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【中文期刊】 李振宇 徐开林 等 《徐州医学院学报》 2004年24卷2期 95-98页ISTICCA
【摘要】 目的构建以泛醌启动子(PUB)驱动绿色荧光蛋白(GFP)表达的慢病毒载体三质粒表达系统,并建立其包装细胞系获得GFP的表达.方法载体的构建采用限制性内切酶酶切、T4DNA连接酶连接等方法.三质粒系统中,转移质粒含PUB启动子及标志基因GFP...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张春 苏丛 等 《安徽医科大学学报》 2024年59卷3期 398-402页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建p62 基因过表达慢病毒载体及其表达系统,并在人单核细胞白血病细胞(THP-1)中稳定表达,为在细胞水平研究p62 基因的作用提供途径与方法.方法 采用聚合酶链式反应(PCR)扩增p62 基因片段,将扩增产物连接至线性化pcDNA...
- 概要：
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【中文期刊】 李鹏(综述) 宋立华 等 《国际检验医学杂志》 2016年37卷6期 780-782页ISTICCA
【摘要】 鹦鹉热衣原体（Cps）是一种专性真核细胞内寄生，有独特的二相型发育周期，可形成具有感染能力的原体（EB）和具有繁殖能力的网状体（RB），革兰染色阴性的细菌。 Cps 归类于衣原体科中的衣原体属，早期 Everett 等［1］将其归类为嗜衣原...
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【中文期刊】 李鹏 张琪 等 《中华医院感染学杂志》 2017年27卷5期 1193-1196页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 衣原体是一种专性胞内寄生的病原微生物,种间组织嗜性有差异,有些还是人兽共患病病原菌;其感染部位广泛、途径多,临床以沙眼、肺炎和泌尿生殖道感染多见;鹦鹉热衣原体还曾作为经典的生物战剂;衣原体由于胞内寄生,致病机制复杂,本文从三型分泌系统、衣原...
- 概要：
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【中文期刊】 郑艳 朱雄鹏 等 《中国实验血液学杂志》 2019年27卷2期 433-438页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探索稳定下调钙网蛋白(calreticulin,CALR)对NK/T细胞淋巴瘤细胞SNK6细胞侵袭性的影响及其可能机制.方法:设计靶向人钙网蛋白的特异性短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)序列,构建重组慢病毒...
- 概要：
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【中文期刊】 韩雅慧 张焕新 等 《中国实验血液学杂志》 2019年27卷3期 708-716页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨稳定下调K562细胞株FMI表达对其甲磺酸伊马替尼药物敏感性的影响及其可能的作用机制.方法:应用Western-blot方法分别检测K562细胞、慢性髓系白血病(CML)病人、慢性髓系急变病人及健康志愿者外周血单个核细胞FMI蛋白...
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【中文期刊】 洪菲 张焕新 等 《中国实验血液学杂志》 2018年26卷3期 691-697页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探索稳定下调VE-cadherin蛋白对K562细胞药物敏感性的影响及其可能的机制.方法:设计靶向人VE-cadherin的特异性干扰序列,连同IRES-GFP及NEO基因片段,构建重组慢病毒载体;三质粒系统包装慢病毒颗粒,感染K56...
- 概要：
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【中文期刊】 岳俊帅 吴庆运 等 《中国实验血液学杂志》 2016年24卷4期 963-968页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:检测PTPN11在急性髓系白血病(AML)细胞株中的表达水平,探讨过表达PTPN11对AML细胞株生物学行为的影响.方法:应用逆转录聚合酶链反应、实时定量PCR和Western blot等方法检测5种AML细胞株(HEL、U937、K...
- 概要：
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【中文期刊】 李淼 陈伟 等 《中国实验血液学杂志》 2013年21卷1期 198-202页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在克隆小鼠CXC型趋化因子受体4(CXCR4)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的CXCR4重组慢病毒栽体并在真核细胞中表达.采用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)以C57BL/6小鼠骨髓细胞为模板克隆全长型CXCR4...
【关键词】 CXC型趋化因子受体4；慢病毒载体；基因表达；
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【中文期刊】 秦婧 王桂兰 等 《临床与实验病理学杂志》 2013年29卷8期 832-835,839页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建慢病毒载体将Foxq1干扰序列递达到人肝癌7721细胞中,观察该细胞中Foxq1的表达并评估慢病毒载体的有效性.方法 体外合成与筛选具有Foxq1干扰功能的核酸片段(siRNA Foxq1),通过重组技术将其插入到慢病毒三质粒系统...
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【中文期刊】 荆玉明 罗杰 等 《南方医科大学学报》 2012年32卷3期 317-321页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建p38丝裂原激活蛋白激酶基因(MAPK)重组慢病毒载体并建立表达外源性p38基因的人前列腺癌稳定细胞株.方法 采用限制性内切酶酶切、T4 DNA连接酶连接等方法,将EGFP/p38融合基因插入慢病毒载体pTYF-EF1α-IRES...
【关键词】 p38丝裂原激活蛋白激酶；稳定细胞株；前列腺癌；
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【中文期刊】 陈伟 陈翀 等 《中国实验血液学杂志》 2012年20卷1期 168-172页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达....
【关键词】 成纤维细胞生长因子受体基因；慢病毒载体构建；基因表达；
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【中文期刊】 刘真 甄艳 等 《南方医科大学学报》 2011年31卷1期 65-68页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 克隆人NESG1基因,构建与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)融合表达的慢病毒载体pGC-FU-NESG1-EGFP,包装慢病毒,感染293FT细胞并进行鉴定.方法 以NESG1全长克隆为模板扩增其编码框序列,通过限制性内切酶AgeⅠ酶切...
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【中文期刊】 黄敏 欧东梅 等 《中国实验血液学杂志》 2009年17卷4期 949-952页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究建立真核细胞表达的Gfi1基因重组慢病毒载体包装系统,并实现Gfi1在32D细胞中长期、稳定的表达,为进一步研究Gfi1基因在恶性血液病中的发生发展建立一个有效的平台.制备完整的重组慢病毒载体三质粒系统:转移质粒(pLOX-Gfi1/...
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【中文期刊】 高波 段志坚 等 《中国免疫学杂志》 2009年25卷7期 601-605页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建固有免疫分子TRIM5α的真核表达质粒,研究TRIM5α 对HBV复制的影响.方法:通过巢氏RT-PCR技术从恒河猴肺组织中扩增出TRIM5α的编码基因,并将其克隆入pcDNA3.1真核表达载体.将TRIM5α真核表达质粒转染He...
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【中文期刊】 袁健东 傅强 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2009年13卷32期 6327-6331页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:神经营养素3是目前发现的在脊髓损伤修复中作用最强的神经营养因子,它能有效促进再生轴突穿越胶质瘢痕组织,从而修复脊髓损伤.目的:构建含有人神经营养素3基因的重组慢病毒载体(LV-hNT3),观察转染后人神经营养素3基因在许旺细胞中的表达...
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【中文期刊】 刘勤 张晋宇 等 《第三军医大学学报》 2008年30卷10期 885-889页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 以慢病毒作为载体,制作增强型绿色荧光蛋白(EGFP)转基因小鼠,建立慢病毒介导的转基因动物制备技术平台.方法 慢病毒包装采用三质粒系统.3个质粒分别为转基因质粒FUGW、病毒结构蛋白表达质粒psPAX2以及病毒包膜蛋白表达质粒pMD2...
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【中文期刊】 曾令兵 张林 等 《微生物学报》 2007年47卷6期 1060-1065页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 近来,慢病毒载体引起了极大关注,己成为转基因操作中重要的工具.用编码病毒组份的三质粒系统共转染293T包装细胞系,建立了大量制备HIV-1缺损慢病毒载体的方法,病毒载体的度可达到1.1×107IU/mL,离心浓缩可将载体滴度提高100倍以上...
【关键词】 HIV-1慢病毒载体；制备；高滴度；
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【中文期刊】 李振宇 徐开林 等 《中国实验血液学杂志》 2007年15卷1期 125-128页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究构建含绿色荧光蛋白基因的慢病毒载体三质粒系统,并观察其在小鼠T淋巴细胞中的表达情况.应用亚克隆技术将多聚嘌呤通道(PPT)元件、泛醌启动子(PUB)和绿色荧光蛋白基因(GFP)连接至pLO134载体,构建成pTK153载体.之后应用磷...
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【中文期刊】 冯薛烟 丁向春 等 《宁夏医科大学学报》 2018年40卷8期 869-874页ISTIC
【摘要】 目的 构建ADH1B慢病毒表达载体并建立ADH1B稳定过表达的人肝癌细胞株HepG2.2.15.方法 根据ADH1B基因序列设计引物,PCR扩增并连接于GV492载体质粒交换转化DH5α感受态,选取阳性克隆转化子进行测序鉴定.采用三质粒系统...
【关键词】 ADH1B基因；慢病毒载体；HepG2.2.15细胞；
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【中文期刊】 唐传喜 刘鑫峰 等 《山东医药》 2017年57卷27期 1-4页ISTICCA
【摘要】 目的 构建过表达CUE结构域蛋白2(CUEDC2)的人脑胶质瘤U251细胞系.方法 PCR扩增CUEDC2基因全长序列,将其连接于GV358载体质粒.酶切鉴定GV358-CUEDC后采用慢病毒包装三质粒系统(GV358-CUEDC2、Hel...
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【中文期刊】 沈文燕 李冉 等 《西部医学》 2014年26卷2期 142-145页ISTIC
【摘要】 目的 构建pCS-CG-DsRed2-vigilin慢病毒重组载体,以及包装pCS-CG-DsRed2-vigilin重组慢病毒.方法 用NheⅠ、NotⅠ将目的片段红色荧光蛋白基因DsRed2从pDsRed2-N1中切下,连入pcDNA3...
【关键词】 vigilin；DsRed2荧光蛋白；重组载体；
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【中文期刊】 黄必军 杨长福 等 《现代肿瘤医学》 2014年8期 1739-1744页ISTICCA
【摘要】 目的：构建慢病毒载体并利用 miRNA 原理进行 LMP1病毒癌基因干扰的可行性及有效性研究。方法：基于人 miR -30a 结构，利用靶点分析软件设计4个 LMP1的候选干扰靶点，报告基因 EGFP 与 miR -LMP1靶点形成共顺反子...
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【中文期刊】 袁健东 郎俊哲 等 《温州医学院学报》 2013年43卷6期 351-354页ISTICCA
【摘要】 目的:构建携带人神经营养素3 (hNT3)基因的重组慢病毒表达载体.方法:通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGC-E1-hNT3-EGFP质粒,将该质粒转化大肠杆菌DH5α,通过PCR、酶切、测序和对比验证hNT3,通过Lipofec...
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【中文期刊】 贡树基 周伟 等 《白求恩医学杂志》 2018年16卷1期 10-12页
【摘要】 目的 构建含干扰素(IFN)γ基因的转移质粒,包装含IFNγ基因的重组慢病毒(LV),测定重组LV是否包装成功,重组LV的定量及鉴定IFNγ基因的表达.方法 采用分子克隆方法,构建含IFNγ基因的转移质粒,采用脂质体法将LV三质粒系统(包括...
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【中文期刊】 张同韩 刘海潮 等 《广东医学》 2012年33卷7期 903-907页ISTICCA
【摘要】 目的 构建人源性Jagged1 RNAi慢病毒载体,并观察其对舌癌细胞中Jagged1的敲减作用.方法 GenBank检索人Jagged1信息,设计Jagged1靶点.BLAST比对同源性,合成双链DNAoligo.线性化的RNA干扰载体质...
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【中文期刊】 井超 徐铁军 《徐州医学院学报》 2011年31卷3期 149-151页ISTICCA
【摘要】 目的 比较分别经磷酸钙转染法和脂质体转染法建立的第三代慢病毒包装系统的包装效率.方法 制备并纯化完整的重组慢病毒三质粒系统:转移质粒(PXZ171)、包装质粒(△NRF)以及包膜蛋白质粒(VSV-G).分别用磷酸钙法和脂质体法将三质粒共转染...
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【中文期刊】 赖颖晖 赖永榕 等 《中国实验诊断学》 2010年14卷9期 1358-1362页ISTIC
【摘要】 目的 构建介导人α-反义寡核苷酸的慢病毒载体,为α-反义寡核苷酸对β-地中海贫血基因治疗的体内试验提供稳定的转染细胞载体.方法 根据人α-反义寡核苷酸序列设计siRNA、合成DNA片段,通过双限制性内切酶消化和连接的方法构建pGCSIL-v...
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- 结论：
【中文期刊】 李伟霞 李咏梅 等 《天津医科大学学报》 2010年16卷3期 370-374页ISTIC
【摘要】 目的:用重组构建的靶向ABCG2基因的慢病毒载体,感染Caco-2细胞,构建长期稳定敲除ABCG2蛋白的口服药物肠吸收的Caco-2细胞体外模型.方法:采用三质粒系统慢病毒重组技术,针对ABCG2基因的4个靶点,构建4个靶向ABCG2基因的...
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【中文期刊】 胡少勃 宋自芳 等 《临床外科杂志》 2009年17卷10期 662-664页ISTIC
【摘要】 目的 构建以SM22α启动子驱动EGFP表达的慢病毒载体,研究此载体在血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)中表达的效率和特异性.方法 从小鼠的基因组中采用PCR扩增SM22α启动子,将目的基...
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