杆菌BL21(DE3);在异丙基硫代-β-D...
【中文期刊】 胡迎春 项晓琼 等 《中华放射医学与防护杂志》 2004年24卷1期 16-18页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的建立α粒子辐射诱导人肺鳞癌裸鼠转移模型.方法a粒子辐射诱导人肺鳞癌细胞系BERP35T4原代接种裸鼠皮下,后采用组织块接种的方法,在鼠间连续传代3次,计算原代成瘤率及传代成活率,并观察肿瘤的转移情况,病理切片和免疫组织化学鉴定肿瘤的性质...
【中文期刊】 戴为民 李邦印 等 《中华医学杂志》 2004年84卷11期 907-909页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)基因在非小细胞肺癌中的转录表达变化情况及其临床意义.方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测了15例新鲜肺癌标本及相应癌旁组织中MTAP mRNA的表达情况.同时运用Western印迹法检测了M...
【中文期刊】 霍艳英 张开泰 等 《中华肿瘤杂志》 2004年26卷9期 521-524页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的研究Smad7过表达使人支气管上皮细胞系增殖能力增强的机制.方法用Smad7真核表达载体PCISmad7.neo同携带有报告基因碱性磷酸酶的c-myc顺式增强子元件pMyc-SEAP共转染,检测Smad7基因对增殖信号通路的影响.用RT...
【中文期刊】 戴为民 李邦印 等 《中国公共卫生》 2004年20卷7期 815-817页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的探讨甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)及其连锁基因p14,p15和p16在非小细胞肺癌中的转录表达变化情况.方法采用RT-PCR方法检测15例新鲜肺癌标本及相应癌旁组织中MTAP及其边锁基因p14、p15和p16mRNA的表达情况.结果MTA...
【关键词】 非小细胞肺癌； 甲硫腺苷磷酸化酶(MTAP)； p14、p15和p16基因；
【中文期刊】 李邦印 应万涛 等 《中华放射医学与防护杂志》 2004年24卷3期 222-225页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的探索甲硫腺苷磷酸化酶(Methylthioadenosine Phosphorylase,MTAP)在人支气管上皮BEP2D永生化细胞的恶性转化过程和临床非小细胞肺癌中的表达变化.方法培养BEP2D和BERP35T-2细胞,制备细胞总蛋...
【中文期刊】 霍艳英 张开泰 等 《中华放射医学与防护杂志》 2003年23卷5期 311-313页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的研究BEP 2 D细胞经辐射诱发恶性转化过程中,作为SMAD蛋白家族的抑制分子,Smad 7对TGF-β/SMAD介导信号通路的调控.方法用Northern blot检测TGF-β刺激之后,永生化BEP 2 D细胞及辐射诱发恶性转化的B...
【中文期刊】 李邦印 张开泰 等 《中国医学影像学杂志》 2003年11卷4期 299-301页 ISTICPKUCSCD
【摘要】 <篇首> 甲硫腺苷磷酸化酶(5'-Methylthioadenonine Phosphorylase,MTAP),EC:24.2.28,最初缩写为MSAP或MTAPase,是嘌呤和甲硫氨酸合成补救途径中一个关键的酶[1],属于嘌呤核苷磷酸化酶(...
【中文期刊】 霍艳英 张开泰 等 《中华放射医学与防护杂志》 2002年22卷6期 397-400页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的研究人支气管上皮细胞恶性转化过程中,TGF-β1表达水平的变化及其对细胞生长、增殖的影响,为进一步研究辐射诱发肿瘤发生的机理奠定基础.方法在24孔板中按5×104细胞/孔分别接种对数生长期的BEP2D及BERP35T-2细胞,用一定浓度...
【中文期刊】 张灵霞 庄玉辉 等 《中华检验医学杂志》 2001年24卷2期 105页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 <篇首> 我们比较了结核分枝杆菌(结核菌)基因组DNA及其聚合酶链反应(PCR)产物的灵敏度与特异性，并对结核病人痰标本进行了检测。 一、材料和方法 1.菌种来源：24种分枝杆菌来自中国药品生物制品检定所，11种非分枝杆菌来自中国科学院微...
【中文期刊】 张灵霞 庄玉辉 等 《中国防痨杂志》 2000年22卷3期 127-129页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的应用结核分枝杆菌特异的rDNA探针杂交检测痰标本中的结核杆菌rDNA,评价其在临床标本检测中的应用价值.方法用引物b对结核分枝杆菌16S-23S rDNA间隔区序列进行扩增,同时加入生物素标记,制成250bp的rDNA探针.对该探针的敏...
【中文期刊】 杨华卫 杨树德 等 《微生物学报》 2000年40卷2期 143-149页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为改进结核杆菌DNA探针的特异性与实用性,研制了以生物素标记的两种对结核分支杆菌特异的DNA探针:一个5'端标记的20bp的寡核苷酸探针和一个采用PCR方法合成的188bp长链探针.两种探针分别与结核分支杆菌的全染色体DNA,以及基因组上I...
【关键词】 寡核苷酸探针； 188bp DNA探针； 斑点杂交；
【中文期刊】 赵铭 刘冰 等 《中国医药导报》 2013年10卷14期 26-28,35页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建NKG5突变基因的原核表达载体并进行表达研究.方法 采用寡核苷酸合成的方法,拼接成为NKG5-Ser的编码序列,克隆到pGEMT载体上,测序正确后,再切下编码序列连接到质粒pGEX-4T-1中,重组表达载体转化大肠埃希菌BL21(...
【中文期刊】 孙卫国 李邦印 等 《临床肺科杂志》 2013年18卷10期 1835-1837页 ISTIC
【摘要】 目的 利用原核系统生产重组结核分枝杆菌 PPE17蛋白,Western-Blot方法鉴定PPE17蛋白的抗原性和特异性.方法 PCR 扩增 Rv1168c 基因序列然后克隆至原核表达载体pET-24b中,对PPE17蛋白进行表达和纯化,并以...
【中文期刊】 孙卫国 金程燕 等 《实用预防医学》 2013年20卷12期 1419-1422页 ISTICCA
【摘要】 目的 生物工程方法在原核系统内可溶性表达巨细胞病毒gp52蛋白并进行纯化,获得可以用于检测巨细胞病毒特异性抗体的重组抗原. 方法 利用PCR扩增获得巨细胞病毒gp52核酸序列,然后克隆至pET-DsbC核融合表达载体中,在原核系统进行诱导表...
【中文期刊】 孙卫国 李邦印 等 《现代检验医学杂志》 2012年27卷1期 16-18页 ISTICCA
【摘要】 目的 通过基因工程的方法获得风疹病毒E1蛋白在原核系统内可溶性表达,亲和纯化后,评价该重组蛋白在风疹病毒患者血清学诊断方面的可行性.方法 将PCR扩增得到的风疹病毒E1核酸序列克隆至原核表达载体pET-NusA中,利用原核系统表达融合蛋白N...
【中文期刊】 孙卫国 李邦印 等 《生物技术通讯》 2012年5期 669-672页 ISTICCA
【摘要】 目的:通过融合表达、羟胺切割、与二硫键异构酶共复性,获得高表达、高纯度、高生物活性的重组人白细胞介素-4(rhIL-4).方法:将5端引入了羟胺切割位点的hIL-4基因克隆到大肠杆菌二硫键异构酶DsbC的原核表达载体pET-DsbC中,IP...
【关键词】 人白细胞介素-4； 大肠杆菌二硫键异构酶； 羟胺切割；
【中文期刊】 李邦印 孙卫国 等 《生物技术通讯》 2012年23卷1期 38-41页 ISTICCA
【摘要】 目的:利用原核系统可溶性表达结核分枝杆菌HspX蛋白并进行纯化,通过免疫印迹反应初步鉴定重组蛋白的抗原性和特异性.方法:采用PCR方法,从结核分枝杆菌H37Rv基因组中扩增HspX核酸序列,克隆至原核表达载体pET-28a中,转入大肠杆菌B...
【中文期刊】 孙卫国 王卫 等 《实用预防医学》 2012年19卷10期 1445-1447页 ISTICCA
【摘要】 目的 利用DsbA蛋白分子伴侣性质,原核系统内可溶性表达风疹病毒E1蛋白并进行纯化,用于检测风疹病毒特异性抗体IgM. 方法 将PCR扩增的风疹病毒E1核酸序列克隆至融合表达载体pET-DsbA中,依次进行表达和亲和纯化,利用产物建立IgM...
【中文期刊】 孙卫国 刘农乐 等 《军事医学》 2011年35卷4期 268-271页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 原核系统可溶性地表达一种热稳定性的人角质细胞生长因子-2(human keratinocyte growth factor2,hKGF-2)并鉴定其生物活性.方法 通过重叠PCR方法进行定点突变,从人胎肝cDNA文库中获得编码人KGF...
【关键词】 成纤维细胞生长因子10； 蛋白稳定性； 突变体；
【中文期刊】 孙卫国 王芳 等 《生物技术通讯》 2011年22卷2期 225-228页 ISTICCA
【摘要】 目的:用MTT法检测重组人角质细胞生长因子-2(rhKGF-2)诱导不同细胞系增殖的差异,建立验证rhKGF-2生物活性的细胞模型.方法:利用载体pBV220-KGF-2原核表达和纯化rhKGF-2,然后用MTT法分别检测rhKGF-2诱导...
【关键词】 角质细胞生长因子-2； 基因表达； 细胞增殖MTT实验；
【中文期刊】 李国利 张灵霞 等 《临床和实验医学杂志》 2011年10卷21期 1649-1652页 ISTIC
【摘要】 目的 分析结核分枝杆菌(mycobacterium tuberculosis,MTB)临床分离株利福平(rifampin,RFP)耐药表型及rpoB基因突变关系,阐明MTB RFP耐药株rpoB基因突变特征.方法 采用改良罗氏培养基比例法检...
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