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【中文期刊】 王康 崔红利 等 《生物学杂志》 2025年42卷2期 52-58页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 节旋藻(Arthrospira)是一类具有较高经济价值的多细胞丝状蓝藻.然而,节旋藻的遗传改造极为困难,特别是缺乏易于操作的遗传转化技术.为了进一步开发节旋藻基因工程应用潜力,从12株不同的节旋藻中筛选具备自然转化能力藻株并评估同源侧翼序列...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 石禹 包小峰 《医学研究与战创伤救治》 2025年38卷2期 113-119页ISTICPKU
【摘要】 目的 利用同源重组法构建衣原体RNA聚合酶(cRNAP)各亚基质粒,转化入大肠埃希菌中表达蛋白并探讨其在衣原体转录调控中的应用.方法 根据GenBank中的基因序列设计特异性引物,聚合酶链式反应(PCR)扩增cRNAP各亚基的目的基因片段,...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 黄伊 丁信 等 《南方医科大学学报》 2023年43卷5期 859-867页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 基于同源重组方法构建奇异变形杆菌钼酸盐转运蛋白编码基因modABC基因敲除株,并采用电感耦合等离子质谱法检测胞内钼含量,探究modABC基因对奇异变形杆菌生物学特性的影响.方法 利用自杀载体pCVD442通过同源重组方法构建modAB...
- 概要：
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【中文期刊】 施鹏 林晓晨 等 《生物学杂志》 2023年40卷6期 7-11页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 人诺如病毒(norovirus,NoV)在体外难以培养,不宜采用经典疫苗的方式进行疫苗研发,以腺病毒为载体的重组腺病毒疫苗为诺如病毒疫苗的研发提供另一种路线选择.构建表达人GⅡ.4型诺如病毒VP1蛋白的重组腺病毒为该技术路线的疫苗研发奠定基...
- 概要：
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【中文期刊】 王晨玺 邓霞 等 《安徽医科大学学报》 2022年57卷4期 558-563页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建及鉴定携带小鼠PTG基因(NM_016854)的过表达重组腺病毒载体,为深入研究PTG的功能奠定基础.方法 化学合成小鼠PTG基因的编码序列,经聚合酶链式反应(PCR)扩增、酶切,后插入GV314载体(CMV-MCS-3FLAG-...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李蕾 谢建山 等 《中国组织工程研究》 2020年24卷2期 260-264页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:慢病毒载体作为外源性转基因载体己被广泛应用,但是大鼠甘油二酯激酶γ(diacylglycerol kinase γ,DGKγ)基因慢病毒载体未见报道.目的:用同源重组的方法构建大鼠DGK γ慢病毒过表达载体.方法:提取成年SD大鼠脑组...
- 概要：
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【中文期刊】 刘洋 王攀琦 等 《湖北科技学院学报（医学版）》 2022年36卷2期 118-124页
【摘要】 目的 构建肿瘤转移相关基因1短式(MTA1s)原核表达载体并诱导其蛋白表达,为后续MTA1s的相关研究奠定基础.方法 取对数生长期的乳腺癌MCF-7细胞,提取细胞总RNA并反转录成cDNA,并以此为模板扩增MTA1s基因的蛋白编码区.采用一...
- 概要：
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【中文期刊】 陈松林 HONG Yun-Han 等 《动物学报》 2002年48卷4期 519-526页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 应用"Long-PCR"技术, 用6对p53引物从青NFDA6胚胎干细胞基因组DNA中扩增出6个相互重叠的片段,其中最大的片段长达4.5 kb, 这6个PCR片段覆盖了整个p53基因.序列分析表明青NFDA6p53基因长约8.7 k...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 廖岚 况少青 等 《实验生物学报》 2002年35卷3期 163-168页SCIMEDLINEISTICCSCDBP
【摘要】 小鼠基因剔除动物模型越来越广泛地应用于哺乳动物基因功能与疾病的研究.然而每当胚胎干细胞同源重组的效率过低时,鉴定与分离带有定位变异的阳性克隆就会既费力又昂贵.本工作以类固醇受体共激活子基因为例,研究出一种快速鉴定阳性克隆的新方法.在构造重组...
- 概要：
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【中文期刊】 杨超 王朝亮 等 《郑州大学学报（医学版）》 2018年53卷4期 448-452页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:利用打靶载体技术构建小鼠T279基因敲除胚胎干细胞模型.方法:订购含小鼠T279基因的129 BAC质粒和PL452,PCR扩增Retrieving同源臂及loxp-neo-loxp片段,利用PL253质粒进行目的片段的连接,并在EL...
- 概要：
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【中文期刊】 殷正伟 王朝亮 等 《郑州大学学报（医学版）》 2018年53卷4期 511-515页ISTICPKUCA
【摘要】 目的:构建小鼠TSC21基因敲除打靶载体,电转胚胎干细胞(ES细胞)并筛选同源重组阳性克隆.方法:订购含TSC21基因的129 BAC克隆,PCR扩增2对同源臂,利用PL253、PL452质粒进行目的片段的连接和同源重组,构建打靶载体并电转...
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【中文期刊】 王欢 朱化彬 等 《中国畜牧兽医》 2021年48卷9期 3343-3353页
【摘要】 试验旨在利用Tild-CRISPR/Cas9系统介导的同源重组技术制备纯合无角种公牛细胞系.针对控制无角性状的Pc靶位点设计sgRNA,T7E1酶切和测序检测突变效率;以pUC57为骨架连接Pc片段及其两侧约800 bp的同源序列左臂(L)...
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【中文期刊】 娄海伟 林俊芳 等 《中国食品学报》 2021年21卷10期 15-22页
【摘要】 为获得草铵膦完全抑制蛹虫草生长的最小浓度和一种快速构建Bar基因双元载体的方法,本文首先采用浓度梯度法研究草铵膦对蛹虫草的抑制效果,其次采用双接头PCR(DJ-PCR)构建Bar基因表达盒,然后分别采用T4 DNA连接酶法和同源重组法把Ba...
- 概要：
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【中文期刊】 于斌 罗语思 等 《中国人兽共患病学报》 2014年7期 663-668页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的：利用载体-宿主平衡致死系统，将1株香港分离的野生型沙门氏菌（S129）构建为减毒核酸疫苗载体。方法以细菌生化反应和血清学方法鉴定S129为鼠伤寒沙门氏菌；以λ-RED同源重组方法靶向敲除S129株的 asdA基因，并以卡那霉素抗性基因...
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【中文期刊】 陈红霞 赵前锋 等 《安徽医科大学学报》 2013年48卷7期 734-738页ISTICPKUCA
【摘要】 目的 分别构建和包装携带CARex基因、PTDtat基因、CARex和PTDtat融合基因的重组腺病毒.方法 采用基因重组技术将CARex基因、PTDtat基因、CARex和PTDtat融合基因克隆在腺病毒穿梭质粒pAdtrack-CMV,...
- 概要：
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【中文期刊】 李文品 廖玉才 等 《基因组学与应用生物学》 2012年5期 460-466页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 根据拟南芥叶绿体基因组序列设计 PCR 引物,从我国甘蓝型油菜栽培品种 F4叶绿体基因组中克隆了长度为1.5 kb 的 trnI 和 trnA 2个基因序列,核酸序列分析表明它们与拟南芥基因的同源性高达94%和99%,这两个克隆的油菜叶绿体...
【关键词】 油菜(Brassica napus)；叶绿体；同源重组；
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【中文期刊】 刘霞 高鹤 等 《中国实验动物学报》 2011年19卷3期 188-192,后插2页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 摸索出一套副溶血性弧菌基因敲除的可靠方案,副溶血性弧菌致病相关基因的敲除对深入研究其致病机制有重要意义.方法 通过融合PCR技术将目的 基因上下游同源臂融合并克隆到自杀载体pDS132上,将重组质粒转化大肠杆菌S17λpir中,再接合...
- 概要：
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【中文期刊】 徐昀 胡凯 等 《生物技术通报》 2011年8期 1-4,14页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 主要介绍叶绿体功能基因工程改造的目的、受体材料、主要方法、转入外源基因细胞的筛选和鉴定等.
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【中文期刊】 程筱雯 梁俊波 等 《中国医学科学院学报》 2011年33卷6期 632-637页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建含有蛋白激酶Nemo样激酶(NLK)的重组腺病毒载体.方法 采用RT-PCR方法在人胚肾细胞系HEK293T细胞中扩增NLK基因及其突变体K155M、T286V和C425Y,同时在目的基因的C端添加便于蛋白表达检测的FLAG ta...
【关键词】 蛋白激酶Nemo样激酶；重组腺病毒载体；同源重组；
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【中文期刊】 马仕坤 钟立 等 《重庆医科大学学报》 2009年34卷1期 6-8页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建编码小鼠PGC1α基因的重组腺病毒载体.为进一步研究其蛋白功能提供工具.方法:穿梭质粒pAdTrack-CMV-PGC1α线性化后与骨架质粒pAdeasy-1在BJ5183菌中完成同源重组,筛选并提取重组正确的腺病毒质粒,PacI...
- 概要：
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【中文期刊】 魏明敏 邱德文 等 《生物技术通报》 2009年4期 91-94,102页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 构建嗜线虫致病杆菌Xna基因的同源重组载体和建立该细菌的遗传转化体系.扩增嗜线虫致病杆菌XNA基因的左右同源片段及质粒PEASY-T1上的卡那抗性基因Km;利用重叠延伸引物PCR法将这3个片段连接起来,然后将其克隆至自杀性载体PJQ200....
【关键词】 嗜线虫致病杆菌；同源重组载体；重叠延伸引物PCR法；
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【中文期刊】 贾志云 欧晓红 等 《四川大学学报（医学版）》 2008年39卷4期 523-526页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 以复制缺陷的腺病毒为载体,用细菌内同源重组法构建含有人的去甲肾上腺素转运子(human neurotransmitter transporter,hNET)基因的腺病毒载体.方法 利用限制性内切酶Kpn I+Xba I从pCMV5质粒...
【关键词】 腺病毒载体；人去甲肾上腺素转运蛋白；同源重组；
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【中文期刊】 杨林 何永红 等 《四川大学学报（医学版）》 2008年39卷2期 294-297页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 应用AdEasy重组腺病毒载体系统,构建携带小鼠窖蛋白-1(caveolin-1)编码区基因的复制缺陷型重组腺病毒载体 Ad-caveolin-1.方法 将质粒 pTRE2-caveolin-1 中的小鼠caveolin-1编码序列亚...
【关键词】 窖蛋白-1；AdEasy腺病毒载体；绿色荧光蛋白；
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【中文期刊】 李梅 刁飞扬 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2007年23卷11期 1058-1060页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆人NR4A1基因,构建其重组腺病毒载体.方法:用RT-PCR的方法从人卵巢组织中扩增NR4A1基因全长,经T/A克隆后,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV上,构建穿梭质粒pAdtrack-NR4A1.Pme Ⅰ酶切pA...
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【中文期刊】 刘英鹏 田蕾 等 《华中科技大学学报（医学版）》 2007年36卷4期 548-550页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 通过细菌内同源重组方法构建重组腺病毒.方法 质粒pAdTrack酶切线性化后,通过电转化方法转化AdEasier细菌,线性化的腺病毒重组质粒转染293包装细胞后获得重组腺病毒,观察腺病毒感染喉癌细胞Hep-2后的报告基因表达情况及病毒...
- 概要：
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【中文期刊】 田琳 李玉 等 《中国生物工程杂志》 2007年27卷5期 39-44页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 利用分枝杆菌对植物甾醇进行边链降解可产生4-AD(4-烯-雄甾-3,17-二酮)和ADD(1,4-二烯-雄甾-3,17-二酮),ADD由4-AD在C1,2位脱氢酶(ksdD)作用下脱氢产生,这两种物质在化学结构上高度相似,难以分离.首先扩增...
【关键词】 分枝杆菌C12 位脱氢酶；同源重组；打靶载体；
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【中文期刊】 刘英鹏 王国鹏 等 《临床耳鼻咽喉头颈外科杂志》 2007年21卷16期 748-751页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:带绿色荧光蛋白(GFP)基因的重组腺病毒,为利用重组腺病毒介导外源基因转导内耳提供依据.方法:通过细菌内同源重组方法构建携带有报告基因的重组腺病毒(Ad-GFP),将重组腺病毒经耳蜗底回途径导入豚鼠耳蜗鼓阶外淋巴后,观察手术后不同时间...
- 概要：
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【中文期刊】 Xiaowu Pang 付文川 等 《生物工程学报》 2006年22卷3期 492-498页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 黄热疫苗是一种减毒的黄热病毒17D(YF-17D)活疫苗,是现有疫苗中最安全、最有效的疫苗之一,适于发展为疫苗载体.用RT-PCR法扩增出覆盖YF-17D全长基因组的3个cDNA片段:5'cDNA(A)、3'cDNA(B)和中间cDNA(C...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 黄正蔚 刘正 《华西口腔医学杂志》 2006年24卷1期 70-72页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的构建luxS基因的同源重组克隆载体以备将来进行luxS基因同源重组knockout突变株的研究.方法利用高保真的pfu DNA聚合酶,通过嵌套式PCR的方法,分别扩增出变形链球菌luxS基因的上下游片段(Xup,Xdn)以及大肠杆菌pH...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 周立华 薛斌 等 《细胞与分子免疫学杂志》 2006年22卷1期 18-21页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:构建hNRAGE基因的重组腺病毒载体,并研究其对293细胞细胞周期的影响.方法:采用PCR方法扩增hNRAGE基因片段,并亚克隆至腺病毒穿梭质粒载体pAdTrack-CMV中,构建穿梭质粒pAdTrack-CMV/hNRAGE.经测序...
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