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【中文期刊】 王清龙 王瑞宁 等 《河南农业科学》 2023年52卷3期 127-134页
【摘要】 为制备猪伪狂犬病病毒(PRV)gE重组蛋白并评估其抗原活性,将优化的PRV gE基因胞外区插入真核表达载体pCMV并在其C端加入Hexa-His标签,构建真核表达质粒pCMV-gE;将重组质粒转染HEK293F细胞,Dot blot鉴定转染...
【中文期刊】 王维荣 刘爱民 等 《生物化学与生物物理进展》 2000年27卷4期 407-411页 SCIISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 青岛海葵中存在两种具有增强心肌收缩功能的多肽类毒素(分别命名为Ap-QD1和Ap-QD2).通过分析已经得到Ap-QD2的氨基酸序列,按照毕氏酵母的偏爱密码子设计并合成了Ap-QD2的cDNA.将合成cDNA序列通过PCR扩增及一系列分子克...
【关键词】 青岛海葵强心活性多肽； 毕氏酵母； 分泌表达；
【中文期刊】 王关林 易庆 等 《遗传学报》 2003年30卷2期 97-102页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 通过紫外线突变诱导获得了对感染致病菌具有显著抑菌作用的枯草芽孢杆菌突变株WYBS2001.采用PCR技术人工合成了175 bp的人表皮生长因子(hEGF)的基因片段,并引入Pst Ⅰ、HindⅢ酶切位点、起始密码子及pUS186载体信号肽序...
【中文期刊】 李向茸 王兴陇 等 《生物学杂志》 2017年34卷5期 24-28页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 通过构建人白细胞介素7的重组真核表达载体,转染HEK293细胞,实现IL-7在HEK293细胞中的稳定分泌表达,为生产试剂级的IL-7奠定基础.从质粒pLV-CMV-EF1-GP-rIL-7中扩增人IL-7全长基因,并将其构建于pcDNA3...
【中文期刊】 杜旭召 杨豪 等 《中国骨质疏松杂志》 2016年22卷11期 1375-1379,1385页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究白芍总苷(TGP)对人骨关节炎软骨细胞(HOCs)增殖、凋亡、分泌表达的影响及其作用机制,为白芍总苷在骨关节炎洽疗方面提供初步的实验依据.方法 组织块法培养原代人骨关节炎软骨细胞;TGP处理人骨关节炎软骨细胞并培养12、24和48...
【中文期刊】 孙楠 张荣光 等 《郑州大学学报（医学版）》 2016年51卷4期 478-481,482页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的：构建分泌表达幽门螺杆菌 lpp20基因的重组乳酸乳球菌菌株，并鉴定其免疫活性，为研究安全高效的幽门螺杆菌口服疫苗奠定基础。方法：采用 PCR 法从幽门螺杆菌基因组 DNA 中扩增 lpp20基因，将 lpp20先与 T 载体（pMD1...
【中文期刊】 卞曙光 陈华新 等 《水生生物学报》 2010年34卷6期 1091-1096页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 原核重组表达的凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)溶菌酶蛋白主要以包涵体形式存在,经变性和复性处理后活性仍较差.研究将凡纳滨对虾溶菌酶基因(Lvlyz 基因)克隆至毕赤酵母分泌型表达载体pPIC9K中,电击转化毕赤酵母 G...
【中文期刊】 苏曼曼 陈月 等 《中国老年学杂志》 2009年29卷7期 841-843页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 在毕赤酵母中高效表达重组人载脂蛋白E3(rhApoE3),制备与天然hApoE3具有相同结构和活性的rhApoE3.方法 用RT-PCR法自人肝组织RNA克隆hApoE3的cDNA,构建真核分泌型表达载体pPICZα/hApoE3.经...
【中文期刊】 张红 张改平 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2008年24卷3期 260-262页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的: 构建重组载体pcDNA-λ并在COS7细胞分泌表达鸡Igλ轻链, 制备抗鸡Igλ轻链的单克隆抗体(mAb).方法: PCR扩增带有信号肽的鸡Igλ轻链基因, 限制性酶切消化后, 定向克隆于真核表达载体pcDNA3, 构建具有6×Hi...
【中文期刊】 吴琛 单耀军 等 《生物工程学报》 2008年24卷4期 558-562页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将人胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)的cDNA片段亚克隆入pSectagA载体,构建真核分泌型表达载体pSectag-IGFBP3.采用脂质体转染的方法将真核表达载体转染人肾癌786-O细胞,转染48 h后用免疫印迹法检测IGF...
【关键词】 胰岛素样生长因子结合蛋白3； 真核分泌表达； 人肾癌细胞；
【中文期刊】 周鹤峰 邵敏 等 《中国生物工程杂志》 2008年28卷3期 20-24页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用毕赤酵母系统表达有活性的人单链白细胞介素12(hscIL-12),PCR法从质粒pBI121-IL-12中扩增hscIL-12基因,经酶切、连接构建重组表达载体pPIC9K-hscIL-12,SacI线性化后,PEG1000法转化毕赤酵...
【中文期刊】 孙玉成 周凤秋 等 《生物工程学报》 2008年24卷9期 1620-1624页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 应用重叠延伸PCR方法扩增HIV-1 TAT蛋白转导结构域(PTD)与鼠源神经肽Y(NPY)的融合基因,克隆目的片段并插入酵母表达载体pPICZαA,构建成重组表达质粒pPICZα-PTD-NPY.PCR和酶切鉴定及测序正确后,经限制性内切...
【中文期刊】 沙建平 薛耀明 等 《南方医科大学学报》 2008年28卷7期 1203-1206页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 在毕赤酵母中分泌表达具有生物学活性的重组人胰岛新生相关蛋白(rhINGAP),用于INGAP的生理功能研究和动物试验.方法 通过PCR扩增INGAP基因,插入到重组质粒α/pUC18的α因子信号序列的Xho Ⅰ和EcoR Ⅰ酶切位点处...
【中文期刊】 邓晓洁 胡宗利 等 《中国组织工程研究与临床康复》 2008年12卷40期 7884-7887页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:RANTES是典型的趋化性细胞因子,参与很多炎症反应以及器官移植免疫排斥反应.从天然组织中分离RANTES数量有限,难以满足对其生物学功能研究和临床应用的需要;运用基因工程方法生产RANTES具有一定的应用价值.目的:观察人体趋化因子...
【中文期刊】 高雯 吴远征 等 《微生物学报》 2008年48卷2期 239-243页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 根据从GenBank中检索到的木霉菌β-1,3-葡聚糖酶基因序列设计引物,以高产β-1,3-葡聚糖酶菌株--绿色木霉LTR-2的cDNA为模板,采用PCR方法扩增得到内切β-1,3-葡聚糖酶基因(glu).将glu克隆至载体pMD18-T上...
【中文期刊】 王秀青 苏春霞 等 《微生物学报》 2007年47卷1期 75-78页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 根据抗菌肽天蚕素A(cecropinA,CA)N端第1～7个氨基酸残基,马盖宁(magainin,M)N端第2-12个氨基酸残基,以毕赤酵母偏爱的密码子设计合成了杂合肽CA(1～7)-M(2～12)基因,同载体pPICZα-A连接后转化Pi...
【关键词】 杂合抗菌肽CecA-Mag； Pichia pastoris； 分泌表达；
【中文期刊】 王蒙 杨媛 等 《第三军医大学学报》 2007年29卷6期 494-497页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 研究在毕赤酵母(Pichia Pastoris)系统中人TALL-1基因的分泌表达,获得具有生物活性的重组TALL-1.方法 将人TALL-1基因插入含AOX1启动子和α分泌信号肽序列的酵母表达载体pPIC9K中,用Sac Ⅰ将重组质...
【中文期刊】 吴晓萍 曾耀英 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷3期 1-5页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 将PCR扩增得到的人角质细胞生长因子(hKGF)基因片段插入穿梭载体pAdTrack-CMV,产生重组质粒pAdTrack-CMV-hKGF,经Pme Ⅰ线性化后,通过电转法导入含腺病毒骨架质粒pAdEasy-1的大肠杆菌BJ5183进行同...
【中文期刊】 张卉 袁其朋 《生物工程学报》 2007年23卷3期 381-385页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据已知hepeidin氨基酸序列,参照毕赤氏巴斯德酵母(Pichia pastoris)密码子偏好性,设计合成了hepcidin目的基因.所合成的hepcidin基因全长96bp,其5'端引入KEX2基因产物(Kex2)的特异性识别位点序...
【中文期刊】 陈俊杰 孔祥平 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷6期 22-26页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 肝再生增强因子(ALR)是一类胞源性肝细胞生长因子.为在毕赤酵母中分泌表达人肝再生增强因子(rhALR),以色谱法分离纯化后进行体外活性研究,构建表达载体pPICZαA-ALR,经电穿孔转入毕赤酵母中,用0.5%甲醇诱导表达;重组酵母培养上...
【中文期刊】 马江涛 卢曾军 等 《生物工程学报》 2007年23卷3期 540-545页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 用设计的特异引物,扩增得到了N-端带有6×His编码序列的口蹄疫病毒完整3ABC基因序列,并将其亚克隆入带有蜂毒溶血肽序列的穿梭质粒pMelBac-B中,构建了重组质粒pMel-3ABC.将该重组质粒与杆状病毒骨架DNA Bac-N-Blu...
【中文期刊】 牛明福 李翔 等 《生物工程学报》 2007年23卷3期 418-422页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了获得抗菌活性较强的抗菌肽,将几种抗菌肤串联起来在毕赤酵母中表达,并比较其与单独抗菌肽的抑菌活性.以GenBank中的Protegrin-1(PC,-1)、Scorpion Defemin(SD)、Metalnikowin-2A和Shee...
【中文期刊】 王丁丁 包晓群 等 《中国老年学杂志》 2007年27卷8期 720-722页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 经分步整合法在巴氏毕赤酵母中表达人抗狂犬病毒全分子抗体.方法 分别构建人重链和轻链抗体表达质粒,以分步整合法电转化X33酵母菌,甲醇诱导表达后进行ELISA筛选及Western blot分析.结果 SDS-PAGE、Western b...
【中文期刊】 李雪莲 马一君 等 《郑州大学学报（医学版）》 2007年42卷1期 127-130页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的:探讨酿酒酵母中人铜锌超氧化物歧化酶(hCu/Zn-SOD)的分泌表达.方法:采用RT-PCR技术从人胃总RNA中分离扩增hCu/Zn-SOD的cDNA,与酿酒酵母交配因子(MF)α信号肽编码序列融合,将融合基因插人大肠杆菌-酵母细胞穿...
【关键词】 人铜锌超氧化物歧化酶； 酿酒酵母； 分泌表达；
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