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【中文期刊】 樛跃 许崇波 《生物技术通报》 2012年10期 186-192页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用定点突变技术,将A型产气荚膜梭菌α毒素( CPA)第272位苏氨酸(ACA)定点突变成脯氨酸(CCG),构建了含CPA突变基因表达质粒的重组菌株BL21( DE3)(pMCPA-T272P).经酶切鉴定和序列测定证实,构建的重组质粒pM...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 李玲 李尔然 等 《中国医科大学学报》 2007年36卷6期 692-693,727页ISTICPKUCABP
【摘要】 目的:观察金黄色葡萄球菌α毒素(α-toxin)对Balb/c小鼠肺微血管内皮细胞(LMEC)水通道蛋白1(AQP1)表达的影响.方法:将实验组小鼠15只腹腔注入α-toxin后根据6 h、10 h、24 h取材时间,随机将它们分为α-to...
- 概要：
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【中文期刊】 林明辉 荫俊 等 《生物工程学报》 2004年20卷1期 63-65页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 诱导表达重组工程菌pBV/cpa408后,将表达菌体超声破碎,上清经80%饱和硫酸铵一次沉淀,经透析,上凝胶过滤层析柱进行分离纯化,薄层凝胶扫描结果显示,纯化的蛋白纯度达95%以上;用纯化蛋白免疫昆明小鼠,以1.0MLD100腹腔进行攻击,...
- 概要：
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【中文期刊】 赵宝华 许崇波 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2003年19卷6期 690-697页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株1A8中,分别扩增出抗体VH和VL基因,用linker (Gly4Ser)3基因,将VH和VL基因连接成单链抗体(ScFv)基因,并将其克...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 赵宝华 许崇波 《生物工程学报》 2001年17卷5期 543-547页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出抗体VH和VL基因,连接成ScFv基因,并将其克隆至pGEM-T载体中构建了重组质粒pXScFv-2E3.经序列分析证实,VH和VL基因及li...
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【中文期刊】 彭国瑞 彭小兵 等 《中国兽药杂志》 2019年53卷2期 26-32页
【摘要】 为获得腐败梭菌α毒素和D型产气荚膜梭菌ε毒素的共表达产物,并鉴定其致死活性和反应原性,评价其免疫保护效力,利用PCR扩增腐败梭菌α毒素和产气荚膜梭菌ε毒素基因Gcsa和Gcpe并克隆至pETDuet-1质粒,转化E.coli BL21(DE...
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【中文期刊】 杜吉革 王磊 等 《中国兽医杂志》 2019年55卷1期 7-10页
【摘要】 本研究旨在获得产气荚膜梭菌α毒素(CPA)C末端(第247-370位氨基酸,CPAc)二拷贝串联融合蛋白,并评价其免疫原性.对已知的A型产气荚膜梭菌CPAc编码基因进行优化设计,将其以同向串连的方式串联成二拷贝基因(GCPAc2),经人工合...
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【中文期刊】 李箐 辛文文 等 《军事医学》 2013年37卷9期 671-675页ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 制备特异性的产气荚膜梭菌α毒素(Clostridium perfringens alpha-toxin,CPA)卵黄抗体(yolk immunoglobulin,IgY).方法 利用定点突变技术,将CPA第56位天冬氨酸和第68位组氨...
- 概要：
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【中文期刊】 林明辉 荫俊 等 《生物技术通讯》 2004年15卷1期 26-28页ISTICCA
【摘要】 在构建出高表达、高活性的A型产气荚膜梭菌α毒素保护性抗原工程菌株pBV/cpa408的基础上,对表达产物进行了分离纯化研究.诱导表达菌液离心后,超声破碎沉淀细菌,上清用80%饱和硫酸铵沉淀,沉淀蛋白经透析,上凝胶过滤层析柱分离纯化,得到纯度...
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【中文期刊】 宫语晨 许崇利 等 《中国兽药杂志》 2014年48卷6期 1-7页
【摘要】 为探索A型魏氏梭菌α毒素第56位天冬氨酸(Asp-56)对其生物学活性的影响,将α毒素Asp-56密码子(GAT)定点突变成甘氨酸(Gly-56)密码子(GGT),构建了含α毒素D56G突变基因表达质粒的重组菌株BL21 (DE3) (pM...
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【中文期刊】 宫语晨 许崇利 等 《中国兽药杂志》 2014年7期 62-65页
【摘要】 对魏氏梭菌α毒素的生物学特性、基因克隆、对细胞和生物膜的作用、表达调控和疾病等方面进行了阐述，以期为α毒素的进一步研究提供参考。
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【中文期刊】 赵宇亮 张聪敏 等 《安徽农业科学》 2013年12期 5378-5380,5383页
【摘要】 产气荚膜梭菌能引起人类食物中毒和出血性肠炎,严重时可导致死亡.α毒素是A型产气荚膜梭菌的主要致死性毒力因子和保护性抗原,从分子生物学角度对该毒素进行研究具有重要意义.对α毒素的分子生物学结构和致病机理进行了简要概述,并介绍了国内外对产气荚膜...
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【中文期刊】 许君艳 姚运亮 等 《动物医学进展》 2013年34卷3期 21-24页
【摘要】 a毒素(Hla)作为重要的毒力因子,在金黄色葡萄球菌感染宿主的过程中具有破坏宿主细胞免疫屏障的效应.通过基因工程手段对金黄色葡萄球菌Hla基因进行克隆与原核表达,分离纯化得到重组Hla融合蛋白,对其进行SDS-PAGE和Western bl...
- 概要：
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【中文期刊】 彭国瑞 蒋玉文 等 《中国兽药杂志》 2013年47卷10期 53-56页
【摘要】 就腐败梭菌α毒素的理化性质、生物学特性、结构与功能、致病机制、免疫原性和应用等方面国内外的研究进展进行了概述,以期为腐败梭菌病的防治以及其病原的其他研究提供借鉴.
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【中文期刊】 德艳艳 姜志刚 等 《中国预防兽医学报》 2012年34卷7期 563-567页
【摘要】 为验证重组α毒素对携带非典型cpb2基因的A型产气荚膜梭菌的免疫保护性,本研究应用PCR技术,从某牛场牛源A型产气荚膜梭菌G1分离株中扩增出1194bp的α毒素编码基因(cpa)和795bp的β2毒素编码基因(cpb2).经BLAST分析显...
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【中文期刊】 王苗利 蔡玉梅 等 《动物医学进展》 2011年32卷10期 19-23页
【摘要】 为了研究α毒素在感染A型产气荚膜梭茵动物的体内的分布情况,自制了高效价的兔抗a毒素多克隆抗体作为一抗,HRP和FITC分别标记的羊抗兔IgG作为二抗,通过免疫组化法对α毒素进行了定位检测.结果表明,在小鼠延髓、肠、肾、肺、胃的间充质细胞胞浆...
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【中文期刊】 于立新 苏佳 等 《内蒙古农业大学学报（自然科学版）》 2011年32卷4期 34-37页
【摘要】 为了对A型产气荚膜梭菌α毒素快速准确地做出检测,本实验利用厌氧肉肝汤培养A型产气荚膜梭菌,经革兰染色观察以及含铁牛奶培养基观察其生化特性.然后使用饱和度为60％的硫酸铵粗提其α毒素蛋白,进行透析纯化并应用SDS - PAGE方法鉴定A型产气...
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【中文期刊】 孔庆娟 《中国畜牧兽医》 2011年38卷1期 233-235页
【摘要】 作者对产气荚膜梭菌α毒索的组成、理化性质、生物学特性、检测、结构功能、作用机理、分子遗传及其与氨基酸的组成和细胞膜之间的关系等方面的研究进展作了简要综述.
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【中文期刊】 张曼 王晶钰 《西北农业学报》 2010年19卷9期 29-33页
【摘要】 建立牛奶乳样中产气荚膜梭菌α毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素A的双重PCR检测方法.根据产气荚膜梭菌α毒素和金黄色葡萄球菌肠毒素A基因序列分别设计了2对特异性引物,分别从产气荚膜梭菌和金黄色葡萄球菌参考菌株的肉汤培养物中提取DNA,进行PCR扩增...
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【中文期刊】 许崇利 许崇波 等 《中国兽药杂志》 2009年43卷11期 21-25页
【摘要】 采用限制性核酸内切酶酶切鉴定含α毒素突变基因的重组质粒,同时用SDS-PAGE检测不同条件下α 毒素突变基因的表达情况.经酶切鉴定证实重组质粒pXMCPA02含有α毒素突变基因且基因序列和阅读框架正确.同时以IPTG为诱导剂诱导α 毒素突变...
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【中文期刊】 赵宝华 许崇波 等 《河北省科学院学报》 2002年19卷2期 82-87页
【摘要】 应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌(CPA)α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出单链抗体(ScFv)基因,并将其定向克隆于表达载体pHOG21中,构建重组表达载体pHOG-2E3,转化至大肠杆菌XL1-Blue中...
【关键词】 A型产气荚膜梭菌α毒素；单链抗体；基因克隆；
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【中文期刊】 赵宝华 杨虹 等 《河北师范大学学报(自然科学版)》 2002年26卷5期 506-512页
【摘要】 对产气荚膜梭菌α毒素的组成、结构、理化性质、作用机理、检测及分子遗传等方面的研究进展作了简要综述.
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【中文期刊】 薛家宾 陈兴祥 等 《江苏农业学报》 2002年18卷1期 52-55页
【摘要】 通过Kaerber方法测定α毒素对小鼠的半数致死量后,定量出10LD50毒力标准的毒素所能引起卵磷脂水解反应的稀释度为6,每一水解稀释度相当于LD50/6.4的毒力标准,从而建立起A型魏氏梭菌毒素毒力测定动物试验的替代试验.α毒素毒力与卵磷...
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【中文期刊】 陈兴祥 薛家宾 等 《畜牧与兽医》 2002年34卷3期 26-27页
【摘要】 应用硫酸铵盐析、Sephadex G-25和Sephadex G-100层析的方法提纯A型产气荚膜梭菌α毒素,并利用卵磷脂水解试验监测α毒素的析出峰.结果表明,以50%(W/V)硫酸铵盐析A型产气荚膜梭菌α毒素,经Sephadex G-25...
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【中文期刊】 蒋玉文 《中国兽药杂志》 2001年35卷6期 41-45页
【摘要】 α毒素是产气荚膜梭菌的主要毒素和致病因子之一.本文综述了产气荚膜梭菌α毒素的检测、基因的克隆、表达和调控以及毒素的结构与功能等方面的研究进展.
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【中文期刊】 许崇波 赵宝华 等 《中国兽医学报》 2001年21卷4期 341-343页
【摘要】 用PCR从含产气荚膜梭菌β毒素基因的质粒pXETB2中扩增出β毒素基因，NcoⅠ和BamHⅠ双酶切该β毒素基因，回收0.93kb的β毒素基因片段，再用NcoⅠ和BamHⅠ双酶切含产气荚膜梭菌α毒素基因质粒pXETA1，与上述回收的β毒素基因...
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【中文期刊】 许崇波 赵宝华 等 《中国兽医学报》 2000年20卷3期 246-248页
【摘要】 应用RT-PCR技术,从分泌具有中和活性的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体(McAb) 的杂交瘤细胞2E3中,扩增出抗体VH和VL基因,用linker(Gly4Ser)3基因,将VH和V L基因连接成ScFv基因,并将其克隆至pGEM-T...
- 概要：
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【中文期刊】 赵宝华 许崇波 等 《中国兽医学报》 2000年20卷4期 367-370页
【摘要】 将2种抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体(ScFv)基因ScFv-2E3和ScFv-1A8克隆至表达载体pUC119、pHOG21和pET20b中,构建了重组质粒pUC2E3和pUC1A8、pHOG2E3和pHOG1A 8、pET2E3和pE...
- 概要：
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【中文期刊】 吕存女 张敬友 等 《兰州大学学报（自然科学版）》 2000年36卷6期 101-104页
【摘要】 为了快速、灵敏地测定样品中的产气荚膜梭菌α毒素,本实验以产气荚膜梭菌培养滤液经硫酸铵分段盐析、丙酮分段沉淀及凝胶过滤得精制α毒素.在96孔细胞板上,经卵黄反应浊度(微量)法测定精制α毒素及培养滤液卵黄反应滴度分别为1:32 768和1:2 ...
【关键词】 产气荚膜梭菌；α毒素；卵黄反应浊度(微量)；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王冬冬 张国利 等 《中国生物工程杂志》 2017年37卷4期 18-25页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:为防治A型产气荚膜梭菌α毒素引起的肠毒血症及气性坏疽等相关疾病,构建并高效表达中和α毒素(CPA)的特异性双价单链抗体,并对其生物学活性进行初步研究.方法:以全人源噬菌体抗体库中筛选得到的抗A型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体scFv基因为...
【关键词】 A型产气荚膜梭菌α毒素；双价单链抗体；表达与纯化；
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