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【中文期刊】 党会杰 刘秦 等 《基因组学与应用生物学》 2017年36卷7期 2874-2879页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 PCR片段快速准确的构建到克隆载体是分子生物学实验的关键技术之一.快速高效低背景克隆体系的建立可以显著提高PCR产物的克隆效率及大大缩短克隆时间.本实验室开发出一种在常规条件下进行快速高效PCR连接的克隆体系.本研究将含有ccdB致死基因的...
- 概要:
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- 结论:
【学位论文】 作者:王凡 导师:田兴亚 昆明医学院 昆明医科大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2005年
【摘要】 目的:构建克隆载体,分析隐匿型乙型肝炎病毒S基因的突变情况,构建其原核融合蛋白表达载体,为开发新的HBV疫苗及新的HBsAg检测试剂打下基础。 方法:首先以ELISA法检测乙型肝炎病毒标志物(HBVM),以实时荧光定量PCR(FQ...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【学位论文】 作者:李栋 导师:谭华荣 中国科学院大学 基础医学 遗传学(硕士) 2019年
【摘要】 盐霉素是由白色链霉菌产生的聚醚类抗生素,作为抗球虫和饲料添加剂被广泛应用于畜牧业,最新研究发现,盐霉素具有潜在的抗肿瘤活性。鉴于盐霉素的重要用途,本论文将对白色链霉菌进行理性改造,以期获得盐霉素产量提高的工程菌株。首先利用核糖体工程技术,筛...
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- 结论:
【学位论文】 作者:丁芝 导师:马雪梅 北京工业大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2013年
【摘要】 肺鳞癌作为肺癌发病的常见类型,其发生发展是一个多因素、多基因及多途径改变的复杂过程,虽然从基因和转录水平对其进行了许多成功的研究,但其癌变机制仍不十分明确,尚缺乏有效的用于肺鳞癌早期诊断和预后监测的特异性分子标志物。M13噬菌体是转型寄生于...
- 概要:
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- 结论:
【学位论文】 作者:田亚坤 导师:吴昊 首都医科大学 临床医学 内科学(传染病学)(硕士) 2010年
【摘要】 目的:艾滋病已成为当今世界面临的最严峻挑战之一。HAART疗法的广泛应用,有效控制了病毒复制,降低了病毒载量,但是并不能彻底根除病毒。目前认为,病毒储藏库的存在是HAART不能彻底清除HIV的巨大障碍。病毒储藏库是指在免疫反应和治疗压力下潜...
- 概要:
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- 结论:
【学位论文】 作者:林英 导师:刘平 哈尔滨医科大学 临床医学 眼科学(硕士) 2008年
【摘要】 目的:克隆人缝隙连接蛋白50(Cx50)并构建含Cx50瑾因片段的真核表达载体pEGFP-N1-Cx50。 方法:提取人的基因组DNA,用特异引物进行聚合酶链反应(PCR)得到缝隙连接蛋白50(Cx50)的基因片段,将目的DNA片...
- 概要:
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【学位论文】 作者:陈海英 导师:王乃平 广西医科大学 药学 药理学(硕士) 2006年
【摘要】 [目的]运用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从正常大鼠肝组织扩增出HP450基因,并构建pMD18-HP450重组克隆载体和pLXSN-HP450表达载体,为下一步对HP450基因进行肝癌基因治疗的体内外实验打下基础。 [方法...
【关键词】 细胞色素P450基因 ; 基因克隆 ;
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【学位论文】 作者:劳芳 导师:何大澄 北京师范大学 生物学 细胞增殖调控(硕士) 2005年
【摘要】 本实验利用PCR扩增的方法含有eIF4B完整序列的cDNA基因,并通过克隆载体pGEM-5Z再连接到原核表达载体pET-30a上,真核的PCR扩增产物则与pCMV5-N-HA表达载体连接,得到了重组质粒pET-30a-eIF4B和pCMV5...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【学位论文】 作者:蔡秀清 导师:周鹏 华南热带农业大学 海南大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2005年
【摘要】 本研究采用RT-PCR技术从新鲜苦瓜叶片中获取成熟肽基因编码区cDNA(命名为α-MMCC);将扩增得到的基因片段插入克隆载体pGEM-TEasyVector中,酶切鉴定正确后进行序列测定,结果证明得到的α-MMCC与预计的核苷酸序...
- 概要:
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- 结论:
【学位论文】 作者:张际绯 导师:金连弘 哈尔滨医科大学 基础医学 人体解剖与组织胚胎学(博士) 2005年
【摘要】 本文对Schwann细胞培养纯化与NRG1转染表达进行了研究。文章采用坐骨神经体内预变性,启动成体SCs分裂增殖活力;应用差速培养加双抗方法,不用任何促进SCs增殖的细胞因子和抑制成纤维细胞的药物,在短时间培养出高纯度、高密度,有生物学活性...
- 概要:
- 方法:
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【学位论文】 作者:田永强 导师:覃重军 赵国屏 中国科学院上海生命科学研究院植物生理生态研究所 中国科学院上海生命科学研究院 生物学 微生物学(博士) 2005年
【摘要】 本研究分为两个部分,第一个部分研究是从200株稀有放线菌中检测线型染色体和染色体外遗传因子,检测到大多数稀有放线菌的染色体为线型染色体,同时在稀有放线菌中检测到7个环型质粒、两个线型质粒、一个噬菌体。对链孢囊菌(Streptospora.....
- 概要:
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【学位论文】 作者:陈华华 导师:欧阳静萍 武汉大学 基础医学 病理学与病理生理学(硕士) 2005年
【摘要】 目的:克隆人α-防御素-1(HNP-1)的cDNA,并且构建其真核表达载体。 方法:分离获得人外周血中的多形核粒细胞,提取粒细胞中的总RNA,反转录为cDNA,将cDNA作为模板,采用PCR的方法,以设计的P1/P1引物对其进行扩.....
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【学位论文】 作者:李广林 导师:郭蔼光 西北农林科技大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2004年
【摘要】 植物甜蛋白是指自然界中存在的具有甜味或可以引起甜味产生的蛋白质,迄今为止已发现了7种,包括嗦吗甜(Thaumatin)、莫奈林(Monellin)、马槟榔(Mabinlin)、神秘果素(Miraculin)、喷塔汀(Pentadin)、库克...
- 概要:
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【学位论文】 作者:于旸 导师:李钰 哈尔滨医科大学 基础医学 遗传学(硕士) 2004年
【摘要】 OPB7-1是该课题组前期工作在肺癌细胞系中获得的存在表达差异的片段.该文通过GenBank数据库检索获得的同源序列设计基因特异性引物,应用RACE方法,从人正常肺组织中调取该片段的3'和5'末端,获得OPB7-1基因在该组织中的全序列.O...
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【学位论文】 作者:张忠东 导师:张树林 西安交通大学 临床医学 内科学(硕士) 2003年
【摘要】 该文旨在研究与HBV的核心启动子的结合肝细胞特异性蛋白质因子,以进一步了解HBV的致病机理.该研究应用噬菌体表面展示技术,以HBV核心启动子(HBV core promoter)的聚合酶联反应产物作为固相筛选分子,对噬菌体人肝细胞cDNA文...
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【学位论文】 作者:李新友 导师:刘淼 西安交通大学 临床医学 外科学(博士) 2003年
【摘要】 目的:研究人骨形态发生蛋白7(humanBoneMorphogeneticProtein7,hBMP7)成熟区及全长cDNA的克隆方法并进行测序及序列分析.利用基因工程技术构建人骨形态发生蛋白7重组腺病毒(Recombinant Adeno...
- 概要:
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【学位论文】 作者:张殿昌 导师:许新萍 中山大学 基础医学 遗传学(硕士) 2003年
【摘要】 为深入研究鱼类生长激素和胰岛素样生长因子的生理功能和分子调控机理,该论文以中国重要养殖鱼类鲮为材料,克隆和表达了鲮生长激素和胰岛素样生长因子基因,为深入研究鲤科鱼类生长激素和胰岛素样生长因子的分子调控机理和生理功能打下基础,具体研究内容如下...
- 概要:
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【学位论文】 作者:甘舜进 导师:陆东风 胡朝晖 广州医学院 广州医科大学 临床医学 内科学(硕士) 2003年
【摘要】 目的通过构建人纤溶酶原kringle1-3功能区基因非融合原核表达载体,诱导表达并纯化具有生物活性的kringle1-3蛋白,为该蛋白在病理性血管疾病方面的进一步研究提供材料.结论:1.利用PCR技术构建了重组克隆载体pUC/K1-3,并经...
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【学位论文】 作者:王群 导师:倪嘉缵 中国科学院长春应用化学研究所 生物学 生物无机化学(博士) 2003年
【摘要】 内皮抑素具有抑制内皮细胞增殖和抗肿瘤新生血管生成活性,在小鼠实验中对多种肿瘤取得了有效的结果,有望成为一种新型抗肿瘤药物.该论文从基因的获取到在大肠杆菌中的高效表达,系统地研究了重组内皮抑素的全过程,并对其体内、体外的生物学活性及多种光谱学...
- 概要:
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【学位论文】 作者:陈伟民 导师:黄俊生 华南热带农业大学 海南大学 作物学 作物遗传与育种(硕士) 2003年
【摘要】 Crb-AST<,3>是从蟋蟀(Gryllus bimaculatus)脑中分离的一种咽侧体抑制素,体外实验显示它强烈抑制昆虫咽侧体合成保幼激素.这个多肽含有13个氨基酸残基,一级结构为N-GKRAGGRQYGFGL.蟋蟀AST基因共编码1...
【关键词】 神经肽 ; Grb-AST<,3> ;
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【学位论文】 作者:彭夫望 导师:张爱华 王志友 武汉生物制品研究所 生物学 病原生物学(硕士) 2003年
【摘要】 该研究从分泌抗CD71单克隆抗体的杂交瘤细胞WuT9中提取总RNA,采用OligodT为逆转录引物逆转录合成cDNA第一链,然后分别采用针对V<,L>和V<,H>框架区的PCR引物扩增出V<,H>(重链可变区)和V<,L>(轻链可变区)DN...
【关键词】 抗CD71单克隆抗体 ; 单链抗体 ;
- 概要:
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【学位论文】 作者:张凤丽 导师:孟红 山东省医学科学院 生物学 病原微生物学(硕士) 2003年
【摘要】 该研究从优选载体、优选目的基因入手,构建了重组Ad乙肝疫苗<'[2.7]>.这是一种新型的基因工程载体疫苗(vectored vaccine),利用非致病微生物(Ad)作为载体,将HBV的保护性抗原基因片段preS2/S重组到Ad基因组中,...
- 概要:
- 方法:
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【学位论文】 作者:王凤泽 导师:王保莉 郭蔼光 西北农林科技大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2003年
【摘要】 胰岛素样生长因子(insulin-like growth factors,IGFs)是体内重要的生长因子,其由两种相关多肽组成:IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ.大量研究表明,它们对组织细胞的增殖、分化、凋亡,机体的生长发育及肿瘤的发生发展起重要的调...
【关键词】 人胰岛素样生长因子Ⅰ ; 人胰岛素样生长因子Ⅱ ;
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【学位论文】 作者:方唯意 导师:曹建国 南华大学 药学 药理学(硕士) 2002年
【摘要】 目的:构建人内皮抑素(endostatin)克隆载体及重组原核表达载体并利用大肠杆菌原核表达系统表达获得重组人Endostatin,探讨人Endostatin作为一种血管形成抑制剂的生物学活性.结论:1.成功地构建了重组pGEM-T-Eas...
- 概要:
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【学位论文】 作者:肖飞 导师:魏于全 四川大学 临床医学 肿瘤学(硕士) 2002年
【摘要】 目的:探讨vasostatin基因表达对恶性实体肿瘤生长的抑制作用及利用vasostatin基因进行抗肿瘤基因治疗的可行性,为vasostatin的抗血管生成治疗提供依据.方法:1.PCR扩增人骨骼肌vasostatin cDNA.2.采用...
【关键词】 vasostatin ; 新生血管形成 ;
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【学位论文】 作者:苏彩霞 导师:才学鹏 中国农业科学研究院研究生院兰州兽医研究所 中国农业科学院兰州兽医研究所 兽医学 预防兽医学(硕士) 2002年
【摘要】 首先用限制性内切酶将猪囊虫磷蛋白基因(P2)从重组克隆载体pGEM-P2中切下后与相应限制性内切酶酶切的穿梭载体pPIC9K相连接,构建了重组表达载体pPIC9K-P2,转化大肠杆菌JM109,筛选阳性克隆.经测序证明,基因序列完全正确,从...
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【学位论文】 作者:陈文吟 导师:徐安龙 中山大学 生物学 生物化学与分子生物学(硕士) 2002年
【摘要】 该文在国内外首次用基因工程方法制备抗HBsAg单链抗体与白细胞介素2融合蛋白.该实验通过重叠PCR,将该室克隆的抗HBsAg单链抗体与IL-2重组,构建抗体融合蛋白基因ScFv-IL2,插入克隆载体pGEM7zf(+),测序鉴定后,将抗体融...
- 概要:
- 方法:
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【学位论文】 作者:沈弢 导师:余模松 王志友 武汉生物制品研究所 生物学 病原生物学(硕士) 2002年
【摘要】 该研究从分泌抗CD25单克隆抗体的杂交瘤细胞WuTac中提取总RNA,逆转录合成cDNA第一链,然后分别采用针对V<,L>和V<,H>相应的PCR引物扩增出V<,H>和V<,L>DNA片段,其中在V<,L>的下游引物和V<,H>的上游引物含...
【关键词】 抗CD25单克隆抗体 ; 基因克隆 ;
- 概要:
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【学位论文】 作者:刘建香 导师:苏旭 刘树铮 吉林大学 基础医学 放射医学(硕士) 2001年
【摘要】 该文根据目前对PSP94研究的最新资料,设计了PSPcDNA的正向和反身两条引物,正向引物带有EcoRI位点,反向引物带有BamHI位点.采用RT-PCR技术,从正常、增生、癌变的前列腺组织中成功地获得了人PSP94和PSP57 cDNA,...
- 概要:
- 方法:
- 结论:
【学位论文】 作者:刘铁刚 导师:李青山 吉林大学 药学 微生物与生化药学(硕士) 2001年
【摘要】 我们通过RT-PCR从白血病细胞中培养物中克隆到caspase3基因,将caspase3基因连入克隆载体进一步扩增后,经DNA序列测定,证明所得到的基因序列与文献报道一致,之后将caspase3基因插入到pGEX-6p表达载体中,经IPTG...
【关键词】 凋亡 ; 蛋白酶caspase-3 ;
- 概要:
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