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【中文期刊】 陈继业 黄佳 等 《中国药科大学学报》 2010年41卷3期 283-288页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 表柔红霉素是抗肿瘤药表阿霉素的半合成前体.通过中断dnmV基因,并将酮基还原酶aveBVI基因导入,可以将柔红霉素产生菌改造成表柔红霉素产生茵.本研究通过此方法得到了产表柔红霉素的基因工程茵mHJ-02-30-1,在此基础上构建柔红霉素生物...
【中文期刊】 丁晓明 张霓 等 《生物工程学报》 2002年18卷4期 431-437页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 地中海拟无枝菌酸菌U32是力复霉素SV的工业产生菌,其遗传操作一直是一个难题.在该菌株DNA高效电转化的基础上,利用同源重组的原理,建立了地中海拟无枝菌酸菌染色体的基因置换/中断系统.通过大肠杆菌重组质粒pDK110构建、转化及两步重组筛选...
【中文期刊】 杨静芬 乔战龙 等 《生物信息学》 2018年16卷3期 143-147页 ISTIC
【摘要】 基因置换,又称基因替代作用,它指的是遗传信息单向的从一个序列向其同源序列传递的过程.近年来,人们对遗传重组的发生机制、功能及影响有了新的认识,尤其是发现"重组"造成的基因置换远超过以前认识.与遗传重组不同,基因置换有可能改变等位基因频率,搅...
【中文期刊】 李熙鸿 熊珍玉 等 《国际输血及血液学杂志》 2006年29卷2期 101-104页 ISTICCA
【摘要】 基因治疗的目的是纠正引起病变的突变基因.采用基因添加策略的整合型病毒载体基因治疗腺苷脱氨酶缺乏严重联合免疫缺陷病、X连锁严重联合免疫缺陷病和血友病A等已经取得了重大突破.但由于随机整合存在抑癌基因失活或原癌基因激活的潜在危险,因此许多学者对...
【中文期刊】 李杰 曹宇婷 等 《东北农业大学学报》 2013年2期 53-58页
【摘要】 以中性乳糖酶生产菌脆壁克鲁维酵母为材料,构建以kan基因为筛选标记、以脆壁克鲁维酵母乳糖酶基因上游调控区为同源臂的质粒pPkan.将质粒pPkan电击转化脆壁克鲁维酵母,对受体菌生长时期、电场强度、电击后培养时间等条件进行优化.结果表明,以...
【中文期刊】 林辉煌 《海峡药学》 2010年22卷3期 5-8页
【摘要】 基因修复涉及的对象是基因突变原位校正以恢复正常基因功能.具体基因修复虽然有很多限制,但与扩增技术相比还是有很多优点.本文概述了基因修复的优缺点,主要讨论了基于嵌合RNA/DNA寡核苷酸,单链寡核苷酸和小片段同源替换方法.这些方法都有一些共同...
【关键词】 基因修复； RNA/DNA寡核苷酸； 小片段同源置换；
【中文期刊】 许杨 涂追 《食品与生物技术学报》 2007年26卷1期 120-126页
【摘要】 丝状真菌在自然界分布广泛,与人类的生产、生活密切相关.近年来,对于其基因功能的研究取得了较大的进展,一系列转化和基因操作技术已在不同的丝状真菌中得到运用.许多对于工业、农业和医药卫生具有重要意义的丝状真菌已经完成或正在进行全基因组序列测定....
【中文期刊】 郗永义 吴晓洁 等 《现代生物医学进展》 2018年18卷19期 3601-3606,3617页 ISTICCA
【摘要】 目的:利用CRISPR/Cas9基因编辑技术, 实现EGFP基因在CHO细胞ACTB基因座位置定点整合和表达, 建立基于CRISPR/Cas9技术的外源基因定点整合和表达技术.方法:根据CHO细胞β-actin (ACTB) 基因起始密码子...
【关键词】 基因编辑； CRISPR/Cas9； 同源置换；
【中文期刊】 杨天翔 王怡 等 《陕西医学杂志》 2024年53卷12期 1699-1703,1708页 ISTICCA
【摘要】 目的:探究Ras同源基因家族成员A(RhoA)/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号转导通路在膝骨性关节炎软骨组织中的表达及意义.方法:将取自因原发性膝骨性关节炎(KOA)行全膝关节置换术(TKA)去除的30例患者的膝关节软骨组织设为...
【关键词】 膝骨性关节炎； 软骨组织； Ras同源基因家族成员A；
【中文期刊】 崔晓静 杨晓迪 等 《广东医科大学学报》 2023年41卷1期 7-10,15页
【摘要】 目的 构建碱性磷酸酶PHO8与PHO13双基因缺失酵母菌株.方法 依据基因同源重组原理,采用一步基因置换法构建编码Pho8蛋白N端60个氨基酸残基(包括跨膜结构域)缺失的PHO8基因缺失酵母(pho8?60)菌株;线性化载体pRS303-p...
【中文期刊】 田涛 范家玮 等 《中医临床研究》 2023年15卷19期 22-26页
【摘要】 骨性关节炎是一种慢性的关节疾病,其主要病理改变为关节软骨的退行性变和继发性的骨质增生,主要临床症状为关节的僵硬疼痛、活动不利、关节畸形等.近年来其发病率持续上升.目前治疗该病的主要方法是晚期全关节置换术.骨质疏松症是以骨骼密度下降、骨组织微...
【中文期刊】 胥伯勇 阿不都赛米·艾买提 等 《新疆医科大学学报》 2022年45卷9期 947-952页 ISTICCA
【摘要】 目的 研究骨关节炎患者关节软骨中DNA甲基化的特征,分析甲基化基因的表达在骨关节炎发生发展中的作用.方法 收集2018年3月—2019年1月在新疆医科大学附属第一医院关节中心3例接受全膝人工关节置换术的骨关节炎(Osteoarthritis...
【中文期刊】 潘速跃 张成 等 《遗传学报》 2002年29卷2期 105-110页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 为了解Dystrophin基因缺失断裂点和连接片段的序列特点,以分析Dystrophin基因缺失的分子机制,利用巢式反向PCR克隆了1名51号外显子缺失DMD(Duchenne Muscular Dystrophy, DMD)患者的缺失连接...
【中文期刊】 廖军 徐冲 等 《遗传学报》 2000年27卷5期 449-454页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 对7号淀粉酶菌M1033的遗传背景进行分析,建立了其原生质体制备、转化的优化条件.构建了葡萄糖异构酶(GI)结构基因内插入硫链丝菌肽基因(tsr)的置换型同源重组质粒,利用其变性双链片段实现与M1033菌株染色体上基因的同源重组,获得置换型...
【中文期刊】 柳中洋 卢颖 等 《中国医科大学学报》 2018年47卷2期 102-106页 ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 评估细菌人工染色体技术在人巨细胞病毒(HCMV)基因组小片段序列突变中的作用.方法 选取HCMV LUNA基因位于UL80与UL82 2个基因之间的31 bp片段作为突变靶点,用含有同源臂的卡那霉素抗性序列对目的片段进行同源重组置换,...
【中文期刊】 田玺择 吴芳 等 《中国人兽共患病学报》 2013年29卷10期 991-995页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建及鉴定结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16.3基因缺失突变株.方法 体外培养结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株,并提取基因组DNA,扩增Hsp16.3基因两侧序列,分别插入到pKO质粒载体预定位点中,构建Hsp...
【中文期刊】 王各各 李娇娜 等 《中国医科大学学报》 2012年41卷12期 1068-1072页 ISTICPKUCABP
【摘要】 目的 构建可条件性敲除约氏疟原虫ebl基因的打靶载体.方法 以约氏疟原虫基因组DNA为模板,PCR扩增EBL-3U和EBL-5U1、EBL-5U2+EBL.orf同源臂片段,利用MuhiSite Gateway技术,完成若干DNA片段的定性...
【中文期刊】 尹玉竹 张培珍 等 《中山大学学报（医学科学版）》 2012年33卷1期 39-43页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 [目的]研究HBV-DNA高水平孕妇的HBV前S(前S1和前S2)及S区的基因突变模式和基因分型,为从病毒因素探讨HBV母婴传播免疫阻断失败提供实验基础.[方法]选取血清HBsAg阳性且HBV-DNA≥105 IU/mL的孕妇41例,提取血...
【中文期刊】 吴威 郑经成 等 《基因组学与应用生物学》 2010年29卷4期 658-664页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 蜡样芽孢杆菌是土壤中的优势菌,具有作为益生菌的潜在能力,同时它也是条件致病菌,能引起食物中毒等.蜡样芽孢杆菌的多种毒力因子受到多效性调控子(pleiotropic regulator,plcR)的调控,在其条件致病性作用中起着重要作用.真养...
【中文期刊】 许四宏 杜润蕾 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2010年30卷11期 1057-1062页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 构建噬菌体抗体库,筛选抗HIV-1抗体Fab,并对其进行鉴定.方法 采集无症状、HIV-1抗体滴度较高的HIV-1感染者全血,分离淋巴细胞并提取总RNA,经RT-PCR扩增人轻链基因和重链Fd基因.运用噬菌体展示技术,构建噬菌体抗体库...
【中文期刊】 任洪林 张文惠 等 《遗传》 2009年31卷2期 180-185页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 大腹园蛛大壶状腺表达拖丝蛋白新基因的克隆,为进一步研究蛛丝蛋白基因以及人工表达蛛丝蛋白提供参考依据.文章利用"通用方法"即反转录一置换法构建大腹园蛛似(Araneus ventricosus)大壶状腺(Major ampullate gla...
【中文期刊】 朱娟娟 陶美凤 《生物工程学报》 2008年24卷10期 1702-1706页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 以野生型阿维链霉茵NRRL8165为出发菌株,用PCR方法克隆孢子色素基因簇直系同源基因(whiEa)侧翼片段,并构建基因置换载体pHL643.将pilL643跨属接合转移进入阿维链霉菌NRRL8165,通过置换载体和染色体之间的同源双交换...
【中文期刊】 黄平 方苓 等 《中国人兽共患病学报》 2008年24卷12期 1103-1106页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过对人禽流感H5N1毒株PA基因序列的变异分析,揭示毒株PA基因特征、变异与进化.方法 检测广东地区人禽流感H5N1毒株PA基因核苷酸序列,同时检索全球人禽流感H5N1毒株PA基因序列,采用MEGA 4.0软件对检索的人禽流感H5N...
【中文期刊】 黄平 李晖 等 《中国免疫学杂志》 2008年24卷1期 54-58页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:通过对人禽流感H5N1毒株NS基因序列的变异分析,揭示毒株NS基因特征与进化.方法:检测广东地区人禽流感H5N1毒株NS基因核苷酸序列,同时检索全球人禽流感H5N1毒株NS基因序列,采用DNAStar5.0软件对检索的人禽流感H5N1...
【中文期刊】 黄正蔚 刘正 等 《中华微生物学和免疫学杂志》 2008年28卷4期 330-333页 ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 目的 为研究口腔主要致龋菌变异链球菌的种属间密度感应(quorum sensing)相关基因luxS对口腔生态的影响,构建此菌的luxS基因缺失突变株.方法 采用同源重组的方法,利用红霉素耐药基因erm置换变异链球菌基因组中的luxS基因,...
【中文期刊】 黄平 邹丽容 等 《中华传染病杂志》 2007年25卷10期 589-592页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过对人禽流感H5N1毒株神经氨酸酶(NA)基因序列变异的分析,揭示毒株NA基因的变异与进化.方法 检测广东GD-01-06毒株NA基因核苷酸序列,同时对全球各地人禽流感H5N1毒株NA基因进行检索,采用DNAStar 5.0软件对检...
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