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【中文期刊】 叶再娇 曾川 等 《中国兽医学报》 2024年44卷6期 1223-1228页
【摘要】 伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)能够引起猪只出现以呼吸困难、繁殖障碍和神经系统疾病等为特征的伪狂犬病,在世界范围内传播广泛.2011年以来,新现的PRV变异株导致传统疫苗株的免疫保护效果不佳,且原有的疫苗株制备方...
【关键词】 伪狂犬病病毒； CRISPR/Cas9； 增强绿色荧光蛋白；
【中文期刊】 滕路 成俊英 等 《遗传学报》 2004年31卷10期 1061-1065页 SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 构建pRex-1-EGFP表达载体,电穿孔转染小鼠ES细胞,用增强绿色荧光蛋白对起源于3.5 d胚泡内细胞团的小鼠胚胎干细胞进行特异性标记,用荧光显微观察EGFP的表达以及RT-PCR方法检测Rex-1基因在未分化和分化中ES细胞中的表达情...
【中文期刊】 何佳 邓峰美 等 《中国老年学杂志》 2018年38卷2期 302-305页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 构建和鉴定网素蛋白基因(PLS)1和增强绿色荧光蛋白(EGFP)共表达慢病毒载体,并检测其在人结直肠癌细胞株SW480中的表达水平.方法 采用聚合酶链反应(PCR)方法克隆PLS1基因;将PLS1基因连接到带有EGFP的慢病毒表达载体...
【中文期刊】 赵宇 武军华 等 《中国药理学与毒理学杂志》 2011年25卷5期 447-455页 ISTICPKUCA
【摘要】 目的 研究反式激活蛋白(TAT)蛋白转导结构域介导的融合蛋白的跨膜转运,以及氧依赖性降解(ODD)结构域介导融合蛋白在体内外不同氧分压环境中的降解作用.方法 将TAT,ODD以及增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因序列进行融合,构建了TAT-O...
【中文期刊】 王巍巍 张金元 《中国组织工程研究与临床康复》 2010年14卷36期 6695-6698页 ISTICPKUCA
【摘要】 背景:细胞移植前,将目的基因转染干细胞可增强细胞治疗效果.但要实现目的基因的高效转移并适度表达,载体系统的选择是关键.目的:将携带绿色荧光蛋白的慢病毒载体感染人脂肪源性干细胞,检测病毒感染效率及感染后的细胞活力.方法:利用脂质体转染法获取慢...
【中文期刊】 劳翼 修建成 等 《中国医学影像技术》 2008年24卷10期 1515-1518页 ISTICPKUCSCD
【摘要】 目的 探讨增强型绿色荧光蛋白质粒(EGFP)在大鼠骨骼肌微血管通透性增加的条件下表达的可行性.方法 20只清洁级Sprague-Dawley(SD)大鼠,随机均分为裸质粒组(P)、质粒+超声组(P+U)、质粒+微泡组(P+M)和质粒+超声+...
【中文期刊】 周小玉 费小明 等 《南京医科大学学报（自然科学版）》 2007年27卷7期 656-660,封2页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:采用逆转录病毒载体系统构建荧光标记的K562细胞模型.方法:将增强绿色荧光蛋白(EGFP)cDNA插入载体pCMV-hyg,构建重组质粒pCMV-EGFP-hyg,并与逆转录病毒载体质粒pCMV-G和pCMV-GP共转染293T细胞生...
【中文期刊】 方伯言 贾建平 等 《神经解剖学杂志》 2005年21卷6期 631-635页 ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 为了构建人野生型和突变型PS1(早老素-1,presenilin-1)-EGPF共表达蛋白的真核表达重组质粒pcDNA3.1/PS1-EGFP,本研究应用下述方法:对野生型pcDNA3.1/PS1(WT)质粒,采用一步法定点突变技术构建pc...
【关键词】 PS1(Presenilin-1)； 增强绿色荧光蛋白； 基因突变；
【中文期刊】 张崇本 张晓兰 等 《中国生物化学与分子生物学报》 2004年20卷5期 583-586页 MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 用增强绿色荧光蛋白特异性标记小鼠3T3-L1前脂肪细胞系.构建pap2-promoter-EGFP载体,电穿孔转染小鼠3T3-L1前脂肪细胞,显微荧光观察和RT-PCR确认aP2基因的内源表达.EGFP基因转入3T3-L1前脂肪细胞,观察到...
【关键词】 增强绿色荧光蛋白； 脂肪组织脂肪酸结合蛋白； 标记；
【中文期刊】 李成建 成俊英 等 《生物工程学报》 2004年20卷4期 607-609页 MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 细胞模型是研究细胞分化原理以及进行高通量筛选的有效工具.为了建立特异性标记的脂肪细胞分化模型,构建了包括脂肪细胞分化特异性表达基因PPARγ2的启动子在内的载体(pPPARγ2-promoter-EGFP),用电穿孔方法转染小鼠3T3-L1...
【关键词】 增强绿色荧光蛋白； 过氧化物酶体增殖物激活受体γ2； 标记；
【中文期刊】 刘嘉玲 林小容 等 《广州医科大学学报》 2018年46卷6期 29-32页 ISTIC
【摘要】 目的:构建一种新的复制子为RSF的温度调控型原核表达载体,以满足多蛋白共表达时对不同复制子表达载体的需求.方法:利用XhoI和XbaI双酶切pRSF-Duet-1获得RSF复制子序列和卡那霉素抗性筛选基因KanR,从pBV220载体中PCR...
【中文期刊】 贺可贵 闵祥栋 等 《中国现代医学杂志》 2016年26卷19期 6-10页 ISTICCA
【摘要】 目的 探讨转基因增强绿色荧光蛋白小鼠血小板黏附和聚集功能的变化.方法 选用12 ～14周龄转基因增强绿色荧光蛋白小鼠和C57BL/6J小鼠,戊巴比妥钠麻醉,心脏取血,肝素抗凝,全自动血细胞分析仪测定血小板参数,灌流小室法测定血小板在胶原面的...
【中文期刊】 刘锦宙 杨燕 等 《中国生化药物杂志》 2014年8期 69-72页 ISTICCA
【摘要】 目的 本文旨在构建STAT6-ORF表达载体,包装成慢病毒颗粒.方法 应用嵌套PCR法从生长状态良好的293FT细胞的cDNA中扩增STAT6的完整读码框片段(2544 bp),根据需要在引物的5'端分别引入Cla Ⅰ和Mlu Ⅰ酶切位点,...
【中文期刊】 徐海荣 汪步海 等 《现代肿瘤医学》 2013年21卷5期 984-987页 ISTICCA
【摘要】 目的:采用增强绿色荧光蛋白(EGFP)作为报告基因,用HepG2细胞构建可敏感、快速、方便地筛选出Ⅱ相酶诱导剂的评价体系.方法:通过分子生物学技术,将TK启动子克隆到pEGFP-N1上,再将人工合成的抗氧化反应元件(ARE)序列插入TK启动...
【中文期刊】 陈可 刘湘 《重庆医学》 2012年41卷5期 453-454,457,封2页 MEDLINEISTICCA
【摘要】 目的 利用绿色荧光蛋白作为报告基因,研究微RNAs(microRNAs)与靶点相互作用.方法 在pEGFP-C1下游非编码区插入含miR-122a作用靶序列HCV 5′UTR,构建pEGFP-UTR载体,将miR-122a与pEGFP-UT...
【中文期刊】 田文 曾定尹 等 《中国组织化学与细胞化学杂志》 2009年18卷3期 304-310页 ISTICCSCDCA
【摘要】 目的 观察小鼠心肌梗死后骨髓造血干细胞在心脏内的分化及细胞因子的影响.方法 C57/BL6小鼠60只分为骨髓动员组和对照组,先后行脾切除、骨髓移植(骨髓供体为增强绿色荧光蛋白转基因小鼠)、骨髓动员及建立心肌梗死模型.心肌梗死后3周将小鼠心脏...
【中文期刊】 朱慧 曹传华 等 《武汉大学学报（医学版）》 2008年29卷2期 186-189页 ISTICCABP
【摘要】 目的:研究电离辐射作用下早期生长反应因子1(Egr-1)启动子调控增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因在人结肠癌细胞SW480中的表达.方法:利用基因重组手段构建质粒Egr-1-EGFP;阳离子脂质体介导转染人结肠癌细胞SW480,给予不同...
【中文期刊】 赵琪 黄学文 等 《江苏大学学报（医学版）》 2007年17卷3期 225-227,231页 ISTICCA
【摘要】 目的:构建能在无细胞翻译系统中表达天然型增强绿色荧光蛋白(EGFP)的原核表达载体.方法:以质粒pEGFP-N1为模板扩增EGFP基因,NcoI和HindⅢ双酶切EGFP基因和pET28a载体.T4 DNA连接酶连接,转化E.coli DH...
【关键词】 增强绿色荧光蛋白(EGFP)； 重组载体； 无细胞翻译系统；
【中文期刊】 黄学文 潘杰 等 《检验医学》 2007年22卷2期 146-149页 ISTICCA
【摘要】 目的 构建能在体外大量表达可溶性天然型增强绿色荧光蛋白(EGFP)的pET28a-EGFP原核表达载体.方法 以质粒pEGFP-N1为模板扩增EGFP基因,EcoR Ⅰ和Hind Ⅲ双酶切EGFP基因序列和pET28a载体.T4 DNA连接...
【中文期刊】 刘建雄 毛伯镛 等 《中华神经外科疾病研究杂志》 2006年5卷1期 16-18页 ISTICCA
【摘要】 目的用增强绿色荧光蛋白基因(EGFP)的表达载体pIRES2-EGFP转染神经干细胞(neural stem cells,NSCs),检测该真核表达载体对NSCs的转染效率及EGFP的表达状态,为用NSCs为载体基因治疗中枢神经系统疾病提供...
【关键词】 增强绿色荧光蛋白基因； 神经干细胞； 基因转染；
【中文期刊】 夏春祥 解满霞 等 《江苏大学学报（医学版）》 2006年16卷5期 380-384,插1页 ISTICCA
【摘要】 目的: 应用人U6启动子构建RNA干扰载体pUC19NU,具有新霉素抗性且能够在真核细胞中复制,成为基因功能和基因治疗研究等领域的RNAi技术的工具.方法: 通过PCR从人类基因组中得到人U6 snRNA启动子,并针对增强绿色荧光蛋白(EG...
【中文期刊】 李劲 刘琳 《中南民族大学学报（自然科学版）》 2016年35卷1期 39-43页
【摘要】 为研究禽类多瘤病毒晚期基因多顺反子翻译起始调控的机制,设计和构建了以增强绿色荧光蛋白( EGFP)报告基因替代病毒APV-1野生型的晚期结构蛋白VPs基因的真核双顺反子表达载体,并观察其在转染进入禽类原代成纤维细胞中的表达翻译状态。以APV...
【中文期刊】 吴西军 董智慧 等 《信息记录材料》 2016年17卷5期 74-78页
【摘要】 目的:构建携带EC-SOD基因和增强绿色荧光蛋白(EGFP)报告基因的真核表达载体,并观察其在人脐带间充质干细胞(huMSCs)细胞中的表达.方法:从人外周血中提取总RNA,逆转率制备cDNA,采用聚合酶链式反应(PCR)中获取EC-SOD...
【中文期刊】 包莉 《湖北民族学院学报（医学版）》 2009年26卷2期 4-6,封3页
【摘要】 目的 构建针对增强绿色荧光蛋白(EGFP)的shRNA真核表达载体pGenesil-1-EGFP-shRNA/U6.方法 设计并合成针对EGFP的shRNA DNA片段,退火后连接到真核表达载体pGenesil-1上,通过测序证实载体构建成...
【中文期刊】 刘季芳 李伟 等 《自然科学进展》 2007年17卷9期 1174-1180页
【摘要】 通过PCR技术从异源四倍体鲫鲤基因组DNA中分离到Sox4基因部分基序.序列分析表明,其5'端调控区具有多种启动子所特有的序列元件,如TATA框,CAAT框等,据此推测,它具有启动子活性.采用高保真PCR方法克隆了异源四倍体鱼Sox4基因5...
【关键词】 Sox4； 动子； GFP(增强绿色荧光蛋白)；
【中文期刊】 杨娜娜 史卫峰 等 《泰山医学院学报》 2007年28卷8期 586-588页
【摘要】 目的 构建含报告基因增强绿色荧光蛋白(EGFP)的分泌型真核表达载体pSecTag-EGFP,用以研究pSecTag/HygroB转染鸡胚胎成纤维细胞的转染效率,为目的基因的成功表达奠定基础.方法 用PCR方法克隆得到EGFP基因,通过酶切...
【中文期刊】 马玉珍 扈廷茂 等 《内蒙古大学学报（自然科学版）》 2007年38卷6期 660-664页
【摘要】 体外采集绵羊卵丘卵母细胞复合体,成熟培养24 h,经过体外受精培养17 h,比较高速离心对胚胎发育的影响;高速离心可以使黑色脂滴甩到一边从而使受精卵原核清晰可见.然后将绵羊乳腺特异表达人肝细胞再生增强因子和真核细胞表达增强绿色荧光蛋白(En...
【中文期刊】 温志远 葛金英 等 《中国预防兽医学报》 2007年29卷12期 905-911页
【摘要】 通过负链RNA病毒反向遗传操作技术,成功救获了表达增强绿色荧光蛋白(Enhanced green fluorescent protein,EGFP)的重组印地安纳株水疱性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus Ind...
【中文期刊】 马玉珍 石玉涛 等 《内蒙古师范大学学报（自然科学汉文版）》 2006年35卷3期 340-343页
【摘要】 从人血液中提取总DNA,利用PCR技术扩增人肝细胞再生增生因子基因,将其插入表达载体pEGFP-C1的多克隆位点中,构建增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescence protein gene,EGFP)和人肝细胞...
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