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【中文期刊】 崔铮琦 饶昕雨 等 《数理医药学杂志》 2024年37卷6期 412-417页CA
【摘要】 目的 在大肠杆菌中重组表达并纯化得到高产量、高纯度的鸢尾素(Irisin)重组蛋白,为后续Irisin的功能研究奠定基础.方法 对Irisin基因CDS序列密码子优化后进行基因合成,通过一步克隆连接法构建重组质粒pET-30a-Irisin...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 刘彦 叶和春 等 《植物学报》 2003年45卷5期 608-613页SCIMEDLINEISTICCSCDCABP
【摘要】 用RT-PCR方法从青蒿(Artemisia annua L.)中克隆了一个1 539 bp全长鲨烯合酶cDNA.青蒿鲨烯合酶氨基酸序列与拟南芥、烟草、人类、酵母鲨烯合酶的一致性分别为70%、77%、44%和39%.青蒿鲨烯合酶基因组DNA...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张志珊 严延生 等 《中国人兽共患病学报》 2012年28卷5期 421-424页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 利用大肠杆菌表达登革病毒2型外膜蛋白,获得重组抗原应用于血清学检测.方法 用RT-PCR法扩增登革2型病毒去除C端100个氨基酸的外膜蛋白基因片段,与表达载体pET-30a连接,构建重组表达载体,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,...
- 概要：
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【中文期刊】 刘运洪 侯宗柳 《中国组织工程研究与临床康复》 2011年15卷15期 2821-2824页ISTICPKUCA
【摘要】 背景:抗原结合片段在大肠杆菌中表达量低是制约其大规模生产和应用的主要因素,通过对宿主细胞、表达载体、表达条件和纯化条件等进行改造与优化,将有可能获得基因工程抗体的高效表达.目的:总结并介绍抗原结合片断抗体在大肠杆菌中的表达和纯化的最新策略....
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 李艳平 唐金宝 等 《中国免疫学杂志》 2011年27卷6期 545-547页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:ZZ亲和肽是源于葡萄球菌蛋白A的人工合成序列,能结合IgG抗体Fc段,在免疫学领域具有广泛的应用价值.本研究利用大肠杆菌表达C端带有6×His标签的ZZ亲和肽,并测定其生物学活性.方法:以pEZZ18为模板PCR扩增ZZ亲和肽基因,克...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 马君兰 束长龙 等 《生物技术通报》 2011年2期 80-84页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 对利用苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)强启动子--cry1Ac基因启动子p1Ac指导cry基因在大肠杆菌中的表达进行了研究.结果显示,大肠杆菌中由启动子p1Ac指导表达的Cry1Ac蛋白与苏云金芽胞杆菌来...
【关键词】 cry1Ac基因启动子p1Ac；大肠杆菌；Cry1Ac蛋白；
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【中文期刊】 许少飞 徐杰 等 《南方医科大学学报》 2011年31卷3期 397-402页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 建立一套高纯度、高活性表达糖原合成酶激酶3β的技术.方法 分别采用大肠杆菌和杆状病毒昆虫细胞蛋白表达系统表达糖原合成酶激酶3β,通过His和GST标签两步纯化目的 蛋白,SDS-PAGE观察目的 蛋白的纯度,激酶反应观察目的 蛋白的活...
【关键词】 糖原合成酶激酶3β；大肠杆菌表达系统；杆状病毒昆虫细胞表达系统；
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 王中山 向泉桔 等 《遗传》 2010年32卷5期 505-511页MEDLINEISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 为深入研究大肠杆菌谷胱甘肽转运系统的蛋白质结构和功能,对该系统中的gsiB基因进行了克隆和表达条件的优化.根据大肠杆菌谷胱甘肽转运系统中底物结合蛋白gsiB基因序列,利用PCR方法扩增到该基因的编码区序列,利用SLIC (Sequence ...
【关键词】 大肠杆菌；谷胱甘肽转运系统；细胞周质底物结合蛋白；
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【中文期刊】 姜艳芳 王朝霞 等 《中国免疫学杂志》 2009年25卷2期 164-166,170页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:克隆人白细胞介素33(human interleukin-33,hIL-33)基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株,并对纯化的蛋白进行生物活性的初步测定.方法:采用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)技术从人成纤维细胞总RNA中反转录并...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 程建平 邹全明 等 《中国免疫学杂志》 2007年23卷5期 407-410,414页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 获取重组表达肠出血性大肠杆菌O157的溶血素(Ehx)保护性片段,并研究其基本的生物学及免疫学特性.方法 PCR法从EHEC O157-SMR2菌株克隆O157:H7的HlyA亚单位的N端片段(436个氨基酸),T-A克隆后构建表达载...
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【中文期刊】 李振秋 王花红 等 《应用与环境生物学报》 2007年13卷3期 309-312页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 利用PCR方法,将经RACE方法克隆到的中药青蒿鲨烯合酶cDNA(AF302464)开放阅读框的3'末端截短99bp,插入到原核表达载体pET30a(+)的NcoⅠ和BamHⅠ酶切位点之间,构建N端和C端均携带有HIS6表达标签的鲨烯合酶重...
- 概要：
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【中文期刊】 孔建强 王伟 等 《药学学报》 2007年42卷9期 1000-1006页ISTICPKUCSCDCABP
【摘要】 将人工合成的SARS-CoV三个未知功能小蛋白X4、X5和ORF10的编码基因克隆到载体pET32a中,构建其表达载体.再将这些表达载体转入大肠杆菌中进行表达,SDS-PAGE和Western blotting结果证明,X4、X5和ORF1...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 云雪霞 胡静 等 《中国人兽共患病学报》 2007年23卷2期 168-171页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的 构建霍乱弧菌肠毒素B亚单位(Cholera toxin B subunit,CTB)基因的大肠杆菌表达重组质粒,并观察其在大肠杆菌和双歧杆菌中的表达.方法 从pBI121质粒PCR扩增获得CTB基因片断,克隆到大肠杆菌载体pGEX-4...
【关键词】 霍乱弧菌肠毒素B亚单位；双歧杆菌；大肠杆菌；
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【中文期刊】 刘义庆 陈子江 等 《生物工程学报》 2006年22卷3期 413-417页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 克隆人白细胞介素-26(human interleukin-26,hIL-26)基因,构建高效稳定的大肠杆菌表达菌株.对GenBank上报道的hIL-26基因进行序列分析后设计合成引物,利用RT-PCR技术从人外周血单个核细胞(PBMC)总...
- 概要：
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- 结论：
【中文期刊】 谢秋玲 陈小佳 等 《生殖与避孕》 2006年26卷4期 195-199,213页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:对已构建好的表达pZP3β蛋白(pZP130)工程菌的培养条件进行优化,通过在5 L罐中发酵和Ni柱纯化,以期获取较大量目的产物.方法:在摇瓶中改变不同的培养及诱导条件,比较工程菌的生长和目的蛋白的表达,优化发酵条件;并在5 L发酵罐...
- 概要：
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【中文期刊】 付涌水 江朝富 等 《中国病理生理杂志》 2006年22卷1期 152-155页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:于大肠杆菌表达抗-D抗体Fab段基因,为真核载体表达完整的人抗-D抗体奠定基础.方法:将已克隆测序的Fab段基因亚克隆到pComb3噬粒载体,用PCR和限制性内切酶酶切鉴定后于大肠杆菌进行表达,表达产物用SDS-PAGE和ELISA等...
- 概要：
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【中文期刊】 牛丹丹 沈微 等 《微生物学杂志》 2005年25卷2期 9-12页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 大肠杆菌是研究和高效表达异源蛋白的常用宿主细胞.由于大肠杆菌和真核生物及大部分古细菌在同义密码子上的使用有很大的差异,来源于真核或古细菌的外源基因在大肠杆菌中表达时,常常由于其带有稀有密码子而带来翻译方面的问题,如产生移码突变和表达量下降等...
- 概要：
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【中文期刊】 陈欣虹 刘琼 等 《浙江大学学报（医学版）》 2005年34卷3期 201-206页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:表达蓖麻毒素A链(RTA)与绿色荧光蛋白(GFP)的融合蛋白 (GFP-RTA),用于蓖麻毒素A链在细胞内的转运机理研究.方法:采用PCR法从重组质粒pKK233.2-RTA中扩增出蓖麻毒素A链基因,然而将其插入真核表达质粒pEGFP...
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【中文期刊】 王琦 葛宝丰 等 《中国矫形外科杂志》 2004年12卷21期 1711-1714页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:扩增、克隆人成骨蛋白-1(human osteogenic protein-1,hOP-1)成熟肽cDNA基因,并利用大肠杆菌表达hOP-1成熟肽.方法:PCR扩增hOP-1成熟肽cDNA基因,将其克隆入受控于含有PRPL启动子的温控...
- 概要：
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【中文期刊】 秦瑞峰 顾晓明 等 《实用口腔医学杂志》 2003年19卷4期 359-361页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:对鼠肌肉转录调节因子MyoD基因扩增、鉴定,利用大肠杆菌表达其成熟肽.方法:MyoD cDNA基因原始质粒转化,提取质粒,酶切鉴定.然后将基因克隆入大肠杆菌非融合表达载体pBV220,受控于启动子PRRL,重组质粒ppBV-my以大肠...
- 概要：
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【中文期刊】 顾维丰 王玉刚 等 《北京医科大学学报》 1999年2期 147-148页MEDLINEISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:获得纯化的由大肠杆菌表达的小鼠Fas配体(Fas ligand, FasL ).方法:以质粒pET-15b为载体,在大肠杆菌BL21( DE3)中表达小鼠的FasL,用金属螯合亲和层析法纯化.结果:转化菌中,重组质粒是稳定的,异丙基-...
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【中文期刊】 张津利 朱锡华 《中国免疫学杂志》 1999年5期 207-208页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:在大肠杆菌表达人淋巴毒素cDNA.方法:将本室克隆的人淋巴毒素cDNA亚克隆于原核表达载体pBV220,温控法诱导重组菌,SDS-PAGE和Western-blotting检测和鉴定结果,MTT比色法测定重组LT活性.结果:成功地表达...
- 概要：
- 方法：
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【中文期刊】 黄欣 赵忠良 等 《中国免疫学杂志》 1999年15卷9期 405-407页ISTICPKUCSCDCA
【摘要】 目的:通过优化设计利用大肠杆菌表达人白细胞介素4(IL-4)并提高其表达量.方法:根据原核翻译起始序列的局部二级结构自由能,设计了AUG上下游序列,并在人IL-4基因下游插入部分大肠杆菌LacZ序列以提高mRNA的稳定性.结果:成功地构建了...
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【中文期刊】 卢俊文 张薷月 等 《工业微生物》 2018年48卷2期 1-6页ISTICCA
【摘要】 本文优化了表达绿色气球菌丙酮酸氧化酶的重组大肠杆菌的诱导条件.优化了诱导温度、诱导剂IPTG浓度、诱导时重组大肠杆菌的浓度、溶氧等条件后发现最佳的诱导条件为25℃、IPTG 0.5 mmol/L、OD600 0.5细胞浓度、250 mL摇瓶...
- 概要：
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【中文期刊】 姚梦 赵丹 等 《生命科学研究》 2017年21卷6期 477-481页ISTICCA
【摘要】 κ-SLPTX-Ssm2e是一条通过生物信息学同源序列分析获得的与已知具有杀虫活性的毒素κ-SLP-TX-Ssm2a高度同源的少棘蜈蚣毒素,由31个氨基酸残基组成,且含有3对二硫键.为了后续便于对其结构和功能进行研究,现采用原核表达与纯化的...
【关键词】 κ-SLPTX-Ssm2e；杀虫肽；少棘蜈蚣；
- 概要：
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【中文期刊】 王准 陈玉娟 等 《科学技术与工程》 2019年19卷1期 71-77页
【摘要】 纳米抗体具有相对分子质量小、稳定性高、特异性强以及能够穿过血脑屏障等众多优势,而且其能够通过大肠杆菌、酵母等简单微生物大量表达.大肠杆菌周质表达纳米抗体是目前纳米抗体制备主要的方法之一,但是纳米抗体的表达水平还相对较低.以pET22 b和p...
- 概要：
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【中文期刊】 夏颖 沈微 等 《工业微生物》 2014年44卷3期 35-40页ISTICCA
【摘要】 大肠杆菌是应用最广泛的外源基因表达宿主.为探索阻断副产物产生途径对提高大肠杆菌表达外源蛋白的能力,本实验以野生型大肠杆菌菌株为基础,删除其乳酸脱氢酶基因(ldhA),磷酸烯醇式丙酮酸合成酶基因(pps)和丙酮酸甲酸裂解酶基因(pflB).在...
- 概要：
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【中文期刊】 彭国瑞 彭小兵 等 《中国兽医杂志》 2018年54卷12期 33-36页
【摘要】 为了制备大肠杆菌源的重组腐败梭菌α毒素并对其生物学特性鉴定.利用PCR扩增α毒素基因,构建重组表达质粒pET32a-csa,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达,对产物的反应原性、溶血活性、细胞毒性、小鼠致死毒性、毒力和毒...
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 张晓红 夏春波 等 《山东医药》 2011年51卷7期 35-37页ISTICCA
【摘要】 目的 构建pTAT-XIAP原核表达载体,以获得pTAT-XIAP融合蛋白;为其用于神经系统疾病的治疗奠定基础.方法 体外合成大鼠XIAP基因,将其插入pTAT-HA质粒,构建pTAT-XIAP融合蛋白表达载体,转入大肠杆菌表达菌株BL21...
【关键词】 免疫缺陷病毒-反式转录激活因子；X连锁调亡抑制蛋白；大肠杆菌；
- 概要：
- 方法：
- 结论：
【中文期刊】 王少蕾 许龙 等 《生物技术通讯》 2009年20卷3期 303-306页ISTICCA
【摘要】 目的:通过在大肠杆菌中分段表达禽流感病毒聚合酶酸性蛋白(PA蛋白),探索PA基因中可能影响表达的区域.方法:构建分段缺失的PA蛋白突变体,用IPTG在大肠杆菌Rosetta Gami B(DE3)中诱导表达,比较各突变体的表达效率.结果:N...
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