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【中文期刊】 卢丹妮 洪沛雄 等 《现代食品科技》 2023年39卷2期 170-179页
【摘要】 该研究以公认安全(Generally Recognized as Safe,GRAS)的谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)为宿主,构建高产紫色杆菌素的重组菌株.利用谷氨酸棒杆菌天然大质粒pTET3的复制与分...
- 概要：
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【中文期刊】 钟万芳 蔡平钟 等 《遗传》 2003年25卷1期 71-72页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 以苏云金芽孢杆菌库斯塔克亚种、猝倒亚种及以色列亚种为材料,介绍了低拷贝大型质粒DNA的小量提取方法,该法采用PEG 6000进行质粒纯化,省略了苯酚和氯仿抽提过程.实验证明,该法结果稳定,提取的质粒DNA产量和质量均符合大多数分子生物学实验...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 张国庆 朱书 等 《畜牧兽医学报》 2009年40卷9期 1350-1357页
【摘要】 本研究旨在建立猪脑心肌炎病毒(EMCV)的感染性克隆技术.利用RT-PCR分3段扩增出脑心肌炎病毒BJC3株的全基因组cDNA,依次克隆至低拷贝质粒pWSK29,构建出全长质粒pWSKBJC3/w,经体外转录和转染BHK-21细胞拯救病毒....
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 焦迪 王瑞 等 《中国动物检疫》 2025年42卷9期 69-76页
【摘要】 A型牛轮状病毒(BRV-A)是引起牛腹泻的重要病原之一,对养牛业危害最大.为建立一种针对BRV-A的快速、高通量、低成本检测方法,根据BRV-A的VP6基因保守区设计特异性引物,建立了检测BRV-A的SYBR Green Ⅰ RT-qPCR...
【关键词】 牛轮状病毒；SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR；检测方法；
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 王志军 袁正宏 等 《生物化学与生物物理进展》 2003年30卷6期 863页SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 <篇首> ColE1型质粒DNA是独立于染色体之外能自主复制的一类双链DNA分子,用ColE1型质粒作DNA免疫或基因治疗载体,可以克服如同pSC101质粒载体的低拷贝,低产量的缺点,是目前最广泛使用的一种DNA载体. 预计到2010年这方面产...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 朱慧 王哲颖 等 《中国实验血液学杂志》 2019年27卷3期 747-752页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:利用微滴式数字PCR技术检测外泌体中PML-RARA融合基因表达水平.方法:使用基于Taqman探针法的ddPCR技术,建立可检测长型和短型PML-RARA融合基因转录本的方法.以PML-RARA阴性细胞株HL-60细胞的RNA逆转录...
【关键词】 微滴式数字PCR；急性早幼粒细胞白血病；外泌体；
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【中文期刊】 张强 丁昕 等 《中国血吸虫病防治杂志》 2019年31卷5期 468-473页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立一种可用于华支睾吸虫检测的重组酶介导的等温核酸扩增方法(RAA).方法 以华支睾吸虫18S rRNA基因序列作为靶序列,设计、合成、筛选特异性引物和探针,建立快速检测华支睾吸虫的荧光RAA检测方法.分别以含不同拷贝数DNA片段的重...
- 概要：
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【中文期刊】 赵东岳 黄翠琴 等 《中国人兽共患病学报》 2013年29卷5期 476-481页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 选取弓形虫基因组中高度保守的多拷贝基因529 bp重复序列、ITS-1序列和B1基因作为real-timePCR检测的靶基因,建立检测弓形虫的三重SYBRGreenⅠ实时荧光定量PCR的检测方法并且与ELISA检测方法进行比较.方法 ...
- 概要：
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【中文期刊】 吴创鸿 陆坚 等 《中国抗生素杂志》 2007年32卷9期 569-571页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 了解深圳地区阴沟肠杆菌中qnrA基因的流行情况、基因定位及其介导喹诺酮耐药性产生的机制.方法 收集临床分离的阴沟肠杆菌45株,采用PCR法结合测序的技术筛查qnrA基因,大质粒提取技术、Southern杂交和接合传递试验进行质粒定位,...
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【中文期刊】 李秋荣 邢文革 等 《中国艾滋病性病》 2007年13卷6期 521-524页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探索用滤纸片作血液样本的载体,建立一种简单、经济、敏感的滤纸片干血斑艾滋病病毒Ⅰ型(HIV-1)DNA检测方法.解决HIV-1感染者全血样本采集、运输和储存过程中存在的实际困难.方法 首先用滤纸片FTA卡收集血液制成滤纸片干血斑,处理...
【关键词】 滤纸片干血斑；艾滋病病毒Ⅰ型DNA；套式聚合酶链反应；
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【中文期刊】 陈悦悦 彭芝兰 等 《四川大学学报（医学版）》 2007年38卷3期 443-446页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 探讨实时荧光定量PCR和RT-PCR检测HPV-16 E6和E7基因的实验方法.方法 将制备的含HPV-16 E6和E7基因的质粒作为标准品,建立实时荧光定量PCR和RT-PCR方法,分别对3种宫颈癌细胞株进行HPV-16 E6和E7...
- 概要：
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【中文期刊】 司红丽 王健伟 等 《病毒学报》 2006年22卷3期 166-171页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 诺如病毒是世界急性胃肠炎的重要病原之一.为加强其控制,通过序列比对设计出针对GGⅡ型诺如病毒保守序列的特异性引物与探针,建立了TaqManReal-timeRT-PCR方法.结果显示,此方法对诺如病毒核酸检测高度特异,与轮状病毒、腺病毒、甲...
【关键词】 Real-time RT-PCR；人类杯状病毒；诺如病毒；
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【中文期刊】 邹亚伟 封志纯 等 《南方医科大学学报》 2006年26卷4期 466-468页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的建立一种比现有方法敏感、准确性高、重复性好的人类mdr1基因的新型实时荧光定量PCR检测新方法.方法用Primer Express2.0引物设计软件设计引物和MGB探针,以TaqMan-MGB探针技术为基础,运用Taq Man-MGB探...
【关键词】 Taq Man-MGB探针；实时荧光定量PCR；mdr1；
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【中文期刊】 徐子勤 龚莉桂 等 《生物工程学报》 2004年20卷1期 120-125页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过基因枪粒子轰击和草丁膦(PPT)选择获得可育的玉米转基因植株,并分析了外源基因在转化体中的拷贝数与启动子之间的关系.用玉米Ubi-1启动子驱动外源基因,玉米转化体中外源基因的拷贝数较低;可能的原因为Ubi-1启动子通过与其内部同源序列发...
【关键词】 玉米Ubi-1启动子；基因枪；转基因植物；
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【中文期刊】 廖翔 何景龙 等 《生物技术通讯》 2018年29卷5期 677-682页ISTICCA
【摘要】 目的:建立犬细小病毒(CPV)可视化环介导等温扩增(LAMP)检测方法.方法:比对77个不同犬细小病毒全基因组数据,从中找出一段433 bp的高度保守序列作为检测对象,通过基因合成得到含该序列的质粒,制备1×103、1×102、1×101拷...
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【中文期刊】 陶薇 傅婷 等 《医学研究杂志》 2016年45卷2期 51-54页ISTIC
【摘要】 目的 建立一种高敏感度的检测痕量单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)DNA的实时荧光定量PCR方法,为针对HSV-2潜伏感染的治疗性疫苗和抗病毒药物疗效提供一个评价方法.方法 依据HSV-2糖蛋白D(gD)基因序列,使用序列比对软件,选取其保守区...
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【中文期刊】 冯宇 杨晓宇 等 《中国预防兽医学报》 2019年41卷2期 156-160页
【摘要】 为建立同时快速简便地检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与非典型瘟病毒(APPV)两种病毒的方法,本研究根据GenBank中登录的PRRSV、APPV的基因序列,选取PRRSV的ORF2基因和APPV的NS2基因分别设计特异性引物,通过...
【关键词】 猪繁殖与呼吸综合征病毒；非典型瘟病毒；双重RT-PCR；
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【中文期刊】 姜睿姣 周丽军 等 《中国预防兽医学报》 2019年41卷5期 489-494页
【摘要】 为建立副猪嗜血杆菌(Hps)、多杀性巴氏杆菌(Pm)的双重荧光定量PCR检测方法,本研究基于Hps的OmpP2基因,Pm的PlpE基因设计两对特异性引物及探针,通过对反应条件优化,建立了一种同时检测Hps及Pm的双重荧光定量PCR方法.该方...
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【中文期刊】 王建华 王玉玲 等 《中国动物检疫》 2019年36卷1期 76-79页
【摘要】 为实现袋鼠临床样本中疱疹病毒1型(Macropodid herpesvirus 1,MaHV-1)的出入境快速检测,基于MaHV-1的gB基因序列设计特异引物和TaqMan探针,建立了一种MaHV-1荧光PCR检测方法.试验结果显示,该方法...
- 概要：
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【中文期刊】 郭变琴 黄学梅 等 《重庆医学》 2014年18期 2323-2325页MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的：建立检测人AnnexinⅡmRNA水平的SYBR Green实时荧光定量PCR方法，并用其测定人乳腺癌细胞MDA-MB-231和 MCF-7中AnnexinⅡmRNA水平。方法根据人AnnexinⅡ mRNA的保守序列设计特异性引物，...
【关键词】 乳腺肿瘤；AnnexinⅡ；SYBR Green实时荧光定量PCR；
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【中文期刊】 陈娟 李雷 等 《检验医学》 2012年27卷5期 400-403页ISTICCA
【摘要】 目的 建立以TaqMan-MGB荧光探针为特点的荧光定量聚合酶链反应(PCR),用于检测人载脂蛋白A5(apo A5)基因.方法 针对人apo A5基因设计特异性引物和TaqMan-MGB荧光探针,以重组克隆质粒pPCR-Script-ap...
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【中文期刊】 刘晓青 《现代医院》 2018年18卷9期 1319-1321页
【摘要】 目的 建立一种快速准确诊断肠道病毒EV71型的实时荧光定量RT-PCR检测方法.方法 参照NCBI公布的EV71基因序列,设计特异性引物及TaqMan探针;构建阳性重组质粒,验证其最低检测拷贝数、重复性及特异性.结果 试验构建的阳性重组质粒...
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【中文期刊】 郭恒 王学林 等 《中国实验诊断学》 2011年15卷7期 1041-1044页ISTIC
【摘要】 目的 构建遗传稳定性良好的沙门氏菌体内诱导型表达载体.方法 以克隆载体pGB2为基础,将沙门氏菌厌氧启动子PnirB和EGFP基因串联,并在其多克隆位点 MCS 下游引入 rrnbT1T2 转录终止序列,构建沙门氏菌低拷贝体内诱导型表达载体...
- 概要：
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【中文期刊】 张萍 王旭国 等 《现代检验医学杂志》 2010年25卷4期 74-75页ISTICCA
【摘要】 目的 通过TaqMan探针结合熔解曲线分析的方法,区分低拷贝HBVDNA检测过程中的非特异性产物,对低拷贝HBVDNA进行准确定量.方法 应用TaqMan探针荧光定量PCR检测900例临床标本,对0～1 000copies/ml的标本直接加...
- 概要：
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【中文期刊】 刘晓明 徐志学 等 《临床检验杂志》 2007年25卷3期 182-184页ISTICCA
【摘要】 目的 研究和评估PCR扩增阻断联合荧光探针检测乙型肝炎病毒(HBV)基因前C区1896位点突变的新方法.方法 根据HBV DNA前C区1896位点的突变设计一系列引物,引物3'末端位于1896位,并与突变模板1896位碱基互补.在引物的倒数...
【关键词】 乙型肝炎病毒；基因1896位点突变；聚合酶链反应阻断试验；
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【中文期刊】 温冬青 赵锦荣 等 《第四军医大学学报》 2006年27卷1期 63-65页ISTICCA
【摘要】 目的: 基于双链嵌合荧光染料SYBR Green I,建立一种快速、灵敏的检测大鼠I型胶原mRNA表达水平的实时逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法. 方法: 提取大鼠肝脏总RNA,RT-PCR扩增I型胶原基因部分片段,将其克隆入pMD1...
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【中文期刊】 王彩霞 冯春燕 等 《中国畜牧兽医》 2015年42卷8期 1935-1942页
【摘要】 为满足贝类寄生虫快速检测需求,本研究根据GenBank中发布的派琴虫ITS序列和包纳米虫18S rRNA序列的保守区域分别设计LAMP扩增引物,分别建立了两种寄生虫的单重LAMP检测方法,进一步对反应体系进行优化,组装成两种寄生虫的双重LA...
【关键词】 贝类寄生虫病；环介导等温扩增反应(LAMP)；检测；
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【中文期刊】 王建昌 王金凤 等 《食品科学》 2015年36卷20期 226-231页
【摘要】 针对大肠埃希氏菌O157:H7 rfbE和Flic靶基因保守序列,设计特异性引物和探针,优化反应体系,并加入内参(internal amplification control,IAC),建立能够实时监控反应过程的荧光定量聚合酶链式反应(po...
【关键词】 大肠埃希氏菌O157；H7；rfbE；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 孙俊颖 刘志成 等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷12期 938-942页
【摘要】 为建立鸡毒支原体(MG)的快速定量检测方法,本研究根据GenBank中登录的MG 16S rDNA基因序列设计了一对引物,以MG基因组DNA为模板扩增其16S rDNA基因片段,并克隆于pMD 18-T载体中,以纯化的重组质粒作为标准品建立...
【关键词】 鸡毒支原体；SYBR Green Ⅰ；荧光定量PCR；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 保雨 聂福平 等 《中国预防兽医学报》 2015年37卷7期 536-540页
【摘要】 为建立一种快速、准确检测流产嗜衣原体(C.abortus) TaqMan-MGB荧光定量PCR方法,本研究根据C.abortus主要外膜蛋白基因的特异保守序列设计引物及探针,并优化反应条件,建立了检测C.abortus的荧光定量PCR方法....
【关键词】 流产嗜衣原体；TaqMan-MGB；荧光定量PCR；
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