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【中文期刊】 王晓玲 郭明飞 等 《医学理论与实践》 2024年37卷11期 1805-1807,1817页
【摘要】 目的:原核表达并纯化人5-脂氧合酶(5LO)△112 蛋白,将其免疫新西兰大白兔制备5-LO多克隆抗体.方法:使用DNAMAN设计重组引物,PCR扩增N端缺失112 个氨基酸的5-LO截短DNA片段,将其重组到KpnⅠ和EcoRⅠ酶切的pE...
【中文期刊】 占艺 高尚邦 等 《生物化学与生物物理进展》 2008年35卷11期 1247-1253页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 膜蛋白质Orai1组成了一类被称为钙释放激活钙通道(CRAC)的离子通道,并且由相互作用的蛋白质STIM1作为其在内质网上的钙感受器.但是这类通道的调节机制还未研究透彻.通过串连亲和纯化STIM1-Orai1复合体,发现与之相互作用的内质网...
【中文期刊】 谌海兰 陈特 等 《中国老年学杂志》 2017年37卷3期 525-528页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的：通过经典单克隆抗体制备技术制备氨基端前B型钠尿肽（ NT-proBNP）单克隆抗体，将单克隆抗体进行特异性和亲和力鉴定，并用于免疫学检测试剂盒的开发。方法用带His-Trx-标签蛋白的NT-proBNP免疫Balb／C小鼠制备单克隆抗...
【中文期刊】 蔡炯 郑堃 等 《中国医学科学院学报》 2013年35卷3期 281-285页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过基因重组表达制备一种氨基端带有HEHEHE序列,羧基端带有GGGC序列的ZHER2∶V2亲和体,为无创的人类表皮生长因子受体2 (HER2)显像创造条件.方法 采用基因设计软件,将HER2亲和体编码基因的密码子进行优化,使之适合于...
【关键词】 人类表皮生长因子受体2； 亲和体； 表达；
【中文期刊】 龚晖 林天龙 等 《中国人兽共患病学报》 2009年25卷5期 422-425,433页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 用亲和纯化法纯化嗜水气单胞菌气溶素,从单因子水平分析嗜水气单胞菌的溶血特性.方法 用嗜水气单胞菌气溶素单克隆抗体McAb 3C12B11为配体制备亲和层析柱,甘氨酸洗脱以获得纯化的嗜水气单胞菌ZN1气溶素.获得的纯化气溶素分别与1%欧...
【中文期刊】 黄敏 徐辉 等 《应用与环境生物学报》 2009年15卷3期 371-375页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将大肠杆菌植酸酶appA摹因重组于表达载体pET32a中,导人大肠杆菌Origami(DE3)构建工程菌Origami(DE3)-pET32aappA.对表达的appA重组植酸酶经Ni柱亲和纯化、SDS-PAGE分析表明,纯化后条带单一,酶...
【中文期刊】 赵阳 黄鹤 《中国实验血液学杂志》 2008年16卷4期 903-909页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 本研究探讨利用肠激酶加工融合蛋白的方法制备重组人白细胞介素11(rhIL-11)的工艺条件与参数.融合表达载体pET32a/IL-11在大肠杆茵E.coli BL21(DE3)pLysS中诱导表达,裂解上清以Ni-NTA亲和纯化,通过Dsb...
【中文期刊】 李环 陈悦 等 《生物工程学报》 2007年23卷3期 487-492页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 报道重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶(NAOase)的研究进展.重组NAOase由大肠杆菌argE基因编码,在重组菌BL21(DE3)-pET22b-argE中的表达量为32.5%,大多以无活性的包涵体存在.低温诱导可增大有活性的可溶表达部分的...
【关键词】 重组N-乙酰鸟氨酸脱乙酰基酶； 表达定位； 亲和纯化；
【中文期刊】 田丽平 张育坚 等 《生物工程学报》 2004年20卷6期 928-931页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 近年来研究发现人胰岛素原C肽(简称C肽)有多种生物活性,在治疗糖尿病的并发症中有潜在的应用价值.在前期研究中,完成了多拷贝串联C肽基因的构建和融合表达,在原核中获得了高表达.用发酵的方法大规模表达融合蛋白C肽(FCP),由Ni-NTA柱亲和...
【关键词】 C肽； Ni-NTA亲和纯化； 糖尿病；
【中文期刊】 吴樱 黄鹤 等 《吉林大学学报（医学版）》 2004年30卷6期 865-867,877页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:探讨6聚组氨酸序列与葡激酶基因序列融合表达及其表达产物的纯化方法.方法:将葡激酶的cDNA序列连入pET-29b质粒,转入E.coli BL21(DE3)进行表达.应用镍金属离子螯合层析及凝胶过滤层析法纯化表达产物,采用溶圈法对纯化产...
【关键词】 葡糖激酶； 重组蛋白质类/生物合成； 重组融合蛋白质类/分离和纯化；
【中文期刊】 王再兴 张学军 等 《中国免疫学杂志》 2001年17卷3期 155-156页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：研究斑点亲和纯化法在表皮下大疱病(SABD)患者血清中单特异性基底膜带自身抗体(BMZ-Ab)分离纯化中的应用价值。方法：对3例免疫印迹阳性的自身免疫性表皮下大疱病(SABD)患者血清中基底膜带抗体(BMZ-Ab)，利用转移至硝酸纤维...
【中文期刊】 郑文婕 刘敬忠 等 《中华血液学杂志》 2001年22卷6期 306-309页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的建立重组人Flt3配体(rhFL)的原核高效表达系统及目标蛋白的纯化途径,为大规模获得rhFL产品,促进干细胞体外扩增、移植等新技术在临床的应用创造条件.方法将FL胞外段cDNA与pProEXHT载体连接,重组体引入大肠杆菌并在异丙基-...
【中文期刊】 李珍 徐青 等 《军事医学》 2019年43卷5期 346-351页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 利用大肠杆菌高效表达并纯化E型肉毒神经毒素(BoNT/E)受体结合区Hc的亚结构域EHc?C蛋白,并进行免疫原性研究.方法 利用PCR技术扩增出EHc?C基因,克隆于载体pTIG?Trx?His?tag中得到重组质粒pTIG?Trx?...
【中文期刊】 吴炳男 陈丽 等 《食品与药品》 2019年21卷2期 105-110页 ISTICCA
【摘要】 目的 研究Zn2+对PPR蛋白锌指结构域的原核表达、纯化过程的影响,并对Zn2+的作用机制进行了初步探索.方法 采用分子克隆的方法构建PPR蛋白锌指结构域及其突变体的His-SUMO融合蛋白表达质粒,研究Zn2+对其原核表达及Ni-柱亲和纯...
【中文期刊】 颜晓庆 刘飞 等 《中国医学创新》 2018年15卷32期 27-31页 CA
【摘要】 目的:前期研究发现小鼠细胞因子LIGHT(TNFSF14)能够抑制脂肪前体细胞分化,表达纯化LIGHT并验证其活性,将为进一步明确其调控脂肪前体细胞分化的机制提供坚实的基础.方法:以小鼠脾脏总cDNA为模板,通过PCR扩增得到LIGHT胞外...
【中文期刊】 田利源 胡亚欧 等 《生物技术通讯》 2010年21卷3期 328-331页 ISTICCA
【摘要】 目的:在原核细胞中表达小鼠β-防御素30(DEFB30),并对表达产物进行鉴定和纯化.方法:用RT-PCR方法扩增小鼠Defb30的cDNA序列,将2个拷贝的cDNA序列串联连入原核表达载体pET28(a),构建重组表达载体pET28(a)...
【中文期刊】 付宁 赵莉霞 等 《生物技术通讯》 2009年20卷3期 343-345页 ISTICCA
【摘要】 目的:制备Gas8抗体,并检测小鼠各组织中Gas8表达谱.方法:在大肠杆菌BL21(DE3)中表达His标签标记的Gas8融合蛋白,以纯化的Gas8重组融合蛋白为抗原制备兔Gas8多抗血清,进一步利用亲和纯化方法制备Gas8多克隆抗体;为确...
【中文期刊】 孙永福 王凤山 等 《生命的化学》 2008年28卷2期 146-148页 ISTICCA
【摘要】 内含肽(intein)的自切剖功能在蛋白质工程领域有着广泛的应用,尤其是在蛋白质纯化方面,将内含肽与亲和纯化技术联合应用,使得传统的亲和纯化方式有了重大的突破.近年来,随着内含肽的研究不断深入,一批内含肽介导的新型蛋白质纯化技术不断出现.新...
【中文期刊】 江华 郑玉玲 等 《军事医学科学院院刊》 2007年31卷2期 122-125页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的:利用大肠杆菌表达人CT抗原NY-ESO-1,对表达产物进行Western印迹鉴定和纯化,为今后利用其进行肿瘤疫苗的研究奠定基础.方法:通过全基因拼接获得NY-ESO-1基因,构建重组表达载体NY-ESO-1-pET28a(+),在大肠...
【中文期刊】 舒伟 李发慧 等 《生物技术通讯》 2007年18卷5期 771-773页 ISTICCA
【摘要】 目的:制备ANKRD17(P260)蛋白的兔多克隆抗体,以与抗原相结合的方法进行抗体的纯化,并利用纯化的抗体对该蛋白进行细胞内免疫荧光检测.方法:构建表达GST-ANKRD17 C端融合蛋白的质粒,在大肠杆菌中诱导表达;制备GST-ANKR...
【中文期刊】 应跃斌 李丹曦 等 《免疫学杂志》 2007年23卷2期 144-147,151页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 克隆金黄色葡萄球菌肠毒素C2(SEC2)基因,添加亲和纯化标签进行原核表达,并对表达产物进行生物学活性分析.方法 通过PCR从pGEM-T-SEC2质粒中亚克隆得到带有编码6个组氨酸的核苷酸序列的基因片断,构建了表达质粒pET-28a...
【中文期刊】 白冰 满江红 等 《生物技术通讯》 2007年18卷5期 767-770页 ISTICCA
【摘要】 目的:作为一个新发现的癌蛋白,gankyrin在肝癌细胞的发生和形成中发挥重要作用.筛选与gankyrin相互作用的蛋白质,从而进一步探讨gankyrin的作用机制.方法:采用亲和纯化技术及质谱鉴定筛选与gankyrin相互作用的蛋白质.结...
【中文期刊】 张影 王恒樑 《生物技术通讯》 2006年17卷2期 216-220页 ISTICCA
【摘要】 基因的功能是由蛋白质来执行的,而蛋白质要通过与其他生物分子相互作用来完成其各种生物功能.因此,如果能够快速做出蛋白质在不同时间、空间和不同环境中的相互作用图谱,就会帮助我们了解这些蛋白质的功能,进而了解许多生命活动的机制.目前,用于大规模研...
【关键词】 蛋白质-蛋白质相作用； 酵母双杂交； 细菌双杂交；
【中文期刊】 王景林 杨利敏 等 《军事医学科学院院刊》 2004年28卷4期 308-310页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的: 制备抗A型产气荚膜梭菌毒素α(CPTα)单克隆抗体(mAb)并鉴定其生物学特性.方法:利用工程菌株E.coli M15/pQE30-CPTα表达的重组A型CPTα带有6个组氨酸(6×his)标签的特性, 经Ni-NTA螯合亲和层析方...
【中文期刊】 张文红 刘新平 等 《第四军医大学学报》 2002年23卷8期 716-720页 ISTICCA
【摘要】 目的制备高效价的NDR2抗体. 方法构建pRset-A-ndr2, pGEX-4T-1-ndr2-a和pGEX-4T-1-ndr2-b三种重组表达质粒,并分别在大肠杆菌中诱导表达相应的融合蛋白;用全长GST-NDR2蛋白免疫兔,然后用GST...
【中文期刊】 陈兵 刘为纹 等 《世界华人消化杂志》 1999年7卷9期 745页 ISTICCA
【摘要】 <篇首> 尽管已意识到端粒酶可能是目前已知特异性最好的肿瘤标志,但端粒酶的临床应用迄今未能得以普及推广,其原因之一是人端粒酶的蛋白组份仍不十分清楚.为此,我们利用端粒酶核糖核蛋白的特性,尝试建立一种亲和纯化人端粒酶的手段.以期获得具有完整活性的...
【中文期刊】 王青松 胡晓倩 《实验技术与管理》 2014年31卷5期 38-41页
【摘要】 该文以绿色荧光蛋白FRP为实验对象,通过设计原核蛋白表达、镍柱亲和纯化、荧光光谱分析、SDSPAGE电泳分离、Western blotting免疫印迹及蛋白质质谱鉴定等内容的生物化学综合实验,提高学生的生物化学实验技能.荧光光谱分析表明,纯...
【关键词】 绿色荧光蛋白； 亲和纯化； SDS-PAGE电泳；
【中文期刊】 冯碧云 黄辉洋 等 《厦门大学学报（自然科学版）》 2011年50卷1期 123-126页
【摘要】 用3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)法将人工合成的4种不同来源的促性腺激素释放激(GnRH)(即章鱼GnRH、海鞘GnRH-Ⅰ、七鳃鳗GnRH-Ⅰ和七鳃鳗GnRH-Ⅲ)分别与匙孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原,免疫新西兰大白兔...
【中文期刊】 闫清华 康静 等 《动物医学进展》 2011年32卷5期 45-48页
【摘要】 为纯化黄粉甲抗冻蛋白AFP84a,对已构建的重组大肠埃希菌TBI诱导表达,对诱导温度、初始菌浓度、IPTG浓度及诱导时间等表达条件进行优化后,纯化该重组蛋白.通过分析比较,建立了目的蛋白表达的最优条件:温度25℃,初始菌OD600=0.6;...
【中文期刊】 胡婧 程钢 等 《华中农业大学学报》 2010年29卷3期 257-261页
【摘要】 以常规基因重组技术,将orf216基因克隆入含有内含肽标签的原核表达载体pTYB1中,得到重组质粒pTYB1-orf216,经鉴定正确后,转化至大肠杆菌ER2566感受态细胞,15℃下0.8 mmol/L IPTG诱导15 h后,SDS-P...
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